【摘要】：目的：探討抗Nogo-A抗體對大鼠實驗性大腦中動脈阻塞(MCAO)后腦梗死的治療效果,動態(tài)觀察腦梗死后Nogo-A蛋白表達的變化。 方法：180只SD大鼠隨機分為假手術組、IgG組、mNGF組、Nogo-A抗體組,每組45只。線栓法建立大鼠MCAO模型,側(cè)腦室置管給藥(8ul/次,1次/同)治療,其中前兩組均給予正常大鼠IgG治療,mNGF組給予鼠神經(jīng)生長因子(mNGF)治療,Nogo-A抗體組予抗Nogo-A抗體治療。各組分三個亞組(每亞組15只),分別存活1d、3d、7d,并于各時間點進行神經(jīng)功能評分,隨后斷頭取腦。腦標本分別行腦梗死相對體積測定,Nogo-A、GAP-43、NF200蛋白免疫熒光檢測,Nogo-A、GAP-43、NF200蛋白免疫印跡檢測與Nogo-A mRNA、GAP-43mRNA、NF200mRNA實時熒光定量PCR檢測。 結(jié)果：假手術組各時間點神經(jīng)功能評分正常,其余三組在治療后1d、3d兩個時間點神經(jīng)功能評分組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),但mNGF組、Nogo-A抗體組治療7d后神經(jīng)功能評分均較IgG組明顯降低(p0.05),其中Nogo-A抗體組最明顯。假手術組沒有腦梗死,其余三組治療后各個時間點腦梗死相對體積組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。1d、3d和7d時間點,假手術組Nogo-A、NF-200、GAP-43蛋白表達差異無統(tǒng)計學意義(p0.05);1d和3d時間點,IgG組、mNGF組和Nogo-A抗體組Nogo-A、NF-200、GAP-43蛋白表達組間比較差異無統(tǒng)計學意義(p0.05);7d時間點,Nogo-A抗體組分別與IgG、mNGF組比較Nogo-A蛋白表達明顯減低(p0.05),Nogo-A抗體組、mNGF組分別與IgG組比較NF-200、GAP-43蛋白表達明顯升高(p0.05),但Nogo-A抗體組與mNGF組比較NF-200、GAP-43蛋白表達差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。1d、3d和7d時間點,假手術組Nogo-A、NF-200、GAP-43mRNA表達差異無統(tǒng)計學意義(p0.05);1d時間點,IgG組、mNGF組和Nogo-A抗體組組間比較Nogo-A mRNA表達差異無統(tǒng)計學意義(p0.05);3d和7d時間點,Nogo-A抗體組分別與IgG、 mNGF組比較Nogo-A蛋白表達明顯減低(p0.05),Nogo-A抗體組、mNGF組分別與IgG組比較NF-200、GAP-43mRNA表達明顯升高(p0.05),但Nogo-A抗體組與mNGF組比較NF-200、GAP-43蛋白表達差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。 結(jié)論：應用抗Nogo-A抗體治療,通過促進軸突再生改善神經(jīng)缺損功能的同時并不相應減少腦梗死的體積。由于腦梗死后7d Nogo-A蛋白仍然高表達,所以抗Nogo-A蛋白抗體治療至少要持續(xù)7天以上。
[Abstract]:Aim: to investigate the therapeutic effect of anti-Nogo-A antibody on cerebral infarction after experimental middle cerebral artery occlusion (MCAO) in rats, and to observe the changes of Nogo-A protein expression after cerebral infarction. Methods: 180 SD rats were randomly divided into sham operation group, IgG group, mNGF group and Nogo-A antibody group with 45 rats in each group. The rat model of MCAO was established by thread thrombus method, and the lateral ventricle catheterization (8ul/ times, once / the same) was used to treat the rats. The first two groups were treated with IgG, and the mNGF group was treated with nerve growth factor (mNGF). Nogo-A antibody group was treated with anti-Nogo-A antibody. Each group was divided into three subgroups (15 rats in each subgroup), survived for 1 day, 3 days and 7 days respectively, and scored the neurological function at each time point, and then decapitated the brain. The relative volume of cerebral infarction, Nogo-A,GAP-43,NF200 protein immunofluorescence, Nogo-A,GAP-43,NF200 protein immunoblotting and Nogo-A mRNA,GAP-43mRNA,NF200mRNA real-time fluorescence quantitative PCR were measured respectively. Results: the neurological function scores of the false operation group were normal at each time point, and there was no significant difference in the neurological function scores of the other three groups at 3 days after treatment (P 0.05), but there was no significant difference in the neurological function scores of the other three groups at 3 days after treatment (P 0.05), but in the mNGF group, After 7 days of treatment, the neurological function scores of Nogo-A antibody group were significantly lower than those of IgG group (p0.05), especially in Nogo-A antibody group. There was no cerebral infarction in the pseudo-operation group, but there was no significant difference in the relative volume of cerebral infarction in the other three groups at each time point after treatment (P 0.05). At 1 d, 3 d and 7 d, Nogo-A,NF-200, in the pseudo-operation group was not significantly different from that in the other three groups at each time point after treatment. There was no significant difference in the expression of GAP-43 protein (p0.05). There was no significant difference in the expression of Nogo-A,NF-200,GAP-43 protein between IgG group, mNGF group and Nogo-A antibody group at 1 d and 3 d (p0.05). At 7 d, the expression of Nogo-A protein in Nogo-A antibody group was significantly lower than that in IgG,mNGF group (p0.05), while the expression of NF-200,GAP-43 protein in Nogo-A antibody group and mNGF group was significantly higher than that in IgG group (p0.05). However, there was no significant difference in the expression of NF-200,GAP-43 protein between Nogo-A antibody group and mNGF group (p0.05). There was no significant difference in Nogo-A,NF-200,GAP-43mRNA expression in sham operation group at 1 d, 3 d and 7 d (p0.05). At 1 d, there was no significant difference in the expression of Nogo-A mRNA between IgG group, mNGF group and Nogo-A antibody group (p0.05). At 3 d and 7 d, the expression of Nogo-A protein in Nogo-A antibody group was significantly lower than that in IgG, mNGF group (p0.05), while the expression of NF-200,GAP-43mRNA in Nogo-A antibody group and mNGF group was significantly higher than that in IgG group (p0.05). However, there was no significant difference in the expression of NF-200,GAP-43 protein between Nogo-A antibody group and mNGF group (p0.05). Conclusion: anti-Nogo-A antibody can improve the function of nerve defect by promoting axonal regeneration and does not reduce the volume of cerebral infarction at the same time. Because the expression of Nogo-A protein is still high on the 7th day after cerebral infarction, anti-Nogo-A protein antibody therapy should last for at least 7 days.
【學位授予單位】：貴陽中醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R743.33

【共引文獻】

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本文編號：2492928