發(fā)布時(shí)間：2017-10-15 00:22

  本文關(guān)鍵詞：選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑（SERMs）類藥物治療AD的研究

  更多相關(guān)文章： 阿爾茨海默癥 雌激素 選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑 β 淀粉樣蛋白 谷氨酸 雷洛昔芬

【摘要】：阿爾茨海默癥(AD)嚴(yán)重影響認(rèn)知能力并損害記憶力。阿爾茨海默病是最常見(jiàn)和最重要的腦變性疾病,且AD的發(fā)病率呈逐年顯著上升趨勢(shì),其中女性發(fā)病率為男性發(fā)病率的3倍。其發(fā)病機(jī)理沒(méi)有闡明,有Aβ學(xué)說(shuō)以及神經(jīng)興奮性損傷學(xué)說(shuō)等等。Aβ學(xué)說(shuō)是指腦內(nèi)β淀粉樣蛋白(Aβ)沉積壓迫神經(jīng)導(dǎo)致記憶減退。神經(jīng)興奮性學(xué)說(shuō)是認(rèn)為一些因素引起神經(jīng)興奮毒性而導(dǎo)致神經(jīng)損傷從而使記憶減退。臨床上沒(méi)有能夠特異夠治療阿爾茨海默癥(AD)的方法,目前在研究的抗AD的藥物主要是針對(duì)Aβ和tau蛋白過(guò)磷酸化,但其臨床試驗(yàn)多以失敗告終。由于女性絕經(jīng)后患者發(fā)病率高于男性,女性絕經(jīng)后雌激素明顯減少而雌激素能夠改善記憶,對(duì)患者有一定效果,但是雌激素主要通過(guò)結(jié)合其受體產(chǎn)生作用,不同組織器官有不同的雌激素受體,因此雌激素在中樞神經(jīng)系統(tǒng)起作用時(shí)能夠激動(dòng)其他組織器官上的受體,如卵巢和子宮產(chǎn)生副作用。而選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERMs)由于在不同組織有激動(dòng)或者拮抗作用,使其在激動(dòng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)受體時(shí)并不會(huì)激動(dòng)其他組織上的受體,而減少了雌激素的副作用,因而SERMs成為雌激素的替代藥物�；谝陨侠碚�,本文選用選擇性雌激素類藥物作用于體外建立的神經(jīng)細(xì)胞模型,檢測(cè)藥物的作用。而本文所選細(xì)胞為SHSY5Y細(xì)胞,是一種腫瘤細(xì)胞,需要經(jīng)誘導(dǎo)分化后成為所需要的細(xì)胞,因此本文主要包括以下內(nèi)容:(1)培養(yǎng)SHSY5Y細(xì)胞,用無(wú)血清、Aβ、谷氨酸等建立未分化時(shí)候的細(xì)胞損傷模型,用MTT、CCK-8、LDH等實(shí)驗(yàn)方法篩選出最佳條件,并檢測(cè)SERMs類藥物雷洛昔芬的保護(hù)作用。(2)用RA誘導(dǎo)SHSY5Y細(xì)胞分化,并通過(guò)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察,western-blot、細(xì)胞免疫熒光的方法檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞特異性蛋白MAP-2的表達(dá)來(lái)選出最佳的誘導(dǎo)細(xì)胞表達(dá)的條件。(3)用無(wú)血清、Aβ、谷氨酸等處理分化后的細(xì)胞建立損傷模型,篩選出最佳條件,并檢測(cè)雷洛昔芬的保護(hù)作用。目前本文已完成未分化及分化后細(xì)胞模型的建立工作,并檢測(cè)出所選藥物對(duì)體外的細(xì)胞模型有一定的保護(hù)作用,但是誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)中只通過(guò)細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化找出合適的條件,但是并沒(méi)有檢測(cè)出特定蛋白的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：阿爾茨海默癥 雌激素 選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑 β 淀粉樣蛋白 谷氨酸 雷洛昔芬
【學(xué)位授予單位】：華僑大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R749.16
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-9
• 第一章 引言9-21
• 1.1 阿爾茨海默癥的研究近況9-13
• 1.1.1 阿爾茨海默癥的現(xiàn)狀9
• 1.1.2 國(guó)內(nèi)外的研究動(dòng)態(tài)9-13
• 1.2 雌激素類藥物的研究現(xiàn)狀13-15
• 1.2.1 雌激素能改善記憶的可能的作用機(jī)制13-14
• 1.2.2 雌激素藥物的局限性14-15
• 1.3 選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑（SERMs）15-16
• 1.4 AD體外模型的建立16-19
• 1.5 本工作的目的及意義19-21
• 第二章 SH-SY5Y細(xì)胞無(wú)血清模型的建立21-31
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器21-23
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料21-22
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器22-23
• 2.2 實(shí)驗(yàn)步驟23-27
• 2.2.1 SHSY5Y細(xì)胞復(fù)蘇23
• 2.2.2 SHSY5Y細(xì)胞換液23-24
• 2.2.3 SHSY5Y細(xì)胞傳代24
• 2.2.4 SHSY5Y細(xì)胞凍存24-25
• 2.2.5 SHSY5Y細(xì)胞計(jì)數(shù)與鋪板25-27
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-28
• 2.4 小結(jié)與討論28-31
• 第三章 全反式維甲酸誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞分化31-47
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器31-37
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料31-36
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器36-37
• 3.2 實(shí)驗(yàn)步驟37-41
• 3.2.1 加入RA后細(xì)胞形態(tài)變化37
• 3.2.2 檢測(cè)SHSY5Y分化相關(guān)蛋白表達(dá)37-40
• 3.2.3 細(xì)胞免疫熒光40-41
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果41-45
• 3.3.1 細(xì)胞誘導(dǎo)分化的形態(tài)變化41-43
• 3.3.2 誘導(dǎo)分化后神經(jīng)特異性蛋白的標(biāo)記43-45
• 3.3.3 細(xì)胞免疫熒光結(jié)果45
• 3.4 小結(jié)與討論45-47
• 3.4.1 小結(jié)45
• 3.4.2 討論45-47
• 第四章 SERMs類藥物的神經(jīng)保護(hù)作用47-59
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器47-49
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料47
• 4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑47-49
• 4.2 實(shí)驗(yàn)步驟49-51
• 4.2.1 未分化SHSY5Y細(xì)胞的損傷49-51
• 4.2.2 RA誘導(dǎo)分化后的細(xì)胞損傷51
• 4.2.3 藥物對(duì)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用51
• 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果51-57
• 4.3.1 細(xì)胞損傷結(jié)果51-53
• 4.3.2 藥物對(duì)未分化細(xì)胞損傷的保護(hù)作用53-57
• 4.4 小結(jié)與討論57-59
• 第五章 結(jié)論59-61
• 參考文獻(xiàn)61-67
• 致謝67-69
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷69

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 吳方建;阿爾茨海默病發(fā)病機(jī)制及藥物治療[J];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2004年02期

2 羅增榮,黃紹寬,洪佩賢,陳盛強(qiáng),柳息洪,燕啟江,劉利東,陳柏銘;Alzheimer病與載脂蛋白Eε4等位基因及血脂的關(guān)聯(lián)[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2003年09期

，

本文編號(hào)：1034024