銅綠假單胞菌噬菌體PaP4的分離與鑒定
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【摘要】:【目的】鑒定一株新分離的銅綠假單胞菌噬菌體PaP4的生物學(xué)特性!痉椒ā侩p層瓊脂培養(yǎng)法制備PaP4的單個噬斑,觀察噬斑特點;用聚乙二醇8000濃縮PaP4顆粒后,再用氯化銫密度梯度離心純化;用透射電子顯微鏡觀察磷鎢酸負染色的PaP4顆粒;提取PaP4基因組核酸,通過限制性內(nèi)切酶圖譜分析其核酸類型;按照感染復(fù)數(shù)(MOI)分別為0.000 1、0.001、0.01、0.1、1和10加入噬菌體純培養(yǎng)液和宿主菌,充分裂解細菌后,測定噬菌體滴度;以MOI=10的比例加入噬菌體及宿主菌,進行一步生長實驗,繪制一步生長曲線!窘Y(jié)果】PaP4的噬斑直徑約3 mm 5 mm,圓形透明邊緣清晰;PaP4噬菌體呈多面體立體對稱的頭部,直徑約50 nm,有一個約30 nm的短尾;限制性酶切實驗表明PaP4基因組為雙鏈DNA;當MOI為0.001時PaP4感染其宿主菌產(chǎn)生的子代噬菌體滴度最高;用一步生長曲線描繪了其生長特性!窘Y(jié)論】PaP4屬dsDNA短尾科裂解性噬菌體;最佳感染復(fù)數(shù)是0.001;由一步生長曲線得出感染宿主菌的潛伏期是25 min,裂解期是20 min,平均裂解量是150。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部微生物教研室;
【關(guān)鍵詞】: 銅綠假單胞菌噬菌體 裂解性噬菌體 短尾病毒科 最佳感染復(fù)數(shù) 一步生長曲線
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(No.31070153)
【分類號】:R378
【正文快照】: 銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)為革蘭氏陰性桿菌,是目前臨床上造成醫(yī)院內(nèi)感染的最重要的機會致病菌之一。該菌本身對許多抗生素天然不敏感,并且隨著抗生素的大量使用,銅綠假單胞菌對原本敏感的抗生素也產(chǎn)生了耐藥性。因此,在臨床上對銅綠假單胞菌感染的治療,尤其
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,本文編號:939825
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