發(fā)布時(shí)間：2021-04-23 14:00

　　目的:探討叉頭框蛋白O1 （FOXO1）對(duì)脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的急性肺損傷小鼠肺泡上皮鈉通道（ENaC）的調(diào)控作用,并闡明其可能的作用機(jī)制。方法 :20只C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和LPS組,每組10只。經(jīng)相應(yīng)處理后分別留取標(biāo)本,HE染色觀察2組小鼠肺組織病理形態(tài)表現(xiàn),RT-PCR和Western blotting法檢測(cè)2組小鼠肺組織中α亞基ΕΝαC （αENaC） mRNA表達(dá)水平及磷酸化FOXO1 （pFOXO1）表達(dá)水平。培養(yǎng)肺泡上皮A549細(xì)胞,分別進(jìn)行基因干預(yù),使A549細(xì)胞過表達(dá)或沉默F(xiàn)OXO1基因,RT-PCR法檢測(cè)αENaC mRNA表達(dá)水平。A549細(xì)胞分為對(duì)照組、胰島素組、胰島素+PI3K抑制劑組和胰島素+AKT抑制劑組,分別干預(yù)后收集細(xì)胞,Western blotting法檢測(cè)各組A549細(xì)胞中pFOXO1 （Ser256）蛋白表達(dá)水平,RT-PCR法檢測(cè)各組A549細(xì)胞中αENaC mRNA表達(dá)水平,免疫熒光法檢測(cè)FOXO1在細(xì)胞中的定位情況。結(jié)果:與對(duì)照組比較,LPS組小鼠肺組織病理評(píng)分明顯升高（P<0.05）,肺組織中pFOXO1 （Ser25... 

【文章來源】：吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2020,46(06)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、細(xì)胞、主要試劑和儀器
    1.2 動(dòng)物分組和干預(yù)方式
    1.3 HE染色觀察對(duì)照組和LPS組小鼠肺損傷評(píng)分
    1.4 FOXO1過表達(dá)重組腺病毒載體系統(tǒng)的構(gòu)建
    1.5 細(xì)胞分組和干預(yù)
    1.6 RT-PCR法檢測(cè)2組小鼠肺組織和細(xì)胞中αENaC mRNA表達(dá)水平
    1.7 Western blotting法檢測(cè)各組小鼠肺組織和細(xì)
    1.8 免疫熒光法檢測(cè)各組A549細(xì)胞中FOXO1的胞內(nèi)定位情況
    1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 對(duì)照組和LPS組小鼠肺組織損傷程度和損傷評(píng)分
    2.2對(duì)照組和LPS組小鼠肺組織中αENaC、FOXO1和pFOXO1蛋白表達(dá)水平
    2.3 FOXO1基因過表達(dá)后各組A549細(xì)胞中FOXO1和
    2.4 FOXO1基因沉默后各組A549細(xì)胞中FOXO1蛋白和αENa C m RNA表達(dá)水平
    2.5 各組A549細(xì)胞中FOXO1和p FOXO1蛋白及αENa C m RNA表達(dá)水平
    2.6 各組A549細(xì)胞中FOXO1的胞內(nèi)定位情況
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