【摘要】：【研究目的】 研究膿毒癥小鼠肺臟、胸腺和脾臟組織CD54mRNA水平變化情況，以及抗CD54抗體治療后是否改善膿毒癥小鼠生存率，并探討其可能的機制。 【研究方法】 1、運用CLP膿毒癥小鼠模型，將12只C57BL/6小鼠隨機分組,分為假手術組(Sham，n=6)和膿毒癥模型組(CLP，n=6)。于手術后24h時，運用RT-PCR檢測各組小鼠肺臟、脾臟和胸腺組織CD54mRNA表達水平。 2、把40只C57BL/6小鼠隨機分組，分為假手術組(Sham，n=10)、CLP+尾靜脈注射生理鹽水組(CLP，n=10)、CLP+尾靜脈注射抗CD54抗體組(Anti-CD54，n=10)和CLP+尾靜脈注射同型對照抗體組(Isotype，n=10)，術后即刻給予抗CD54抗體或同型對照抗體(50μg/200μl/只)，觀察給予抗體干預后小鼠7d的生存率。 3、運用CLP膿毒癥小鼠模型，把24只C57BL/6小鼠隨機分組，分為假手術組(Sham，n=6)、CLP+尾靜脈注射生理鹽水(CLP，n=6)、CLP+尾靜脈注射抗CD54組(Anti-CD54，n=6)和CLP+尾靜脈注射同型對照抗體組(Isotype，n=6)。于術后馬上給予生理鹽水、抗CD54抗體或同型對照抗體(50μg/200μl/只)。于CLP術后24h時，取各組小鼠肺組織，其中左肺檢測肺組織濕重/干重比值(W/D)、右上肺葉組織勻漿檢測MPO活性、右肺中葉行組織病理學觀察、運用RT-PCR技術檢測右下肺葉TNF-α、IL-10和IL-6的mRNA表達水平；檢測小鼠外周血以及腹腔灌洗液細菌清除率，同時流式細胞儀檢測腹腔灌洗液內所含中性粒細胞數(shù)量；檢測小鼠胸腺和脾臟組織內共刺激分子CD28/CD80(CD86) mRNA表達水平以及細胞因子IL-10和IL-6mRNA表達水平；剩余胸腺和脾臟組織做MPO活性檢測和TUNEL染色。 【結果】 1、CLP術后24h時，CLP組小鼠胸腺、脾臟和肺組織CD54mRNA水平顯著高于Sham組（P值均小于0.01）。 2、CLP術后即刻給予抗CD54抗體，，Anti-CD54組小鼠生存率及生存時間顯著高于CLP組和Isotype組（P值小于0.01）。 3、CLP術后24h，Sham組和Anti-CD54組小鼠肺組織濕重/干重比值以及肺臟組織勻漿MPO活性、TNF-α mRNA和IL-10mRNA水平顯著低于CLP組及Isotype組（P值均小于0.05）；Anti-CD54小鼠組較CLP組及Isotype組肺組織病理損傷程度明顯減輕；Anti-CD54組小鼠胸腺和脾臟組織中TUNEL染色陽性的細胞比例以及胸腺和脾臟組織IL-10mRNA和IL-6mRNA顯著低于CLP組和Isotype組（P值均小于0.05），而共刺激分子CD28/CD80(CD86) mRNA水平顯著高于CLP組及Isotype組（P值小于0.01）；Anti-CD54組小鼠血液及腹腔灌洗液細菌清除率和腹腔灌洗液內中性粒細胞數(shù)量顯著高于CLP組及Isotype組（P值均小于0.001）。 【結論】 抗CD54抗體對膿毒癥小鼠具有一定的治療作用，可能與其改善小鼠肺功能狀態(tài)，提高血液和腹腔細菌清除率，抑制小鼠脾臟和胸腺凋亡有關。
【圖文】：

1 兩組小鼠胸腺、脾臟和肺組織 CD54 mRNA 表達水P 術后 24h，RT-PCR 檢測 CLP 組小鼠胸腺組織 CD54 mRNA 水01；CLP 組小鼠胸腺組織 CD54 mRNA 水平顯著高于 Sham 組，組織 CD54 mRNA 水平顯著高于 Sham 組，***P<0.001

第二軍醫(yī)大學碩士學位論文二、抗 CD54 抗體對 CLP 小鼠生存率及生存時間的影響實驗結果發(fā)現(xiàn)膿毒癥小鼠小鼠的生存率和生存時間給予抗 CD54 抗體后，顯高于 Isotype 組和 CLP 組，且均有非常顯著的統(tǒng)計學差異（P 均小于 0.01）；而 C組和 Isotype 組相比無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）（圖 2）。
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R459.7

【參考文獻】

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1 季憲飛,黃亮;粘附分子與急性肺損傷[J];江西醫(yī)藥;2003年05期

本文編號：2560604