本文選題：心臟驟停　切入點：心肺復(fù)蘇　出處：《華中科技大學(xué)》2014年博士論文

【摘要】：[目的]線粒體功能障礙在心臟驟停及心肺復(fù)蘇(cardiopulmonary resuscitation, CPR)后腦損傷的病理生理變化中起著非常重要的作用。最近在許多對缺血再灌注損傷的研究中,都發(fā)現(xiàn)硫化氫(hydrogen sulfide, H2S)及其供體可對目標(biāo)臟器線粒體功能起到一定的保護作用。本研究將大鼠作為研究對象,建立心臟驟停及心肺復(fù)蘇模型,探討經(jīng)靜脈注射H2S供體NaHS是否可對心肺復(fù)蘇后腦線粒體發(fā)揮保護作用,并初步闡明其可能的作用機制。 [方法]SD雄性大鼠隨機分為3組：(1)假手術(shù)組：僅進行麻醉、經(jīng)口腔氣管插管和經(jīng)股動、靜脈置管等操作；(2)CPR組：采用經(jīng)皮電刺激心外膜法制備心臟驟停模型并成功進行心肺復(fù)蘇,在復(fù)蘇前1分鐘,經(jīng)股靜脈注射生理鹽水(1.67ml/kg),此后持續(xù)泵入生理鹽水(5ml/kg/h)3小時；(3)CPR+NaHS組：采用經(jīng)皮電刺激心外膜法制備心臟驟停模型并成功進行心肺復(fù)蘇,在復(fù)蘇前1分鐘經(jīng)股靜脈注射NaHS (0.5mg/kg),此后持續(xù)泵入NaHS (1.5mg/kg/h)3小時。復(fù)蘇后24小時觀察各組大鼠生存情況,利用NDS評分系統(tǒng)評價各組大鼠神經(jīng)功能損傷情況。隨后處死大鼠,取腦皮質(zhì)進行后續(xù)研究：①尼氏染色觀察各組大鼠腦組織神經(jīng)細(xì)胞損傷情況；②在透射電鏡下觀察各組大鼠腦組織線粒體損傷情況；③取各組大鼠腦皮質(zhì)制作單細(xì)胞懸液,流式細(xì)胞術(shù)測定各組大鼠單細(xì)胞懸液中氧自由基(reactive oxygen species, ROS)、Ca2+和線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential, MMP)的變化情況；④提取各組大鼠腦皮質(zhì)線粒體,化學(xué)發(fā)光法測定其線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔(mitochondrial permeability transition pores, mPTP)變化情況,Western blot法測定各組大鼠線粒體內(nèi)外細(xì)胞色素c (cytochrome c, cyt c)變化情況；⑤化學(xué)發(fā)光法測定各組大鼠皮質(zhì)內(nèi)ATP含量；⑥Real Time PCR法測定各組大鼠皮質(zhì)內(nèi)線粒體DNA (mitochondrial DNA, mtDNA)含量；⑦Western blot法測定各組大鼠皮質(zhì)內(nèi)過氧化物酶體增殖物受體γ共激活因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptor-y coactvator-1a, PGC-1a)、核呼吸因子-1(nuclear respiratory factor-1, NRF-1)和核因子紅細(xì)胞系2相關(guān)因子-2(nuclear factor erythroid2-related factor2, Nrf-2)蛋白的表達(dá)變化。 [結(jié)果]①與假手術(shù)組相比,CPR組與CPR+NaHS組大鼠在復(fù)蘇成功后24小時NDS評分均明顯下降(P0.01),與CPR組相比,CPR+NaHS組大鼠NDS評分顯著提高(P0.01)；②與假手術(shù)組相比,CPR組與CPR+NaHS組大鼠神經(jīng)細(xì)胞及皮質(zhì)線粒體均有不同程度的損傷,但是CPR+NaHS組大鼠二者損傷明顯較CPR組減輕；③與假手術(shù)組相比,CPR組與CPR+NaHS組大鼠腦單細(xì)胞懸液中ROS、 Ca2+濃度均明顯上升(P0.01),而線粒體MMP均明顯下降(P0.01),與CPR組相比,CPR+NaHS組大鼠腦單細(xì)胞懸液中ROS、Ca2+濃度均有明顯下降(P0.01),而線粒體MMP得到提升(P0.05)；④與假手術(shù)組相比,CPR組與CPR+NaHS組線粒體mPTP均明顯增加(P0.01),與CPR組相比,CPR+NaHS組線粒體mPTP顯著下降(P0.01)；⑤與假手術(shù)組相比,CPR組與CPR+NaHS組胞質(zhì)內(nèi)從線粒體內(nèi)漏出的cyt c均明顯增多(P0.01),與CPR組相比,CPR+NaHS組胞質(zhì)內(nèi)cyt c含量下降(P0.05)；⑥與假手術(shù)組相比,CPR組與CPR+NaHS組皮質(zhì)組織內(nèi)ATP含量均明顯減少(P0.01),與CPR組相比,CPR+NaHS組皮質(zhì)組織內(nèi)ATP含量增多(P0.05)；⑦與假手術(shù)組相比,CPR組與CPR+NaHS組皮質(zhì)組織內(nèi)mtDNA含量均明顯增多(P0.01),與CPR組相比,CPR+NaHS組皮質(zhì)組織內(nèi)mtDNA含量增多趨勢更為明顯(P0.05)；⑧與假手術(shù)組相比,CPR組與CPR+NaHS組皮質(zhì)組織內(nèi)PGC-1α、NRF-1、Nrf-2表達(dá)量均明顯增多(NRF-1:P0.05,余指標(biāo)P0.01),與CPR組相比,CPR+NaHS組皮質(zhì)組織內(nèi)三種蛋白表達(dá)量增多趨勢更為明顯(P0.01)。 [結(jié)論]外源性硫化氫可明顯改善心肺復(fù)蘇后24小時神經(jīng)功能損傷,可能與其顯著減輕腦線粒體損傷并保護線粒體功能,同時增加線粒體生物發(fā)生有關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R459.7

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 張雷,林兆奮,繆明永,楊興易,馬宇潔;心肺復(fù)蘇后大鼠腦細(xì)胞線粒體呼吸功能的變化及左卡尼汀的干預(yù)作用[J];藥學(xué)服務(wù)與研究;2005年03期

，

本文編號：1683769