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自噬對(duì)膿毒癥小鼠中性粒細(xì)胞PD-L1調(diào)控的機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-05-13 13:09
  【研究目的】研究膿毒癥時(shí)中性粒細(xì)胞自噬的改變對(duì)小鼠中性粒細(xì)胞程序性死亡配體-1(PD-L1)的調(diào)控作用!狙芯糠椒ā坎捎眉訖(quán)基因共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)分析方法對(duì)Affymetrix Mouse Transcriptome Array1.0基因芯片檢測(cè)的差異基因進(jìn)行分析,根據(jù)相異系數(shù)構(gòu)建共表達(dá)模塊,對(duì)共表達(dá)模塊進(jìn)行GO term和KEGG pathway富集分析,尋找與膿毒癥時(shí)中性粒細(xì)胞的功能改變密切相關(guān)的表型。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)采用小鼠盲腸結(jié)扎穿孔實(shí)驗(yàn)(CLP)來模擬膿毒癥小鼠模型,在CLP術(shù)后4天留取4個(gè)臟器(肺臟、肝臟、脾臟、胰腺)進(jìn)行免疫組化染色,觀察各臟器中性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)情況;同時(shí)通過免疫熒光染色檢測(cè)術(shù)后1天和4天CLP小鼠肺臟中性粒細(xì)胞PD-L1和自噬標(biāo)志物L(fēng)C3的表達(dá)水平。在自噬激動(dòng)劑雷帕霉素(RAPA)的干預(yù)下,檢測(cè)術(shù)后1天和4天CLP小鼠肺臟中性粒細(xì)胞PD-L1和自噬標(biāo)志物L(fēng)C3的表達(dá)水平。體外實(shí)驗(yàn)采用脂多糖(LPS)刺激小鼠骨髓中性粒細(xì)胞模型,并且用自噬激動(dòng)劑RAPA和自噬抑制劑巴佛洛霉素A1(Baf)進(jìn)行干預(yù)刺激,在基因和蛋白層面分別檢測(cè)PD-L1和LC3的表達(dá)水平。與此同時(shí),采用流式細(xì)... 

【文章來源】:江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:72 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
前言
第一部分 基于加權(quán)基因共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)分析研究膿毒癥中性粒細(xì)胞關(guān)鍵功能的變化
    第一節(jié) 小鼠骨髓中性粒細(xì)胞的提取與鑒定
        1.引言
        2.實(shí)驗(yàn)材料
        3.實(shí)驗(yàn)方法
        4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.討論
        6.結(jié)論
    第二節(jié) 基因芯片與加權(quán)基因共表達(dá)分析的建立
        1.引言
        2.實(shí)驗(yàn)材料
        3.實(shí)驗(yàn)方法
        4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.討論
        6.結(jié)論
第二部分 自噬的改變對(duì)膿毒癥時(shí)中性粒細(xì)胞功能的影響
    第一節(jié) 膿毒癥對(duì)中性粒細(xì)胞PD-L1 表達(dá)水平的影響
        1.引言
        2.實(shí)驗(yàn)材料
        3.實(shí)驗(yàn)方法
        4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.討論
        6.結(jié)論
    第二節(jié) 自噬的改變對(duì)膿毒癥時(shí)中性粒細(xì)胞PD-L1 表達(dá)水平及凋亡的影響
        1.引言
        2.實(shí)驗(yàn)材料
        3.實(shí)驗(yàn)方法
        4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.討論
        6.結(jié)論
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述 中性粒細(xì)胞自噬的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):3184075

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