本文關(guān)鍵詞：含串聯(lián)多拷貝DNA序列的質(zhì)粒載體的構(gòu)建

  更多相關(guān)文章： DNA 重組 克隆 分子 質(zhì)粒 聚合酶鏈反應(yīng) 串聯(lián)多拷貝DNA序列

【摘要】：目的探索簡便快速的構(gòu)建含有串聯(lián)多拷貝DNA序列的質(zhì)粒載體的方法。方法通過PCR的方法獲得不同拷貝數(shù)的DNA序列的片段,以與載體同源重組的方式將PCR片段與載體重組,得到重組質(zhì)粒。最后經(jīng)BamHⅠ和NotⅠ雙酶切鑒定來確定所構(gòu)建質(zhì)粒中插入重復(fù)DNA序列的拷貝數(shù)。結(jié)果經(jīng)酶切鑒定分析,所得質(zhì)粒分別可以切出不同大小的片段,而且片段大小與所插入的重復(fù)DNA序列拷貝數(shù)是相對應(yīng)的。結(jié)論成功構(gòu)建了含有串聯(lián)多拷貝DNA序列的質(zhì)粒載體,為向質(zhì)粒載體中插入多拷貝DNA序列提供了簡便實用的新方法。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺一科、乳腺癌防治教育部重點實驗室、天津市"腫瘤防治"重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： DNA 重組 克隆 分子 質(zhì)粒 聚合酶鏈反應(yīng) 串聯(lián)多拷貝DNA序列
【分類號】：R346
【正文快照】： 串聯(lián)多拷貝DNA序列質(zhì)粒載體的構(gòu)建在某些蛋白生物學(xué)功能的研究中是必須的,如對一些轉(zhuǎn)錄因子或者RNA結(jié)合蛋白的研究。為了增強目的蛋白與其靶序列的親和力,往往會在質(zhì)粒載體中插入多個拷貝的結(jié)合位點。對于一些較短的結(jié)合序列,首選的方法是通過直接合成得到所需要的多拷貝序列

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本文編號：936730