本文關(guān)鍵詞：豬帶絳蟲CDC37基因的克隆、表達(dá)與組織定位研究

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【摘要】：目的原核表達(dá)豬帶絳蟲(Taeniasolium)細(xì)胞分裂周期蛋白37(cell division cycle 37,TsCDC37),并對其進(jìn)行組織定位和免疫原性研究。方法通過Blastx分析從豬帶絳蟲成蟲cDNA質(zhì)粒文庫中篩選出TsCDC37基因,PCR擴(kuò)增CDC37基因,以pET-28a(+)為載體構(gòu)建目的基因原核表達(dá)體系,在大腸埃希菌(E.coli)BL-21/DE3中誘導(dǎo)表達(dá),純化的重組蛋白免疫SD大鼠制備免疫血清,Western blotting分析重組蛋白的免疫原性,免疫組織化學(xué)方法觀察TsCDC37在豬帶絳蟲成蟲中的組織定位。結(jié)果 PCR、雙酶切和DNA測序結(jié)果均表明重組質(zhì)粒pET-28aTsCDC37構(gòu)建成功。目的基因在BL-21/DE3菌株中得到穩(wěn)定表達(dá),重組蛋白的相對分子質(zhì)量(M_r)為52 000。純化的重組蛋白可被其免疫的SD大鼠血清和豬帶絳蟲病、亞洲帶絳蟲病或牛帶絳蟲病患者血清識別。免疫組化結(jié)果顯示,TsCDC37分布于豬帶絳蟲成蟲表膜和子宮中的蟲卵。結(jié)論純化后的豬帶絳蟲細(xì)胞周期分裂蛋白TsCDC37具有較強(qiáng)的免疫原性,主要定位于豬帶絳蟲成蟲的表膜和子宮中的蟲卵。
【作者單位】： 貴陽醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室;貴陽醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院毒理學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 豬帶絳蟲 細(xì)胞分裂周期蛋白 抗原性 組織定位
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.30760227,81260256) 貴州省科技攻關(guān)項目[黔科合NY字(2009-3074)] 貴州省優(yōu)秀科技教育人才省長資金項目[黔省專合字(2009)82號]~~
【分類號】：R383.32
【正文快照】： 豬帶絳蟲(入琵nia、olium)在我國北部和西部地區(qū)有較嚴(yán)重的流行，，每年由于帶絳蟲病和囊尾坳病造成的畜牧業(yè)損失達(dá)上百億，嚴(yán)重影響西部欠發(fā)達(dá)地區(qū)的社會發(fā)展!’21。導(dǎo)致這種狀況的原因主要是人們的預(yù)防意識不強(qiáng)和至今尚無有效的防治方法。為找到可預(yù)防和診斷豬帶絳蟲感染的候

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 段績輝;食物源性寄生蟲病的流行形勢與控制對策[J];實用預(yù)防醫(yī)學(xué);2005年04期

2 駱學(xué)農(nóng);鄭亞東;才學(xué)鵬;;豬帶絳蟲/囊蟲病的流行現(xiàn)狀及防制策略[J];中國病原生物學(xué)雜志;2007年03期

3 黃江;胡旭初;黃艷;余新炳;包懷恩;郎書源;廖興江;;牛帶絳蟲亞洲亞種蘋果酸脫氫酶基因的生物信息學(xué)分析[J];中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;2008年03期

4 杜武英;戴佳琳;黃江;胡旭初;徐勁;余新炳;廖興江;郎書源;;亞洲帶絳蟲烯醇化酶基因的原核表達(dá)、鑒定與組織定位[J];中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;2009年06期

5 黃江;胡旭初;徐勁;余新炳;包懷恩;郎書源;廖興江;;豬帶絳蟲成蟲cDNA質(zhì)粒文庫的構(gòu)建及EST測序[J];中國人獸共患病學(xué)報;2008年12期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 汪瀚;楊文明;鮑遠(yuǎn)程;汪美霞;韓輝;王曉e

本文編號：974121