本文關(guān)鍵詞：A549細(xì)胞炎癥氧化應(yīng)激模型Nox1啟動子差異結(jié)合蛋白的篩選

  更多相關(guān)文章： 腫瘤壞死因子-α Nox 氧化應(yīng)激 轉(zhuǎn)錄調(diào)控 A細(xì)胞

【摘要】：目的在炎癥氧化應(yīng)激細(xì)胞模型中篩選參與Nox1啟動子活化的相關(guān)調(diào)控蛋白。方法 TNF-α刺激A549細(xì)胞建立炎癥氧化應(yīng)激細(xì)胞模型,運(yùn)用DNApull-down技術(shù)篩選出Nox1啟動子區(qū)結(jié)合蛋白,再用二維凝膠電泳技術(shù)分離pull-down后的結(jié)合蛋白,然后在2D凝膠上選取與對照組表達(dá)差異大于1.5倍的蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行切膠,最后經(jīng)基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜鑒定,篩選出Nox1啟動子區(qū)差異結(jié)合蛋白。結(jié)果 2D凝膠上共篩選出1.5倍以上差異蛋白點(diǎn)7個,均為表達(dá)上調(diào)蛋白,鑒定出GLE1、DDX19A,KRT1、KRT1O四種蛋白質(zhì)。結(jié)論 GLE1、DDX19A,KRT1、KRT10參與了TNF-α誘導(dǎo)的A549細(xì)胞Nox1活化的基因調(diào)控,為研究炎癥氧化應(yīng)激細(xì)胞模型的Nox1啟動子區(qū)調(diào)控蛋白的生物學(xué)功能奠定了實驗基礎(chǔ)。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)院;廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院呼吸內(nèi)科;南方醫(yī)科大學(xué)病理生理學(xué)教研室;南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院急診科;
【關(guān)鍵詞】： 腫瘤壞死因子-α Nox 氧化應(yīng)激 轉(zhuǎn)錄調(diào)控 A細(xì)胞
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81070003)~~
【分類號】：R363
【正文快照】： 肺泡n型上皮細(xì)胞作為肺泡L皮細(xì)胞的“干細(xì)胞”，，具有增殖和分泌的功能，在肺部炎癥及氧化應(yīng)激過程中起重要作用，促發(fā)“瀑布式炎癥級聯(lián)反應(yīng)”’!。在肺部感染過程中可產(chǎn)生具有破壞病原微生物及第二信使功能的活性氧(ROs)而啟動下游一系列炎癥氧化應(yīng)激反應(yīng)，并可介導(dǎo)細(xì)胞凋亡

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本文編號：941233