本文選題：柯里拉京 + RAW264.7細(xì)胞��； 參考：《華中科技大學(xué)》2014年博士論文

【摘要】：目的細(xì)胞模型上研究柯里拉京對(duì)TLR4信號(hào)通路的作用及其機(jī)制。方法：脂多糖(LPS)刺激RAW264.7細(xì)胞造成炎癥模型。予以柯里拉京進(jìn)行干預(yù)。CCK8法檢測(cè)細(xì)胞存活率；實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)各組TLR4, MyD88, TRIF, TRAF6的mRNA的表達(dá)水平；Western blot測(cè)定各組TLR4信號(hào)通路中各信號(hào)分子蛋白的表達(dá)；ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清中的IL-10, IL-6;結(jié)果：1.CCK8法檢測(cè)的柯里拉京IC50值是0.25mg/ml;2.柯里拉京干預(yù)后,TLR4信號(hào)通路中TLR4, MyD88, TRIF, TRAF6的mRNA和蛋白水平,模型組顯著高于正常組(p＜0.01),而柯里拉京處理組顯著低于模型組(p＜0.01)；3.柯里拉京干預(yù)后,TLR4信號(hào)通路中產(chǎn)生的促炎因子IL-6, IL-1β,模型組顯著高于正常組(p＜0.01),而柯里拉京處理組顯著低于模型組(p＜0.01)；結(jié)論：在細(xì)胞模型上,柯里拉京可通過(guò)抑制TLR4信號(hào)通路中TLR4, MyD88, TRIF, TRAF6的表達(dá),從而抑制促炎因子IL-6,IL-1β的釋放。 目的：細(xì)胞模型上研究柯里拉京對(duì)TLR4-MyD88信號(hào)通路的作用及其機(jī)制。方法：采用小分子RNA干擾技術(shù)沉默TICAM1的表達(dá),脂多糖(LPS)刺激RAW264.7細(xì)胞造成炎癥模型。予以柯里拉京進(jìn)行干預(yù)。實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)各組TICAMl的表達(dá),及柯里拉京干預(yù)后TLR4, TRAF6, MyD88的mRNA的表達(dá)水平；結(jié)果：1.實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)TICAM1siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞后TICAM1mRNA表達(dá)水平,與正常組相比siRNA表達(dá)量明顯降低(P0.01);2.柯里拉京干預(yù)后,TLR4-MyD88信號(hào)通路中TLR4,MyD88, TRAF6的mRNA模型組顯著高于正常組(P＜0.01),而柯里拉京處理組顯著低于模型組(P＜0.01)；結(jié)論：在細(xì)胞模型上,柯里拉京可抑制TLR4-MyD88信號(hào)通路中TLR4, MyD88, TRIF, TRAF6的表達(dá), 目的：動(dòng)物模型上研究柯里拉京對(duì)TLR4信號(hào)通路的作用及其機(jī)制。方法：脂多糖(LPS)腹腔注射Balb/c雄性小鼠造成膿毒癥模型。予以柯里拉京進(jìn)行干預(yù)。HE染色檢測(cè)小鼠肝,脾,肺,腎,結(jié)腸及腦組織的病理改變；實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)各組TLR4,MyD88,TRIF,TRAF6, HMGB1的mRNA的表達(dá)水平；Western blot測(cè)定各組TLR4信號(hào)通路中各信號(hào)分子蛋白的表達(dá)；ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清中的IL-1β,IL-6;結(jié)果：1.HE染色病理切片示,模型組小鼠均有不同程度的病理?yè)p傷,而柯里拉京處理組,能一定程度上改善各個(gè)臟器的炎癥,壞死,水腫等情況；2.柯里拉京干預(yù)后,TLR4信號(hào)通路中TLR4,MyD88,TRIF,TRAF6, HMGB1的mRNA和蛋白水平,模型組顯著高于正常組(p0.01),而柯里拉京處理組顯著低于模型組(p0.01)；3.柯里拉京干預(yù)后,TLR4信號(hào)通路中產(chǎn)生的促炎因子IL-6,IL-1β,模型組顯著高于正常組(p0.01),而柯里拉京處理組顯著低于模型組(p0.01)；結(jié)論：在動(dòng)物模型上,柯里拉京可通過(guò)抑制TLR4信號(hào)通路中TLR4,MyD88,TRIF,TRAF6, HMGB1的表達(dá),從而抑制促炎因子IL-6,IL-1β的釋放。
[Abstract]:Objective to study the effect of Coriragin on TLR4 signaling pathway and its mechanism. Methods: lipopolysaccharide (LPS) stimulated RAW264.7 cells to establish inflammatory model. The cell survival rate was measured by Corilagine intervention. CCK8 method. The expression level of mRNA in TLR4, MyD88, TRIFand TRAF6 was detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction and the expression of each signal molecule protein in TLR4 signal pathway in each group was detected by Western blot. Results: 1. The IC50 value of Coriragin detected by CCK8 method was 0.25 mg / ml ~ (2), and the expression of IL-10 and IL-6 in cell supernatant was detected by Elisa. The mRNA and protein levels of TLR4, MyD88, trif, TRAF6 in the model group were significantly higher than those in the normal group (P < 0.01), but significantly lower in the Coriragin treated group than in the model group (P < 0.01). IL-6 and IL-1 尾 produced in TLR4 signaling pathway after Corilagine intervention were significantly higher in the model group than in the normal group (p < 0.01), but significantly lower in the Coriragin treated group than in the model group. Conclusion: in the cell model, the level of IL-6 and IL-1 尾 in the model group is significantly lower than that in the model group. Coriragin can inhibit the release of IL-6 and IL-1 尾 by inhibiting the expression of TLR4, MyD88, trif, TRAF6 in TLR4 signaling pathway. Aim: to study the effect of Coriragin on TLR4-MyD88 signaling pathway and its mechanism. Methods: small molecular RNA interference technique was used to silence the expression of TICAM1, and lipopolysaccharide (LPS) stimulated RAW264.7 cells to create inflammatory model. Coriragin was given intervention. The expression of TICAMl and the mRNA levels of TLR4, TRAF6 and MyD88 in each group were detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, and the results showed that the expression level of TLR4, TRAF6 and MyD88 was 1: 1. Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (FQ-PCR) was used to detect the expression of TICAM1mRNA in TICAM1siRNA transfected cells. Compared with the control group, the expression of siRNA was significantly lower than that of the control group. The expression of TLR4-MyD88 in mRNA model group was significantly higher than that in normal group (P < 0.01), while that in Coriragin treatment group was significantly lower than that in model group (P < 0.01). Conclusion: in cell model, Coriragin can inhibit the expression of TLR4, MyD88, trif, TRAF6 in TLR4-MyD88 signaling pathway. Aim: to study the effect and mechanism of Coriragin on TLR4 signaling pathway in animal models. Methods: Balb/c male mice were injected intraperitoneally with lipopolysaccharide (LPS) to establish septic model. The pathological changes of liver, spleen, lung, kidney, colon and brain of mice were detected by HE staining. Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (FQ-PCR) was used to detect the expression level of TLR4, MyD88-TRIFTRAF6, and the level of mRNA in HMGB1. The expression of signal molecular proteins in the TLR4 signaling pathway was detected by Western blot and the expression of IL-1 尾 -IL-6 in the supernatant was detected by Elisa. Model group mice have different degrees of pathological injury, while Corilagine treatment group, to some extent, can improve the inflammation, necrosis, edema and other conditions of various organs. 2. The levels of mRNA and protein of TRAF6, HMGB1 in TLR4 / TLR4 signaling pathway were significantly higher in model group than in normal group (P 0.01), but significantly lower in Coriragin treatment group than in model group. IL-6 and IL-1 尾 produced in TLR4 signaling pathway were significantly higher in the model group than in the normal group (P 0.01), while that in the Coriragin treated group was significantly lower than that in the model group. Conclusion: in the animal model, the expression of IL-6 and IL-1 尾 in the TLR4 signaling pathway was significantly lower than that in the control group. Coriragin could inhibit the release of IL-6 and IL-1 尾 by inhibiting the expression of TRIFF6, HMGB1 in the TLR4 signaling pathway.
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R459.7

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 傅琪琳;馮琴;胡義揚(yáng);徐琳;王文靜;曹健美;李小飛;彭景華;王曉檸;陳亮;趙瑜;黃甫;;健脾活血方抗內(nèi)毒素誘發(fā)大鼠急性肝損傷的主效應(yīng)中藥篩選驗(yàn)證及藥理作用環(huán)節(jié)點(diǎn)分析[J];中華中醫(yī)藥雜志;2012年04期

2 陳懷生;周志強(qiáng);周知遠(yuǎn);溫雋珉;文舜康;吳勝楠;;胸腔阻抗法血流動(dòng)力學(xué)監(jiān)測(cè)對(duì)膿毒癥早期液體復(fù)蘇的意義[J];廣東醫(yī)學(xué);2012年15期

3 劉艷民;張金良;曾輝;王憲波;;中藥及其提取物阻抑脂多糖/半乳糖胺誘導(dǎo)的急性肝衰竭的研究進(jìn)展[J];中國(guó)肝臟病雜志(電子版);2013年03期

4 胡堅(jiān);楊閏平;汶春苗;李恒進(jìn);趙華;;NLRP3炎癥小體在咪喹莫特誘導(dǎo)小鼠銀屑病樣模型中的表達(dá)及芥菜籽對(duì)其的影響[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2013年09期

5 周鴻淼;岳華;湯承;吳巧;;脂多糖染毒小鼠穩(wěn)定內(nèi)參基因的篩選[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2013年10期

6 李曼;陸林;沈衛(wèi)峰;;高遷移率族蛋白B1與心血管疾病關(guān)系的研究進(jìn)展[J];國(guó)際心血管病雜志;2013年04期

7 黎介壽;;首選腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)的合理性[J];腸外與腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng);2013年06期

8 羅毅;劉路培;黃振宇;黃善華;龍春萍;羅翠瓊;;垂體后葉素治療感染性休克的效果觀察[J];廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2013年05期

9 林沛艾;廖婧華;;多巴胺聯(lián)合腎上腺素對(duì)43例感染性休克患者麻醉期循環(huán)功能的影響[J];福建醫(yī)藥雜志;2013年05期

10 孟繁u&;岑英文;郭應(yīng)軍;黃小洵;周丹丹;;靜脈注射左西孟旦對(duì)膿毒癥休克患者心肌抑制影響的臨床療效[J];重慶醫(yī)學(xué);2013年26期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 張宏民;劉大為;;心功能導(dǎo)向的急性呼吸窘迫綜合征肺保護(hù)性通氣策略[A];重癥醫(yī)學(xué)——2011[C];2011年

2 張穎;Yuanyuan Zhang;Yun Xie;Yonggang Gao;Juanjuan Ma;Jie Yuan;Juan Li;Jiangyan Wang;Lei Li;Jianping Zhang;Li Chu;;丹參對(duì)鐵超載肝纖維化的多靶點(diǎn)抑制作用(英文)[A];第十一屆全國(guó)博士生學(xué)術(shù)年會(huì)（生物醫(yī)藥專題）論文集（上冊(cè)，，大會(huì)報(bào)告）[C];2013年

3 苗彬;張淑文;王紅;楊鐵城;周德山;王寶恩;;厚樸酚對(duì)膿毒癥所致胃腸動(dòng)力障礙的干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究[A];第九次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)理論研究學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2013年

4 Yaogang Zhong;Tianran Ma;Xiuxuan Sun;Wentian Chen;Yuan Hu;Yannan Qin;Peixin Zhang;Haoxiang Wu;Jihong Cui;Huijie Bian;Zheng Li;;Alteration and location of GalNAc-binding proteins in activated human hepatic stellate cells[A];第十一屆全國(guó)博士生學(xué)術(shù)年會(huì)（生物醫(yī)藥專題）論文集（中冊(cè)，墻報(bào)P1-P24）[C];2013年

5 宋景春;Dunzhong Hu;Chao He;Tao Wang;Xuefeng Liu;Linhao Ma;Zhaofen Lin;Zili Chen;;Novel Biomarkers for Early Prediction of Sepsis-Induced Disseminated Intravascular Coagulation in a Mouse Cecal Ligation and Puncture Model[A];江西省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)重癥醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)暨第一屆長(zhǎng)城危重病論壇論文匯編[C];2013年

6 胡松浩;陸曉彤;孫朝榮;楊怡;張健;;兒科重癥監(jiān)護(hù)室急救藥品的使用[A];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)(2013年8月第32卷增刊)[C];2013年

7 趙永禎;李春盛;賈育梅;;降鈣素原聯(lián)合白細(xì)胞介素-6對(duì)急診膿毒癥患者的預(yù)后評(píng)估[A];《中華急診醫(yī)學(xué)雜志》第十三屆組稿會(huì)暨第六屆急診醫(yī)學(xué)青年論壇論文匯編[C];2014年

8 陳微微;李建萍;溫建立;王遠(yuǎn)方;張歷;張偉;唐洪波;吳太宇;;中心靜脈血氧飽和度在感染性休克癥監(jiān)測(cè)中意義[A];全國(guó)高血壓防治知識(shí)推廣培訓(xùn)班暨健康血壓中國(guó)行海南�？跁�(huì)論文綜合刊[C];2014年

9 趙俊;;TLR4在老年高血壓腦出血患者血腫周圍腦組織中的表達(dá)及意義[A];全國(guó)高血壓防治知識(shí)推廣培訓(xùn)班暨健康血壓中國(guó)行海南海口會(huì)論文綜合刊[C];2014年

10 陳東暉;鄭鵬遠(yuǎn);;腸道細(xì)菌在腸-肝軸中的作用[A];第三屆特種醫(yī)學(xué)暨山東-河南-湖北三省聯(lián)合微生態(tài)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 張宏民;嚴(yán)重感染心功能抑制的臨床和實(shí)驗(yàn)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

2 王佳平;肺纖維化的免疫發(fā)病學(xué)機(jī)制[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

3 梁曼;乙醇與苯丙胺類毒品多藥濫用對(duì)大鼠體內(nèi)毒物分布影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];華中科技大學(xué);2011年

4 陳秀凱;感染性休克致急性腎損傷的血流動(dòng)力學(xué)及機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

5 谷雨;1.雙環(huán)醇對(duì)免疫性肝纖維化大鼠的保護(hù)作用及機(jī)制研究 2.Beagle犬口服富馬酸泰諾福韋二吡呋酯和BP0018后血漿藥代動(dòng)力學(xué)及生物利用度研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

6 楊聞;法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑對(duì)膿毒癥小鼠免疫功能及預(yù)后影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];華中科技大學(xué);2012年

7 張永勝;一種人微衛(wèi)星DNA來(lái)源的抑制性寡核苷酸功能及構(gòu)效研究[D];吉林大學(xué);2012年

8 王濤;新的內(nèi)毒素結(jié)合蛋白CRISPLD2在膿毒癥中的表達(dá)及其意義[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

9 來(lái)要良;酒精性肝硬化內(nèi)毒素血癥中醫(yī)證候?qū)W特點(diǎn)及益氣活血解毒法對(duì)其干預(yù)的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

10 趙一萍;蒙古馬免疫相關(guān)基因表達(dá)研究及脾臟表達(dá)譜分析[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 代雪飛;咖啡因?qū)Υ笫缶凭愿卫w維化的防治作用及部分作用機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

2 劉嘉頎;慢性乙型肝炎患者腸道菌群結(jié)構(gòu)的分子生態(tài)學(xué)研究[D];上海交通大學(xué);2011年

3 劉嘉頎;慢性乙型肝炎患者腸道菌群結(jié)構(gòu)[D];上海交通大學(xué);2011年

4 曹芹芳;外源性核酸（珍奧肝泰）對(duì)大鼠酒精性肝病的預(yù)防與治療作用研究[D];華中科技大學(xué);2011年

5 王畢娟;酒精性肝病患者淋巴細(xì)胞染色體損傷與氧化應(yīng)激的關(guān)系[D];蘭州大學(xué);2010年

6 楊萬(wàn)枝;咖啡因?qū)Υ笫缶凭愿卫w維化HSC中cAMP和PI信號(hào)通路作用研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

7 李敏;嚴(yán)重膿毒癥患兒各臟器功能評(píng)估及NT-Pro BNP對(duì)其早期心血管功能評(píng)估的價(jià)值[D];山東大學(xué);2012年

8 黎志財(cái);內(nèi)源性TNF-α在細(xì)菌脂蛋白誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡中的作用以及IL-10的保護(hù)效應(yīng)[D];南京醫(yī)科大學(xué);2012年

9 施杰;PMS1077抑制NF-кB活化并促進(jìn)TNF-α誘導(dǎo)的前列腺癌細(xì)胞凋亡[D];蘭州大學(xué);2013年

10 楊毅雯;紫茉莉?qū)凭愿螕p傷大鼠ALT、AST、T-SOD影響的研究[D];大理學(xué)院;2013年

本文編號(hào)：1874157