第一部分膿毒癥致急性腎損傷小鼠模型的構(gòu)建及胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7和金屬蛋白酶組織抑制蛋白-2的表達(dá)目的:構(gòu)建小鼠膿毒癥致急性腎損傷模型,并通過腎組織病理學(xué)評(píng)分、酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）、蛋白免疫印跡（Western blot）等分子生物學(xué)方法檢測(cè)血清中炎癥因子、腎組織中周期相關(guān)蛋白和凋亡相關(guān)蛋白、腎組織和尿液中IGFBP7和TIMP-2的差異性表達(dá)。方法:選取6-8周齡、體重20-25克的SPF級(jí)雄性C57BL/6小鼠36只,隨機(jī)分為假手術(shù)（sham）組和盲腸結(jié)扎穿孔組（CLP）組,各組又分為3個(gè)亞組（6h,12h,24h）。sham組只進(jìn)行開腹后關(guān)腹,CLP組50%盲腸結(jié)扎穿孔。各組于預(yù)設(shè)時(shí)間點(diǎn)收集尿液經(jīng)ELISA測(cè)定IGFBP7和TIMP-2水平。麻醉后左心穿刺采血,經(jīng)ELISA測(cè)定血漿中TNF-α和IL-6水平。取腎組織,行組織病理學(xué)評(píng)分并用Western blot檢測(cè)腎組織中周期相關(guān)蛋白cyclin D和cyclin E、凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和Bax表達(dá),用RT-PCR和Western blot檢測(cè)腎組織中IGFBP7和TIMP-2的表達(dá)。結(jié)果:1.血漿炎癥因子比較與假... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

小鼠血漿TNF-a和IL-6水平“*”表示同Sham組相比，p<0.05，“***”表示同Sham組相比，p<0.001

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文13與假手術(shù)組相比，CLP術(shù)后6小時(shí)TNF-a和IL-6水平開始升高，術(shù)后12小時(shí)TNF-a和IL-6水平最高(p<0.05)。(圖1.1)圖1.1:小鼠血漿TNF-a和IL-6水平“*”表示同Sham組相比，p<0.05，“***”表示同Sham組相比，p<0.001。3.3腎組織病理學(xué)變化及評(píng)分假手術(shù)組腎組織無明顯變化，CLP組小鼠有腎小管上皮腫脹、刷狀緣缺失、空泡變性、小管壞死、管型形成。與sham組相比，CLP組小鼠腎組織病理評(píng)分明顯增加(p<0.05)。小鼠腎組織病理學(xué)評(píng)分隨著CLP術(shù)后時(shí)間的增加而增加。(圖1.2)圖1.2:小鼠腎組織病理學(xué)評(píng)分及病理切片（400倍放大）“*”表示同Sham組相比，p<0.05,“**”表示同Sham組相比，p<0.01,“***”表示同Sham組相比，p<0.001。3.4腎組織周期相關(guān)蛋白cyclinD和cyclinE、凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和Bax表達(dá)

小鼠腎組織CyclinD和CyclinE水平以及Bcl-2/Bax值


本文編號(hào)：3000019