本文選題：依達(dá)拉奉 + 多發(fā)性硬化　； 參考：《南華大學(xué)》2013年碩士論文

【摘要】：目的 觀察依達(dá)拉奉干預(yù)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（experomental autoimmuneencephalomyelitis，EAE）大鼠模型后，對腦紅蛋白(neuroglobin，Ngb)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducible oxide synthase，iNOS）表達(dá)的影響，并探討其作用機(jī)制，從而為多發(fā)性硬化（mutiple sclerosis，MS）的臨床干預(yù)提供新的發(fā)展方向。 方法 選用清潔級(jí)健康雌性Wistar大鼠75只，完全隨機(jī)分組分為正常對照組15只，EAE組15只，生理鹽水（NS）+EAE組15只，依達(dá)拉奉干預(yù)組30只。其中將依達(dá)拉奉干預(yù)組分為小劑量組15只和大劑量組15只，根據(jù)動(dòng)物與人的用藥量換算方法，�。↙DE組）、大劑量組（HDE組）分別按4mg/kg·d、10mg/kg·d劑量。隨機(jī)將每組又分成第7天（5只）、第14天（5只）、第21天（5只）處死的亞組。EAE模型是通過給每只大鼠注射由完全弗氏佐劑和豚鼠脊髓生理鹽水勻漿（guinea pig spinal cord homogenate，GPSCH）制備的抗原（0.5ml/只）誘導(dǎo)而成。免疫后當(dāng)天給予干預(yù)組相應(yīng)劑量的依達(dá)拉奉腹腔注射液，EAE組及生理鹽水+EAE組不予以處理。比較各組大鼠發(fā)病情況和神經(jīng)功能評(píng)分，在相應(yīng)天數(shù)處死大鼠，，并對腦脊髓進(jìn)行HE、尼氏染色及免疫組化染色，觀察炎性細(xì)胞、尼氏小體、及Ngb，iNOS的表達(dá)變化情況。 結(jié)果 1.正常組中未見發(fā)病大鼠，EAE組發(fā)病率為86.67%，生理鹽水+EAE組發(fā)病率為86.67%。HDE組和LDE組中的實(shí)驗(yàn)大鼠發(fā)病率均比EAE組明顯降低（P0.05）。EAE組和生理鹽水+EAE組發(fā)病率比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 2.HE染色觀察顯示：僅正常組未見炎性細(xì)胞浸潤，其余四組均見大鼠腦組織中炎性細(xì)胞浸潤，并在血管周圍形成“袖套樣”改變。 3尼氏染色結(jié)果顯示：正常組含尼氏小體陽性細(xì)胞數(shù)目最多，其余各組神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)都有不同程度的尼氏小體顆粒的減少或消失。 4免疫組化觀察：除正常組外，其他組均可見Ngb，iNOS的陽性表達(dá)。通過觀察發(fā)現(xiàn)：炎性細(xì)胞浸潤數(shù)、各陽性細(xì)胞表達(dá)情況與大鼠發(fā)病嚴(yán)重程度相一致。 5.在第14天時(shí)，HDE組和LDE組的炎性細(xì)胞浸潤數(shù)、Ngb、iNOS的陽性細(xì)胞表達(dá)數(shù)均明顯小于同期EAE組（P0.05），且HDE組的炎性程度均低于LDE組（P0.05）；而這兩組的尼氏陽性數(shù)細(xì)胞明顯多于同期EAE組（P0.05）。第7天和21天中EAE組及生理鹽水+EAE組炎性程度比14天明顯減輕（P0.05），而7天組和21天組之間相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論 1. EAE實(shí)驗(yàn)大鼠模型的發(fā)病可能與Ngb和iNOS有關(guān)。 2.依達(dá)拉奉對EAE大鼠模型可能具有神經(jīng)保護(hù)作用。
[Abstract]:Objective to observe the effect of Edaravone on the expression of inducible oxide synthase (iNOS) and its mechanism in experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) rat model. Therefore, it provides a new direction for the clinical intervention of multiple sclerosis (MS). Methods Seventy-five healthy female Wistar rats of clean grade were randomly divided into control group (n = 15), normal saline group (n = 15), EAE group (n = 15) and Edaravone intervention group (n = 30). Edaravone intervention group was divided into small dose group (n = 15) and large dose group (n = 15). According to the method of animal and human dosage conversion, the dose of 4mg/kg was 10 mg / kg / d in small dose group and high dose group respectively. Each group was randomly divided into 5 rats on day 7, 5 on day 14 and 5 on day 21). The EAE model was prepared by injecting each rat with complete Freund's adjuvant and Guinea pig spinal cord homogenate, guinea pig spinal cord homogenate. The antigen was induced by 0.5 ml / L). Edaravone intraperitoneal injection and normal saline EAE group were not treated on the same day after immunization. The incidence and neurological function of the rats in each group were compared and the rats were killed on the corresponding days. The changes of the expression of inflammatory cells, Nissl corpuscles, and Ngbbisis-iNOS in the brain and spinal cord were observed by HE, Nieldahl staining and immunohistochemical staining. Result 1. The incidence of EAE in normal group was 86.67, and that in EAE group was 86.67. HDE group and LDE group were significantly lower than those in EAE group. There was no significant difference between EAE group and EAE group. The observation of HE staining showed that there was no inflammatory cell infiltration in normal group. In the other four groups, inflammatory cells were infiltrated in the brain tissue of the rats, and "cuff like" changes were formed around the blood vessels. 3 the results of Nissl staining showed that the number of positive cells of Nissl corpuscles was the highest in the normal group. The decrease or disappearance of Nissl corpuscles was observed in the other groups. 4 Immunohistochemical observation showed that the positive expression of Ngbbuta-iNOS was found in all the other groups except the normal group. It was found that the number of inflammatory cells and the expression of positive cells were consistent with the severity of the disease in rats. On the 14th day, the number of inflammatory cells infiltrating in HDE group and LDE group was significantly lower than that in EAE group (P 0.05), and the inflammatory degree in HDE group was lower than that in LDE group (P 0.05), and the number of Nielsen positive cells in both groups was significantly higher than that in EAE group (P 0.05). On the 7th and 21st day, the inflammatory degree of EAE group and normal saline EAE group was significantly lower than that of 14 days, but there was no significant difference between 7 day group and 21 day group. Conclusion 1. The pathogenesis of EAE rat model may be related to NGB and iNOS. Edaravone may have neuroprotective effect on EAE rat model.
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R743.34

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本文編號(hào)：2033033