共培養(yǎng)環(huán)境中大鼠胚胎中腦細胞誘導人臍帶間充質(zhì)干細胞分化
發(fā)布時間:2017-09-30 09:34
本文關(guān)鍵詞:共培養(yǎng)環(huán)境中大鼠胚胎中腦細胞誘導人臍帶間充質(zhì)干細胞分化
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【摘要】:目的:檢測人臍帶間充質(zhì)干細胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)在與大鼠胚胎中腦細胞共培養(yǎng)環(huán)境中酪氨酸羥化酶(tyrosine hydroxylase,TH)和多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白(dopamine transporter,DAT)表達的變化。方法:(1)植塊法分離培養(yǎng)hUCMSCs,以細胞免疫化學法鑒定其表面特異性標記物的表達;(2)無菌條件下分離E15大鼠胚胎中腦組織,制成單細胞懸液及中腦組織提取液;(3)用大鼠胚胎中腦組織提取液做培養(yǎng)液,將5-溴脫氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)標記的hUCMSCs與大鼠胚胎中腦細胞共培養(yǎng)14 d,細胞免疫化學法檢測hUCMSCs中TH和DAT的表達。結(jié)果:HUCMSCs高表達CD29、CD44、CD73、CD90和CD105,極低表達CD31和CD45。在與大鼠胚胎中腦細胞共培養(yǎng)14 d后,hUCMSCs中TH陽性表達率為(18.06±2.29)%,DAT陽性表達率為(11.14±2.10)%。結(jié)論:用植塊法可成功分離并體外培養(yǎng)hUCMSCs,其免疫表型符合間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的特征。在以大鼠胚胎中腦組織提取液作為培養(yǎng)液,并與大鼠胚胎中腦細胞共培養(yǎng)的誘導條件下,hUCMSCs可部分向多巴胺能神經(jīng)元分化。
【作者單位】: 南通大學醫(yī)學院人體解剖學系 江蘇省神經(jīng)再生重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】: 人臍帶間充質(zhì)干細胞 胚胎中腦細胞 胚胎中腦組織提取液 共培養(yǎng) 多巴胺能神經(jīng)元 分化 大鼠
【基金】:江蘇高校優(yōu)勢學科建設(shè)工程資助項目(PAPD) 南通市科技計劃項目(K2010040,BK2012073)
【分類號】:R329
【正文快照】: 帕金森病(Parkinson’s disease,PD)的腦內(nèi)移植研究已取得了較大進展,有許多PD患者接受了流產(chǎn)胎兒中腦組織的移植,移植組織中多巴胺能神經(jīng)元能夠長期存活,并不斷釋放多巴胺,使病人的癥狀得以明顯改善[1,2]。但因胚腦移植物來源有限、異體免疫排斥及倫理等問題,胚腦組織移植在
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2 李府;馬麗霞;張樂玲;鄭立波;陳穎杰;吳鎮(zhèn);王世富;;細胞因子聯(lián)合紋狀體條件培養(yǎng)液定向誘導間充質(zhì)干細胞體外分化為多巴胺能神經(jīng)元[J];中國組織工程研究與臨床康復;2008年43期
3 李衛(wèi)東;張曉剛;常靜;蔣芳萍;;與心肌細胞共培養(yǎng)的小鼠胚胎干細胞向心肌樣細胞分化[J];基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床;2009年01期
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本文編號:947463
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