目的臨床觀察發(fā)現(xiàn)，嚴(yán)重創(chuàng)傷病人膿毒血癥發(fā)生率明顯增加。一些研究認(rèn)為，創(chuàng)傷后組織、細(xì)胞破碎產(chǎn)物能夠初步激活免疫系統(tǒng)，如果此時(shí)再發(fā)生病原微生物入侵，其結(jié)果是炎癥因子過(guò)度釋放，并提出TLR4超敏的概念。已有研究發(fā)現(xiàn)，炎癥細(xì)胞Golgi體內(nèi)存在大量TLR4，但其在膿毒癥的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中有何作用，是否參與了創(chuàng)傷后膿毒癥過(guò)程中TLR4超敏反應(yīng)，目前尚不清楚；既往已有資料證實(shí)神經(jīng)肽Y可抑制炎癥反應(yīng),它能否抑制致敏細(xì)胞過(guò)度釋放炎癥因子，尚待證實(shí)。為此，本課題擬以健康正常人免疫細(xì)胞PBMC為對(duì)象，通過(guò)建立PBMC TLR4的致敏細(xì)胞模型，旨在探索Golgi體在TLR4超敏中的作用及神經(jīng)肽Y對(duì)超敏細(xì)胞釋放炎癥因子的影響，以期深入了解TLR4致敏的機(jī)制，同時(shí)為治療創(chuàng)傷后過(guò)度炎癥反應(yīng)提供新的途徑。方法1.梯度離心法從濃縮人外周血白細(xì)胞中分離出PBMC,以1x106/ml接種于24孔細(xì)胞培養(yǎng)板，實(shí)驗(yàn)設(shè)立空白對(duì)照組、Fn組、LPS組、Fn+LPS復(fù)合組，以5ug/ml Fn或（和）1ug/mlLPS刺激PBMC0.5、2、4、8、12h后收集細(xì)胞培養(yǎng)上清，酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)其炎癥因子IL-6、TNF-α... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Fibronectin,LPS刺激PBMC后對(duì)IL-10釋放的影響

Westernblotting檢測(cè)NPY處

Westernblotting檢測(cè)NPY處

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3227332