發(fā)布時(shí)間：2018-06-15 06:04

  本文選題：彌漫性腦損傷 + 大鼠��； 參考：《山東大學(xué)》2014年博士論文

【摘要】：顱腦損傷在所有創(chuàng)傷中已躍居首位,其死亡率和致殘率明顯高于其他部位。彌漫性腦損傷是顱腦損傷的常見類型,具有治療難度大,死亡率高等特點(diǎn),死亡率高達(dá)60%以上,預(yù)后較其他類型腦損傷差。彌漫性腦損傷可造成原發(fā)性腦損傷(機(jī)械性致傷因素造成腦的神經(jīng)組織和腦血管的損傷)和繼發(fā)性腦損傷(在原發(fā)性腦損傷基礎(chǔ)上隨著傷后的組織反應(yīng)、病理生理變化和出血等因素導(dǎo)致的腦缺血、顱內(nèi)血腫、腦腫脹、腦水腫、顱內(nèi)壓升高等)。因此,若不能對(duì)彌漫性腦損傷及時(shí)明確診斷并有效處理,必將發(fā)展為進(jìn)行性顱內(nèi)高壓,加重原發(fā)性腦損傷的病理改變,最終導(dǎo)致腦疝,甚至中樞性衰竭、死亡。多年來(lái)人們根據(jù)這些病理和生理變化過(guò)程,采取了各種治療方法,包括手術(shù)和非手術(shù)的治療,尤其神經(jīng)影像學(xué)的發(fā)展解決了顱內(nèi)血腫的早期診斷難題,使顱腦損傷的死亡率明顯下降。但對(duì)于彌散性腦損傷的治療方法仍未取得突破性進(jìn)展,致殘率及致死率仍居高不下。 目前仍無(wú)有效措施治療彌漫性腦損傷,以治療腦水腫,降低顱內(nèi)壓,防止繼發(fā)性損害等綜合治療為主。對(duì)彌漫性腦損傷病理機(jī)制的認(rèn)識(shí)僅能通過(guò)臨床癥狀、影像檢查及尸檢等手段,因此建立類似人的彌漫性腦損傷的動(dòng)物模型,研究彌漫性腦損傷的發(fā)病機(jī)制倍受重視。本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)揭示彌散性腦損傷后的病理變化,從而應(yīng)用綜合治療方法,如亞低溫及高壓氧等措施來(lái)提高彌散性腦損傷后的治療效果,為臨床提供理論依據(jù)。 第一部分大鼠彌漫性腦損傷模型的建立及c-fos、c-jun的表達(dá) 目的研究彌漫性腦損傷后不同時(shí)間內(nèi)腦水腫和c-jun蛋白的變化,探討腦損傷后的生理變化,為臨床治療奠定基礎(chǔ)。 方法應(yīng)用改良的Marmarou法建立彌漫性腦損傷模型(大鼠),于損傷后時(shí)間點(diǎn)(1h,3h,6h,12h,1d,3d,7d),檢測(cè)腦組織含水量的變化,采用HE染色,超薄電鏡切片檢測(cè)腦損傷后的病理改變,及用RT-PCR、免疫組織化學(xué)技術(shù)和圖像分析方法來(lái)觀察c-fos及c-jun的表達(dá)規(guī)律。 結(jié)果傷后腦組織含水量,在1h即有所提高,1天時(shí)含量最高,至7天時(shí)仍高于對(duì)照組水平。外傷1d后大鼠腦組織可出現(xiàn)彌漫性蛛網(wǎng)膜下腔出血。HE染色發(fā)現(xiàn),傷后1d可見血管腫脹,皮質(zhì)層和胼胝體可見大量出血,血管腫脹。腦損傷后,腦干、海馬、丘腦、胼胝體和腦室旁區(qū)域均可檢測(cè)到β-APP的陽(yáng)性表達(dá)。超薄切片發(fā)現(xiàn),腦損傷3d后出現(xiàn)很明顯的水腫,軸突斷裂明顯。彌漫性腦損傷可造成嚴(yán)重的腦缺血。在傷后1h即可見到c-fos和c-jun的大量表達(dá)：在傷后3h c-fos達(dá)到高峰(p0.05),隨后有所降低,至3d時(shí)再次檢測(cè)高峰值(p0.05),在7d明顯降低但仍較對(duì)照組高(p0.05).C-jun陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在傷后6h可檢測(cè)到其高峰值(p0.05),隨后有所降低,至3d又達(dá)高峰(p0.05),7d明顯降低但仍較對(duì)照組高(p0.05)。 結(jié)論1彌漫性腦損傷后,大鼠腦組織含水量增高,神經(jīng)細(xì)胞中c-fos、c-jun呈現(xiàn)高表達(dá)。 2彌漫性腦損傷后,腦組織水腫及腦組織中c-fos、c-jun的表達(dá)有一定的相關(guān)性,隨時(shí)間而呈現(xiàn)不同的變化。 第二部分亞低溫對(duì)大鼠彌漫性腦損傷的保護(hù)及相關(guān)機(jī)制 目的探討亞低溫治療彌漫性腦損傷動(dòng)物模型的可能機(jī)制。 方法將60只SD大鼠隨機(jī)分為假傷組(Sham),DBI組,DBI+HT30℃組,每組20只。采用自由落體致傷模型,450g×150cm的致傷沖量下致大鼠彌漫性腦損傷。全身體溫降至30°,保持6h建立亞低溫治療彌漫性腦損傷動(dòng)物模型。檢查亞低溫治療后腦損傷大鼠生存率,記憶提取能力,腦組織含水量,腦組織梗塞面積,HE染色檢測(cè)腦組織病理狀態(tài)改變,RT-PCR和免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腦組織c-fos和c-jun的表達(dá)模式,以及腦細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果在較低溫度30℃下,彌漫性腦損傷大鼠生存率有所提高p0.05)；記憶提取能力較DBI組有顯著提高p0.05)；腦組織含水量明顯降低p0.05)；腦部梗塞面積明顯縮小(p0.05)；c-fos和c-jun的表達(dá)在經(jīng)過(guò)亞低溫治療后明顯被抑制；TUNEL結(jié)果顯示神經(jīng)元細(xì)胞凋亡被顯著抑制p0.05)。提示30℃亞低溫治療6h有較好的保護(hù)彌漫性腦損傷的功效(通過(guò)下調(diào)c-fos和c-jun的表達(dá)),具有臨床參考價(jià)值。 結(jié)論1亞低溫治療對(duì)彌漫性腦損傷可起到保護(hù)作用。 2本實(shí)驗(yàn)認(rèn)為,亞低溫治療改善大鼠彌漫性腦損傷,可能主要通過(guò)下調(diào)c-fos和c-jun含量實(shí)現(xiàn)。 第三部分高壓氧治療對(duì)大鼠彌漫性損傷的保護(hù)作用及機(jī)理 目的探討高壓氧對(duì)彌漫性腦損傷動(dòng)物模型保護(hù)的可能機(jī)制。 方法將60只SD大鼠隨機(jī)分為假傷組(Sham),DBI3d組,DBI3d+HBO組,每組20只。在450g×1.5m致傷沖量下致大鼠彌漫性腦損傷,在腦損傷后立即進(jìn)行高壓氧治療,每天2次,連續(xù)3天,研究高壓氧對(duì)大鼠彌漫性腦損傷的保護(hù)作用。檢查高壓氧治療3d后腦損傷大鼠生存率,記憶提取能力,腦組織含水量,腦組織梗塞面積,腦組織病理狀態(tài)改變(HE染色檢測(cè)),RT-PCR和免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腦組織c-fos和c-jun的表達(dá)模式,以及腦細(xì)胞凋亡基因表達(dá)情況。 結(jié)果經(jīng)高壓氧治療3d后,彌漫性腦損傷大鼠生存率有所提高p0.05)；記憶提取能力較DBI3d組有顯著提高00.05)；腦組織含水量顯著降低p0.05)；腦部梗塞面積明顯縮小(p0.05)；c-fos和c-jun的表達(dá)在經(jīng)高壓氧治療后明顯下降(p0.05)；Western blotting顯示,Bax表達(dá)在高壓氧治療3d后較DBI3d顯著降低,而抑制凋亡基因Bcl-2的表達(dá)在高壓氧治療后較DBI3d顯著上升。提示高壓氧治療可能通過(guò)下調(diào)c-fos、c-jun,進(jìn)而抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡起到對(duì)彌漫性腦損傷的保護(hù)效果。 結(jié)論1高壓氧能夠改善大鼠彌漫性腦損傷的預(yù)后。 2本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,高壓氧治療能改善大鼠彌漫性腦損傷,可能通過(guò)下調(diào)c-fos和c-jun的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)。
[Abstract]:Diffuse brain injury is a common type of craniocerebral injury , and has the characteristics of high treatment difficulty , high mortality rate and so on . The mortality rate is higher than 60 % , and the prognosis is worse than other types of brain injury . Diffuse brain injury can cause primary brain injury ( mechanical injury factors cause brain damage to nerve tissue and cerebrovascular disease ) and secondary brain injury ( cerebral ischemia , intracranial hematoma , brain swelling , brain edema , intracranial pressure rise and so on ) . Therefore , if the diffuse brain injury cannot be diagnosed and effectively treated in time , it will develop into progressive intracranial hypertension , aggravate the pathological changes of the primary brain injury , eventually lead to brain hernia , even central failure and death .

Objective : To study the pathological mechanism of diffuse brain injury , and to establish an animal model of diffuse brain injury , and to study the mechanism of diffuse brain injury .

The establishment of diffuse brain injury model and the expression of c - fos and c - jun in the first part of rats

Objective To study the changes of brain edema and c - jun protein in different time after diffuse brain injury , and to study the physiological changes after brain injury and lay the foundation for clinical treatment .

Methods The model of diffuse brain injury ( rats ) was established by modified Marmarou method . The changes of water content in brain tissue were measured at the time after injury ( 1h , 3h , 6h , 12h , 1d , 3d , 7d ) . The pathological changes of brain tissue were detected by HE staining and ultra - thin electron microscope . The expression of c - fos and c - jun was observed by RT - PCR , immunohistochemistry and image analysis .

The expression of 尾 - APP was observed in brain stem , hippocampus , thalamus , corpus callosal and periventricular region after injury . The peak value of c - fos and c - jun could be detected at 6 h after injury .

Conclusion After diffuse brain injury , the water content of rat brain increased , c - fos and c - jun in nerve cells showed high expression .

After diffuse brain injury , the expression of c - fos and c - jun in brain tissue was correlated with time .

Protection of second partial subhypothermia on diffuse brain injury in rats and its related mechanism

Objective To investigate the possible mechanism of mild hypothermia in the treatment of diffuse brain injury animal models .

Methods Sixty SD rats were randomly divided into sham injury group ( Sham ) group ( Sham ) group ( n = 20 ) .

Results The survival rate of diffuse brain injury was increased at 30 鈩，

本文編號(hào)：2020972