發(fā)布時間：2021-04-23 14:00

　　目的:探討叉頭框蛋白O1 （FOXO1）對脂多糖（LPS）誘導的急性肺損傷小鼠肺泡上皮鈉通道（ENaC）的調(diào)控作用,并闡明其可能的作用機制。方法 :20只C57BL/6J小鼠隨機分為對照組和LPS組,每組10只。經(jīng)相應處理后分別留取標本,HE染色觀察2組小鼠肺組織病理形態(tài)表現(xiàn),RT-PCR和Western blotting法檢測2組小鼠肺組織中α亞基ΕΝαC （αENaC） mRNA表達水平及磷酸化FOXO1 （pFOXO1）表達水平。培養(yǎng)肺泡上皮A549細胞,分別進行基因干預,使A549細胞過表達或沉默F(xiàn)OXO1基因,RT-PCR法檢測αENaC mRNA表達水平。A549細胞分為對照組、胰島素組、胰島素+PI3K抑制劑組和胰島素+AKT抑制劑組,分別干預后收集細胞,Western blotting法檢測各組A549細胞中pFOXO1 （Ser256）蛋白表達水平,RT-PCR法檢測各組A549細胞中αENaC mRNA表達水平,免疫熒光法檢測FOXO1在細胞中的定位情況。結果:與對照組比較,LPS組小鼠肺組織病理評分明顯升高（P<0.05）,肺組織中pFOXO1 （Ser25... 

【文章來源】：吉林大學學報(醫(yī)學版). 2020,46(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗動物、細胞、主要試劑和儀器
    1.2 動物分組和干預方式
    1.3 HE染色觀察對照組和LPS組小鼠肺損傷評分
    1.4 FOXO1過表達重組腺病毒載體系統(tǒng)的構建
    1.5 細胞分組和干預
    1.6 RT-PCR法檢測2組小鼠肺組織和細胞中αENaC mRNA表達水平
    1.7 Western blotting法檢測各組小鼠肺組織和細
    1.8 免疫熒光法檢測各組A549細胞中FOXO1的胞內(nèi)定位情況
    1.9 統(tǒng)計學分析
2 結果
    2.1 對照組和LPS組小鼠肺組織損傷程度和損傷評分
    2.2對照組和LPS組小鼠肺組織中αENaC、FOXO1和pFOXO1蛋白表達水平
    2.3 FOXO1基因過表達后各組A549細胞中FOXO1和
    2.4 FOXO1基因沉默后各組A549細胞中FOXO1蛋白和αENa C m RNA表達水平
    2.5 各組A549細胞中FOXO1和p FOXO1蛋白及αENa C m RNA表達水平
    2.6 各組A549細胞中FOXO1的胞內(nèi)定位情況
3 討論



本文編號：3155459