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自噬對膿毒癥小鼠中性粒細胞PD-L1調(diào)控的機制研究

發(fā)布時間:2021-05-13 13:09
  【研究目的】研究膿毒癥時中性粒細胞自噬的改變對小鼠中性粒細胞程序性死亡配體-1(PD-L1)的調(diào)控作用。【研究方法】采用加權(quán)基因共表達網(wǎng)絡(luò)分析方法對Affymetrix Mouse Transcriptome Array1.0基因芯片檢測的差異基因進行分析,根據(jù)相異系數(shù)構(gòu)建共表達模塊,對共表達模塊進行GO term和KEGG pathway富集分析,尋找與膿毒癥時中性粒細胞的功能改變密切相關(guān)的表型。體內(nèi)實驗采用小鼠盲腸結(jié)扎穿孔實驗(CLP)來模擬膿毒癥小鼠模型,在CLP術(shù)后4天留取4個臟器(肺臟、肝臟、脾臟、胰腺)進行免疫組化染色,觀察各臟器中性粒細胞的浸潤情況;同時通過免疫熒光染色檢測術(shù)后1天和4天CLP小鼠肺臟中性粒細胞PD-L1和自噬標志物LC3的表達水平。在自噬激動劑雷帕霉素(RAPA)的干預下,檢測術(shù)后1天和4天CLP小鼠肺臟中性粒細胞PD-L1和自噬標志物LC3的表達水平。體外實驗采用脂多糖(LPS)刺激小鼠骨髓中性粒細胞模型,并且用自噬激動劑RAPA和自噬抑制劑巴佛洛霉素A1(Baf)進行干預刺激,在基因和蛋白層面分別檢測PD-L1和LC3的表達水平。與此同時,采用流式細... 

【文章來源】:江蘇大學江蘇省

【文章頁數(shù)】:72 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
前言
第一部分 基于加權(quán)基因共表達網(wǎng)絡(luò)分析研究膿毒癥中性粒細胞關(guān)鍵功能的變化
    第一節(jié) 小鼠骨髓中性粒細胞的提取與鑒定
        1.引言
        2.實驗材料
        3.實驗方法
        4.實驗結(jié)果
        5.討論
        6.結(jié)論
    第二節(jié) 基因芯片與加權(quán)基因共表達分析的建立
        1.引言
        2.實驗材料
        3.實驗方法
        4.實驗結(jié)果
        5.討論
        6.結(jié)論
第二部分 自噬的改變對膿毒癥時中性粒細胞功能的影響
    第一節(jié) 膿毒癥對中性粒細胞PD-L1 表達水平的影響
        1.引言
        2.實驗材料
        3.實驗方法
        4.實驗結(jié)果
        5.討論
        6.結(jié)論
    第二節(jié) 自噬的改變對膿毒癥時中性粒細胞PD-L1 表達水平及凋亡的影響
        1.引言
        2.實驗材料
        3.實驗方法
        4.實驗結(jié)果
        5.討論
        6.結(jié)論
總結(jié)
參考文獻
綜述 中性粒細胞自噬的研究進展
    參考文獻
致謝
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本文編號:3184075

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