丙戊酸聯(lián)合NT-3基因修飾的嗅鞘細(xì)胞移植對腦損傷神經(jīng)細(xì)胞的修復(fù)作用
發(fā)布時間:2021-02-01 15:04
背景創(chuàng)傷性顱腦損傷(TBI)有著較高的致死率和致殘率,對人類的生命健康有著較大的威脅。中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后神經(jīng)元再生能力較差。嗅鞘細(xì)胞(OECs)是一種具備持久分裂能力的細(xì)胞,可分泌多種神經(jīng)營養(yǎng)因子,其中神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)具備促進(jìn)神經(jīng)元發(fā)育,維持神經(jīng)細(xì)胞存活以及促進(jìn)受損的神經(jīng)元再生的功能。丙戊酸(VPA)能減輕神經(jīng)細(xì)胞損傷,改善TBI大鼠神經(jīng)功能的恢復(fù)。目的本實驗運(yùn)用慢病毒載體將NT-3基因轉(zhuǎn)染入OECs內(nèi)進(jìn)行表達(dá),探討NT-3基因轉(zhuǎn)染OECs的可能性及OECs-NT-3分泌的NT-3的生物學(xué)活性;通過構(gòu)建的基因工程細(xì)胞OECs-NT-3聯(lián)合應(yīng)用VPA對TBI大鼠進(jìn)行干預(yù),探討其對顱腦損傷的神經(jīng)保護(hù)作用與機(jī)理,為TBI的臨床干預(yù)提供動物實驗研究資料。方法1.OECs的原代培養(yǎng)及鑒定:取妊娠約14 d的雌性SD大鼠,麻醉后,取出胎鼠,分離嗅球,進(jìn)行OECs原代培養(yǎng),應(yīng)用差速貼壁法純化OECs。運(yùn)用免疫熒光技術(shù)鑒定OECs。2.OECs-NT-3基因工程細(xì)胞的制備:用包裝有NT-3基因的病毒液感染OECs,同時建立對照(設(shè)未轉(zhuǎn)染組、空載體轉(zhuǎn)染組),應(yīng)用熒光顯微鏡分析轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)情況...
【文章來源】:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院河南省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
取嗅球
圖 2. SD 大鼠造模 SD 大鼠人字縫前 3 mm,矢狀縫右側(cè) 3 mm 處為中點,鉆一半徑約 自由落體打擊器的撞針對準(zhǔn)骨窗,設(shè)置高度 20 cm,重量 40 g,對大
注射細(xì)胞注:將大鼠腦部固定于腦立體定位儀,用微量注射器吸取10μl細(xì)胞懸液于損傷灶處深入3mm,
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]慢病毒介導(dǎo)NEP1-40及NT-3雙基因轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞的實驗研究[J]. 王林楠,汪雷,宋躍明,劉立岷,楊曦,豐干均,周春光. 中國修復(fù)重建外科雜志. 2018(04)
[2]微創(chuàng)穿刺引流術(shù)聯(lián)合干細(xì)胞移植治療對高血壓腦出血患者恢復(fù)情況、神經(jīng)功能的影響[J]. 譚支強(qiáng). 海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2016(21)
[3]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)系膜增生性腎炎:作用及機(jī)制[J]. 廖丹,張林,代小雨,汪嘉莉,杜曉炯. 中國組織工程研究. 2016(14)
[4]成人嗅黏膜嗅鞘細(xì)胞的體外培養(yǎng)及遷移特性[J]. 朱秋蓓,劉環(huán)海,郎軍添,彭滸,趙舒薇. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2015(05)
[5]丙戊酸對顱腦損傷大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)的影響[J]. 司昊天,李武雄,金保哲,張新中. 中華實驗外科雜志. 2014 (10)
[6]丙戊酸對大鼠顱腦損傷局部炎性反應(yīng)的抑制作用[J]. 金保哲,李武雄,司昊天,張新中. 中華實驗外科雜志. 2014 (09)
[7]中藥有效成分促神經(jīng)再生與修復(fù)的實驗研究進(jìn)展[J]. 任志麗,左萍萍. 中國康復(fù)理論與實踐. 2013(09)
[8]自體外周血干細(xì)胞移植治療周圍神經(jīng)損傷[J]. 金文虎,魏在榮,孫廣峰,唐修俊,王達(dá)利. 中國組織工程研究. 2013(01)
[9]神經(jīng)修復(fù)學(xué)——21世紀(jì)新學(xué)科、新理念、新領(lǐng)域[J]. 黃紅云,陳琳. 中國修復(fù)重建外科雜志. 2008(04)
[10]腦內(nèi)注射人胚鞘細(xì)胞對顱腦損傷大鼠神經(jīng)及運(yùn)動功能缺失的影響(英文)[J]. 韓玉河,呂然博,張萬宏,張建平. 中國臨床康復(fù). 2005(05)
本文編號:3012965
【文章來源】:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院河南省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
取嗅球
圖 2. SD 大鼠造模 SD 大鼠人字縫前 3 mm,矢狀縫右側(cè) 3 mm 處為中點,鉆一半徑約 自由落體打擊器的撞針對準(zhǔn)骨窗,設(shè)置高度 20 cm,重量 40 g,對大
注射細(xì)胞注:將大鼠腦部固定于腦立體定位儀,用微量注射器吸取10μl細(xì)胞懸液于損傷灶處深入3mm,
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]慢病毒介導(dǎo)NEP1-40及NT-3雙基因轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞的實驗研究[J]. 王林楠,汪雷,宋躍明,劉立岷,楊曦,豐干均,周春光. 中國修復(fù)重建外科雜志. 2018(04)
[2]微創(chuàng)穿刺引流術(shù)聯(lián)合干細(xì)胞移植治療對高血壓腦出血患者恢復(fù)情況、神經(jīng)功能的影響[J]. 譚支強(qiáng). 海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2016(21)
[3]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)系膜增生性腎炎:作用及機(jī)制[J]. 廖丹,張林,代小雨,汪嘉莉,杜曉炯. 中國組織工程研究. 2016(14)
[4]成人嗅黏膜嗅鞘細(xì)胞的體外培養(yǎng)及遷移特性[J]. 朱秋蓓,劉環(huán)海,郎軍添,彭滸,趙舒薇. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2015(05)
[5]丙戊酸對顱腦損傷大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)的影響[J]. 司昊天,李武雄,金保哲,張新中. 中華實驗外科雜志. 2014 (10)
[6]丙戊酸對大鼠顱腦損傷局部炎性反應(yīng)的抑制作用[J]. 金保哲,李武雄,司昊天,張新中. 中華實驗外科雜志. 2014 (09)
[7]中藥有效成分促神經(jīng)再生與修復(fù)的實驗研究進(jìn)展[J]. 任志麗,左萍萍. 中國康復(fù)理論與實踐. 2013(09)
[8]自體外周血干細(xì)胞移植治療周圍神經(jīng)損傷[J]. 金文虎,魏在榮,孫廣峰,唐修俊,王達(dá)利. 中國組織工程研究. 2013(01)
[9]神經(jīng)修復(fù)學(xué)——21世紀(jì)新學(xué)科、新理念、新領(lǐng)域[J]. 黃紅云,陳琳. 中國修復(fù)重建外科雜志. 2008(04)
[10]腦內(nèi)注射人胚鞘細(xì)胞對顱腦損傷大鼠神經(jīng)及運(yùn)動功能缺失的影響(英文)[J]. 韓玉河,呂然博,張萬宏,張建平. 中國臨床康復(fù). 2005(05)
本文編號:3012965
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