目的:觀察高遷移率族蛋白B1（HMGB1）對人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC）屏障通透性的損傷及普通肝素（UFH）的保護作用,探討UFH對HMGB1介導的血管內(nèi)皮鈣黏蛋白（VE-cadherin）表達下調(diào)的保護機制。研究方法:體外培養(yǎng)HUVEC并傳代,待細胞融合生長至80%時隨機分為4組:磷酸鹽緩沖液（PBS）對照組（200μL PBS）、重組人高遷移率族蛋白B1（rhHMGB1）處理組（100μg/L rhHMGB1）、UFH對照組（10kU/L UFH）、UFH預處理組（10 kU/L UFH+100μg/L rhHMGB1）。各組細胞經(jīng)不同處理24 h后,采用四甲基偶氮唑鹽（MTT）比色法測定內(nèi)皮細胞活性,采用Transwell法測定內(nèi)皮細胞通透性,采用免疫熒光法觀察VE-cadherin的表達及分布,采用蛋白質(zhì)免疫印跡試驗（Western Blot）測定VE-cadherin及磷酸化p38絲裂素活化蛋白激酶（p-p38MAPK）的蛋白表達。結(jié)果:經(jīng)100μg/L的rhHMGB1處理24 h后,內(nèi)皮細胞活性與PBS對照組差異無統(tǒng)計學意義（A值:0.230±0.004比0.255±0.... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：36 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組HUVEC培養(yǎng)24h后VE-cadherinp-p38MAPK

中國醫(yī)科大學碩士學位論文9圖3.2熒光顯微鏡下觀察各組人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC）血管內(nèi)皮鈣黏蛋白（VE-cadherin）陽性表達綠色熒光為VE-cadherin陽性表達（IF×400）。注：圖中熒光顯微鏡下觀察各組人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC）血管內(nèi)皮鈣黏蛋白（VE-cadherin）陽性表達綠色熒光為VE-cadherin陽性表達。PBS對照組（A）可見免疫熒光線條連續(xù)且光滑；rhHMGB1處理組（B）可見熒光線條暗淡，多處斷裂；UFH對照組（C）可見熒光線條較為清晰；UFH預處理組（D）可見免疫熒光較rhHMGB1處理組連接更為緊密免疫熒光染色。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3597388