本文選題：燒沖復(fù)合傷　切入點：沖擊傷　出處：《中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院》2017年博士論文

【摘要】：目的:燒沖復(fù)合傷是常見的致死性損傷類型之一。導(dǎo)致心肺功能、免疫調(diào)節(jié)、凝血系統(tǒng)的損傷程度都較單一燒傷或單一沖擊傷更嚴重,特別是循環(huán)系統(tǒng)變化尤為顯著。因此,心肌損傷的治療對機體整體救治影響深遠。最近的研究表明鈣蛋白酶活化后能誘導(dǎo)心肌細胞凋亡,引起心肌收縮功能下降。為闡明燒沖復(fù)合傷心肌損傷的機制,為臨床治療提供理論依據(jù)和治療靶點,本研究擬探討:(1)燒沖復(fù)合傷大鼠心肌損傷及鈣蛋白酶變化規(guī)律的研究;(2)鈣蛋白酶在燒沖復(fù)合傷心肌損傷中作用,探討燒沖復(fù)合傷心肌損傷的發(fā)病機制,為其臨床救治尋找新的方法;(3)果糖二磷酸鈉對燒沖復(fù)合傷大鼠心肌損傷的治療作用及機制。方法:實驗分為三部分。第一部分選取雄性SD大鼠,隨化分為:對照組、燒傷組、沖擊傷組、燒沖復(fù)合傷組。第二部分使用隨機數(shù)字表法將大鼠分為燒沖復(fù)合傷組、MDL28170抑制劑組和Ac-DEVD-Cho抑制劑組。(細胞實驗)H9C2細胞分為對照組、燒沖復(fù)合傷組、燒沖復(fù)合傷組+MDL2817組、燒沖復(fù)合傷+Ac-DEVD-Cho抑制劑組。calpain基因干擾性RNA(siRNA)將H9C2分為(1)對照組(2)實驗組(BB) (3)陰性scramble+BB組(4)陽性siRNA+BB組;第三部分雄性SD大鼠隨機分為正常對照組、燒沖復(fù)合傷組和果糖二磷酸鈉組。傷后6h、24h、48h、72h4個觀察點,采集腹主動脈血和心肌標本。測定左心室射血分數(shù)、左心室短軸縮短指數(shù);心肌組織HE染色;透射電鏡觀察心肌組織超微結(jié)構(gòu)變化;血清CTnI、CK-MB檢測;Tunel染色檢測心肌組織細胞凋亡,實時定量熒光PCR檢測calpain表達水平、calpastatin表達水平;熒光定量檢測鈣蛋白酶活性。Western blot免疫印跡分析心肌中calpain、細胞色素c、活化Bid、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78、CCAAT/增強子結(jié)合蛋白同源蛋白、B淋巴細胞瘤-2基因、Bcl-2相關(guān)X蛋白和calpastatin的表達;電子探針X射線顯微分析法檢測心肌細胞胞漿內(nèi)Ca2+含量。結(jié)果:第一部分:燒沖復(fù)合傷大鼠射血分數(shù)下降、心肌酶譜,肌鈣蛋白、凋亡指數(shù)增高,GRP78、CHOP、Bax、Cytc、Bid蛋白表達和caspase-3,12活性及calapin蛋白表達及mRNA水平升高,calpastatin mRNA和calpastatin蛋白表達與Bcl-2蛋白降低,心肌細胞漿Ca2+升高,與對照組比較差異顯著。第二部分:燒沖復(fù)合傷組大鼠的心功能下降,CTnI、CK-MB、Grp78、CHOP、Bax、Fas、Cytc、Bid蛋白表達、caspase-3, 12活性和傷后凋亡指數(shù)、鈣蛋白酶活性升高,與同時間點MDL28170抑制劑組、Ac-DEVD-Cho抑制劑組相比,有顯著性差異,H9C2細胞胞漿中Ca2+與鈣蛋白酶變化趨勢一致。calpain基因干擾后,H9C2細胞calpain蛋白表達降低。RNA干擾組細胞熒光強度相對較弱。第三部分:果糖二磷酸鈉組大鼠傷后心功能緩慢下降,cTnI、CK-MB變化趨勢與燒沖復(fù)合傷組一致,GRP78、CHOP、calapin蛋白表達水平和細胞漿中Ca2+低于燒沖復(fù)合傷組,有顯著性差異。結(jié)論:(1)燒沖復(fù)合傷后鈣蛋白酶表達升高、活性增強是導(dǎo)致大鼠心功能心功能降低重要原因之一;(2)燒沖復(fù)合傷后引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激導(dǎo)致心肌細胞內(nèi)Ca2+超載使鈣蛋白酶活化,活化的鈣蛋白酶過表達促進心肌細胞凋亡,細胞凋亡主要由于線粒體外膜通透性的增加、促凋亡物質(zhì)的釋放、凋亡執(zhí)行分子caspase-3活化引起。(3)鈣蛋白酶抑制劑(MDL28170)和果糖二磷酸鈉能減輕鈣蛋白酶表達升高、活性增強引起得心功能降低,為指導(dǎo)臨床治療重度燒沖復(fù)合傷心功能降低提供理論依據(jù)。
[Abstract]:Objective: burn is one of the common lethal injury type. Lead to heart and lung function, immune regulation, the damage degree of the coagulation system compared with single or single burn blast injury is more serious, especially the changes of circulatory system is particularly significant. Therefore, the treatment of myocardial injury has a great effect on the whole body treatment. Recent studies show that after the activation of calpain can induce the apoptosis of myocardial cells, myocardial contraction function decreased. To elucidate the mechanism of burn blast combined injury of myocardium, and provide a theoretical basis and therapeutic targets for clinical treatment, this study aims to investigate: (1) study on burn rat myocardial injury and calpain changes; (2) calpain in burn-blast composite myocardium injury, to investigate the pathogenesis of combined burn blast injury myocardium, to find a new method for the clinical treatment; (3) two fructose sodium phosphate on myocardial injury in rats with burn shock 鎹熶激鐨勬不鐤椾綔鐢ㄥ強鏈哄埗.鏂規(guī)硶:瀹為獙鍒嗕負涓夐儴鍒，

本文編號：1690142