本文選題：表皮葡萄球菌　切入點(diǎn)：脂肽　出處：《華東師范大學(xué)》2013年博士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：作為機(jī)體的第一道屏障,皮膚表面生存著多種微生物。這些微生物大部分是無(wú)害的,在一定條件還可以調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答有益于宿主,因此研究皮膚微生物與宿主之間的關(guān)系具有重要的意義。表皮葡萄球菌是寄居在皮膚表面的主要共生菌,我們實(shí)驗(yàn)室前期研究表明表皮葡萄球菌在增強(qiáng)皮膚免疫防御和調(diào)節(jié)炎癥中具有重要功能,但是對(duì)表皮葡萄球菌調(diào)節(jié)宿主免疫應(yīng)答的具體活性物質(zhì)及相應(yīng)的分子調(diào)節(jié)機(jī)制還不清楚。本文在表皮葡萄球菌發(fā)酵液中提取到一種脂肽,其多肽序列為DⅡSTIGDLVKWⅡDTVⅡD ATE,脂肪酸序列為C20H40COOH,脂肪酸結(jié)合在多肽的LysⅡ(LP01)或Asp1(LP78)上,這兩種脂肽在調(diào)節(jié)機(jī)體先天免疫中具有重要功能。 體外實(shí)驗(yàn)證明LP01顯著地誘導(dǎo)角質(zhì)形成細(xì)胞中β-防御素的表達(dá),經(jīng)LP01刺激的角質(zhì)形成細(xì)胞裂解液能夠特異性抑制金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)；而體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明LP01誘導(dǎo)小鼠β-防御素的表達(dá)進(jìn)而抑制金黃色葡萄球菌對(duì)小鼠皮膚的感染,同時(shí)小鼠肝臟內(nèi)金黃色葡萄球菌的數(shù)目顯著減少,但是脾臟內(nèi)細(xì)菌數(shù)目沒(méi)有改變。本研究進(jìn)一步探究了LP01誘導(dǎo)p-防御素表達(dá)的機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：TLR2基因被沉默或敲除后,LP01不能誘導(dǎo)β-防御素的表達(dá),也不能抑制金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)；CD36基因被沉默后,LP01對(duì)p-防御素的誘導(dǎo)作用明顯降低；p38MAPK抑制劑SB202190能夠顯著抑制LP01誘導(dǎo)的β-防御素的表達(dá),因此LP01通過(guò)激活TLR2/CD36-p38MAPK信號(hào)通路誘導(dǎo)β-防御素的表達(dá)。 脂肽除了增強(qiáng)機(jī)體免疫防御外還可以調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng),本研究檢測(cè)了LP01及其同分異構(gòu)體LP78對(duì)炎癥反應(yīng)的影響,發(fā)現(xiàn)LP78抑制poly(I:C)秀導(dǎo)的炎癥反應(yīng),而LP01本身不能抑制炎癥因子的表達(dá)。poly(I:C)誘導(dǎo)p65的磷酸化進(jìn)而促使其入核,p65與PPARγ相結(jié)合共同起始炎癥反應(yīng)。LP78能夠誘導(dǎo)β-catenin的磷酸化,促使其穩(wěn)定性和在細(xì)胞核內(nèi)的聚集,β-catenin與p65競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合PPARγ進(jìn)而抑制poly(I:C)誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)。而LP78調(diào)節(jié)β-catenin與p65競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合PPARy是通過(guò)激活TLR2/CD14/CD36-PKA信號(hào)通路,因?yàn)椴还苁且种苹蚯贸齌LR2,還是將TLR2的輔助受體CD14和CD36基因沉默或PKA活性被抑制后,LP78均不能誘導(dǎo)β-catenin的磷酸化和β-catenin在細(xì)胞核內(nèi)的聚集,從而不能抑制poly(I:C)誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。而脂肽LP78的生理功能體現(xiàn)在抑制糖尿病小鼠傷口過(guò)度的炎癥因子的表達(dá)從而促進(jìn)傷口愈合。 總之,表皮葡萄球菌與宿主之間存在著有益的關(guān)系,表皮葡萄球菌分泌的脂肽一方面通過(guò)激活TLR2/CD36-p38MAPK信號(hào)通路誘導(dǎo)防御素的表達(dá)抵制病原菌對(duì)機(jī)體的感染,另一方面通過(guò)TLR2/CD14/36-PKA-β-catenin信號(hào)通路調(diào)節(jié)傷口炎癥應(yīng)答進(jìn)而促進(jìn)傷口愈合。
[Abstract]:As the body's first barrier, there are a variety of microbes on the surface of the skin. Most of these microorganisms are harmless and, under certain conditions, regulate the immune response of the body to benefit the host. Therefore, it is important to study the relationship between skin microorganism and host. Staphylococcus epidermidis is the main symbiotic bacteria living on the skin surface. Previous studies in our laboratory have shown that Staphylococcus epidermidis plays an important role in enhancing skin immune defense and regulating inflammation. However, the specific active substances regulating host immune response and the corresponding molecular regulation mechanism of Staphylococcus epidermidis were not clear. In this paper, a lipid peptide was extracted from the fermentation broth of Staphylococcus epidermidis. The peptide sequence is D 鈪，

本文編號(hào)：1646545