本文選題：鼠 + 嚴重膿毒癥　； 參考：《石河子大學》2013年碩士論文

【摘要】：目的: 本課題通過建立大鼠膿毒癥及嚴重膿毒癥模型，研究銅綠假單胞菌甘露糖敏感血凝素（PA-MSHA）預處理對膿毒癥及嚴重膿毒癥大鼠模型中性粒細胞體外移行能力及生存時間的影響；對細胞因子（TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、iNOS）的影響；對各臟器組織形態(tài)學及血清生化指標（ALT、AST、Creat、BUN、CK、CK-MB、LAC）的影響，探討嚴重膿毒癥中中性粒細胞移行障礙的機制及PA-MSHA預防感染的可能機制。 方法： 1. SPF級健康雄性SD大鼠72只，隨機分為假手術組（C組）、膿毒癥組（S組）、嚴重膿毒癥組（SS組），S組取1.6ml/kg糞便懸液，SS組取4ml/kg糞便懸液，生理鹽水稀釋至3毫升，采用改良人糞便懸液腹腔注射法建立膿毒癥及嚴重膿毒癥模型。C組動物注射相同劑量的生理鹽水。比較大鼠一般情況、臨床嚴重程度、48小時生存情況、平均動脈壓（MAP）、動脈血氣指標、動脈乳酸值（LAC）；生化指標、細胞因子；心臟取血行血培養(yǎng)；光鏡下觀察心、肝、肺、腎、腸組織形態(tài)學改變。 2. SPF級健康雄性SD大鼠216只，隨機分為假手術組（C組）、膿毒癥7小時組（S7組）、膿毒癥15小時組（S15組）、嚴重膿毒癥7小時組（SS7組）、PA-MSHA預處理組（PA組）、PA-MSHA預處理膿毒癥7小時組（PA-S7組）、PA-MSHA預處理膿毒癥15小時組（PA-S15組）、PA-MSHA預處理嚴重膿毒癥7小時組（PA-SS7組）。PA組、PA-S7組、PA-S15組和PA-SS7組造模前連續(xù)7天，每天經腹部皮下注射0.3ml PA-MSHA。觀察大鼠一般情況、72小時生存率；Percoll非連續(xù)密度離心法分離外周血中性粒細胞，比較各組體外中性粒細胞趨化細胞數；ELISA法測定并比較各組血清TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、iNOS濃度，檢測生化指標（ALT、AST、Creat、BUN、 CK、CK-MB）。動物處死后取取心、肝、肺、腎組織HE染色，光鏡下比較各組器官病理組織學變化。 結果： 1.（1）一般情況：主要從進食、呼吸、自發(fā)性活動及對外源性刺激的警覺性評價，SS組大鼠較S組大鼠差；（2）臨床嚴重程度：C組、S組、SS組大鼠臨床嚴重程度評分分別集中于1分、2-3分、3-4分，分別處于正常、輕中度、中重度；(3)48小時生存情況：C組生存率100%；S組和SS組生存率比較：6h（88%vs75%），12h （57%vs5%），18h（25%vs0%）；與S組比較，，SS組生存時間明顯下降；（4）平均動脈壓：S組和SS組較C組明顯降低；（5）動脈血氣和乳酸：與C組比較，S組和SS組動脈血PCO2、HCO3-、BE降低，SS組PH、PO2、SaO2%降低，SS組LAC升高；與S組比較，SS組動脈血PO2、SaO2%降低；（6）生化指標：與C組比較，S組和SS組BUN升高，SS組ALT、AST、Creat、CK升高；與S組比較，SS組ALT、BUN升高；（7）細胞因子：與C組比較，S組IL-6及IL-10濃度升高，SS組IL-6和IL-10濃度顯著升高；且SS組IL-6和IL-10濃度高于S組（P＜0.05）；（8）血培養(yǎng)：C組血培養(yǎng)無細菌生長；S組和SS組血培養(yǎng)結果均為（8/8）陽性：大腸埃希菌；（9）各組病理學改變如下：S組及SS組大鼠心、肺、肝、腎、腸均見病理改變，SS組較S組病變嚴重。 2.（1）一般情況：主要從進食、呼吸、自發(fā)性活動及對外源性刺激的警覺性評價，S7組及S15組大鼠一般情況較PA-S7組及PA-S15組對應時間差；SS7組大鼠一般情況較S7組差，PA-SS7組大鼠一般情況較SS7組對應時間輕微；（2）72小時生存情況：①生存時間（中位數）： PA-S組明顯長于S組（28.65h vs17.75h）；SS7組生存時間短于S組（9.15h vs17.75h）；PA-SS7組生存時間較SS7組延長（14.1h vs9.15h）；②生存率：C組和PA組在處理后72小時生存率100%；生存曲線比較（log-rank檢驗）：C組＞S組：x2=16.94，P＜0.01；C組＞SS組： x2=16.94，P＜0.01；S組＞SS組： x2=6.12，P＜0.05；（3）中性粒細胞體外趨化數：與C組相比，S7組、S15組、SS7組、PA-S7組、PA-S15組、PA-SS7組趨化中性粒細胞數顯著下降（P＜0.01）；S15組、PA-S15組、SS7組、PA-SS7組中性粒細胞數低于S7組（P＜0.01）； SS7組中性粒細胞數多于S15組（P＜0.05）；與PA組相比，PA-S7組、PA-S15、PA-SS7組中性粒細胞數顯著下降（P＜0.01），PA-S15組、PA-SS7組中性粒細胞數低于PA-S7組（P＜0.01）；PA-SS7組中性粒細胞趨化數多于PA-S15組（P＜0.05）；PA-S7組中性粒細胞數較S7組明顯增加（P＜0.01）。 3．（1）血清細胞因子濃度①TNF-α濃度：與C組比較，除PA組無差異外，其余各組TNF-α濃度均明顯升高（P0.01）；與PA組比較，S7組、PA-S7組TNF-α濃度均升高（P0.05），SS7組、PA-SS7組TNF-α濃度均明顯升高（P0.01）；SS7組TNF-α濃度高于S7組（P0.05）；②IL-6濃度：與C組比較，除PA組無差異外，S7組、PA-S7組IL-6濃度均升高（P0.05），SS7組、PA-SS7組IL-6濃度均明顯升高（P0.01）；與PA組比較，S7組、PA-S7組IL-6濃度均升高（P0.05），SS7組、PA-SS7組IL-6濃度均明顯升高（P0.01）；SS7組IL-6濃度高于PA-S7組、PA-SS7組（P0.05），明顯高于S7組（P0.01）；③IL-8濃度：與C組比較，除PA組無差異外，S7組IL-8濃度升高（P0.05），PA-S7組、SS7組、PA-SS7組IL-8濃度明顯升高（P0.01）；SS7組IL-8濃度高于S7組（P0.05）；④IL-10濃度：與C組比較，PA組、S7組、PA-S7組IL-10濃度均升高（P0.05），SS7組、PA-SS7組IL-10濃度均明顯升高（P0.01）；與PA組比較， PA-SS7組IL-10濃度升高（P0.05），SS7組IL-10濃度明顯升高（P0.01）；與S7組比較，PA-SS7組IL-10濃度升高（P0.05），SS7組IL-10濃度明顯升高（P0.01）。PA-SS7組IL-10濃度明顯低于SS7組（P0.01）；⑤iNOS濃度：S7組和SS7組iNOS濃度高于C組、PA組、PA-S7組（P0.05）；PA-SS7組iNOS濃度低于SS7組（P0.05）；（2）生化指標①ALT：與C組比較，S7組和PA-SS7組ALT濃度升高（P0.05），SS7組ALT濃度明顯升高（P0.01）；與PA組相比，S7組、PA-SS7組ALT升高（P0.05），SS7組ALT濃度明顯升高（P0.01）；SS7組ALT濃度高于S7組、PA-SS7組（P0.05），明顯高于PA-S7組（P0.01）；②AST： SS7組AST濃度高于C組、PA組、S7組、PA-S7組及PA-SS7組（P0.05）； PA-SS7組AST濃度高于C組（P0.05）；③Creat和UBN：SS7組Creat和UBN濃度均高于其余各組（P0.05）；④CK：SS7組高于S7組和PA-SS7組（P0.05），顯著高于C組、PA-S7組（P0.01）；⑤CK-MB：SS7組明顯高于C組和PA組（P0.01），高于S7組、PA-S7組及PA-SS7組（P0.05）；（3）各組臟器病理改變：各組臟器病理改變由輕到重順序依次為：PA-S7組、S7組、PA-SS7組、SS7組。 結論： 1.膿毒癥早期可出現中性粒細胞體外移行能力抑制，嚴重膿毒癥時則發(fā)生中性粒細胞體外移行障礙。 2.PA-MSHA預處理可通過下調iNOS水平改善膿毒癥中性粒細胞體外移行能力，從而減輕膿毒癥損傷，減緩膿毒癥病情進展，延長生存時間。 3.連續(xù)7天0.3mlPA-MSHA預處理無法改善嚴重膿毒癥中性粒細胞體外移行能力，但可通過下調炎癥因子水平，一定程度上減輕損害，延長生存時間。
[Abstract]:Objective:
The effect of mannose sensitive hemagglutinin (PA-MSHA) pretreatment with Pseudomonas aeruginosa on neutrophils in vitro migration ability and survival time in rats with sepsis and severe sepsis was studied by establishing rat sepsis and severe sepsis model, and the effects on cytokines (TNF- alpha, IL-6, IL-8, IL-10, iNOS) and the organs of Pseudomonas aeruginosa were studied. The effect of Histomorphology and serum biochemical indexes (ALT, AST, Creat, BUN, CK, CK-MB, LAC), and to explore the mechanism of neutrophil migration disorder in severe sepsis and the possible mechanism of PA-MSHA to prevent infection.
Method錛

本文編號：1972119