本文關鍵詞：含串聯(lián)多拷貝DNA序列的質粒載體的構建

  更多相關文章： DNA 重組 克隆 分子 質粒 聚合酶鏈反應 串聯(lián)多拷貝DNA序列

【摘要】：目的探索簡便快速的構建含有串聯(lián)多拷貝DNA序列的質粒載體的方法。方法通過PCR的方法獲得不同拷貝數(shù)的DNA序列的片段,以與載體同源重組的方式將PCR片段與載體重組,得到重組質粒。最后經(jīng)BamHⅠ和NotⅠ雙酶切鑒定來確定所構建質粒中插入重復DNA序列的拷貝數(shù)。結果經(jīng)酶切鑒定分析,所得質粒分別可以切出不同大小的片段,而且片段大小與所插入的重復DNA序列拷貝數(shù)是相對應的。結論成功構建了含有串聯(lián)多拷貝DNA序列的質粒載體,為向質粒載體中插入多拷貝DNA序列提供了簡便實用的新方法。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院乳腺一科、乳腺癌防治教育部重點實驗室、天津市"腫瘤防治"重點實驗室;
【關鍵詞】： DNA 重組 克隆 分子 質粒 聚合酶鏈反應 串聯(lián)多拷貝DNA序列
【分類號】：R346
【正文快照】： 串聯(lián)多拷貝DNA序列質粒載體的構建在某些蛋白生物學功能的研究中是必須的,如對一些轉錄因子或者RNA結合蛋白的研究。為了增強目的蛋白與其靶序列的親和力,往往會在質粒載體中插入多個拷貝的結合位點。對于一些較短的結合序列,首選的方法是通過直接合成得到所需要的多拷貝序列

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 汪小福;劉仁虎;陳笑蕓;高智謀;陳錦清;;可剪切多拷貝抗菌肽融合表達載體的構建[J];遺傳;2007年06期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 金豐良;張呈文;許小霞;孫強;任順祥;;死亡素與泛素在大腸桿菌中的高效融合表達[J];昆蟲學報;2009年05期

2 陳笑蕓;汪小福;劉仁虎;張小明;周育;繆青梅;徐俊鋒;;不同TAIL-PCR通用引物在轉基因大豆、水稻、油菜側翼序列分離中的應用評價[J];核農(nóng)學報;2013年07期

3 曹艷萍;單安山;馬清泉;尹佳佳;;多拷貝策略在小肽表達中的應用[J];生物工程學報;2011年05期

4 祝驥;高飛;易喻;陳建澍;應國清;;抗菌肽的研究進展[J];生命科學;2008年04期

5 王小莉;劉冬;梁世中;;降血壓肽基因工程菌的構建及高效表達策略[J];中國生物工程雜志;2008年03期

6 張軍;楊雅麟;田子罡;王建華;;多肽串聯(lián)基因構建策略[J];中國生物工程雜志;2009年08期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 周緒霞;Apidaecin功能基團和作用靶位點分析及其在乳酸乳球菌中的分泌表達[D];浙江大學;2008年

2 李麗;抗菌肽Abaecin制備及其對肉雞生長及免疫影響的研究[D];內蒙古農(nóng)業(yè)大學;2010年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 程曉云;死亡素(thanatin)基因的克隆和在大腸桿菌中的融合表達[D];蘭州大學;2010年

2 張軍;真菌防御素——菌絲霉素遺傳進化分析，多拷貝表達及其抗菌特性[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2010年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 李穎,余小林,李乃堅,王恒明,黃自然;轉抗菌肽基因辣椒株系的青枯病抗性鑒定及系統(tǒng)選育[J];分子植物育種;2005年02期

2 簡玉瑜,吳新榮,莫豪葵,陳鳳珍,董春,黃自然;應用基因槍將蠶抗菌肽基因導入水稻獲抗白葉枯病株系[J];華南農(nóng)業(yè)大學學報;1997年04期

3 劉慶忠,趙紅軍,劉鵬,Mong Rengong,FreddiA.Hammerschlag;抗菌肽MB_(39)基因導入‘皇家嘎啦’蘋果及其四倍體植株的培育[J];園藝學報;2001年05期

4 賈士榮,屈賢銘,馮蘭香,唐惕,唐益雄,劉坤,趙艷麗,白永延,蔡敏鶯;轉抗菌肽基因提高馬鈴薯對青枯病的抗性[J];中國農(nóng)業(yè)科學;1998年03期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王佑民,黎峰,程樺,傅祖植;大鼠全長OBRbcDNA克隆及真核表達重組體的構建[J];安徽醫(yī)科大學學報;2002年05期

2 吳玲,牛勃,解軍,趙建濱;重組γ干擾素的表達與純化[J];山西醫(yī)科大學學報;2000年04期

3 阮冰,王淑穎,陳勇,莊輝,馬亦林,干夢九;戊型肝炎病毒ORF2重組蛋白的克隆表達及初步應用[J];中華傳染病雜志;2003年02期

4 楊月峰;王榮亮;劉銀霞;王華;畢建進;張慶林;吳祖澤;王立生;;攜帶肝細胞生長因子基因重組質粒在大鼠體內的組織分布研究[J];中國醫(yī)藥生物技術;2008年04期

5 鄭毅雄,陳力,徐少明,彭佳萍,曹江;人血管內皮生長因子基因cDNA的克隆及其在COS-7細胞中的表達[J];浙江大學學報(醫(yī)學版);2002年05期

6 單志新,余新炳,李學榮,馬長玲,陸家海,徐勁;惡性瘧原蟲紅內期p41-3基因真核表達重組質粒的構建及序列分析(英文)[J];中山醫(yī)科大學學報;2001年05期

7 孟靜;劉曉立;郭春;馬春紅;;小鼠Tim-3真核表達載體pTARGET-Tim-3的構建[J];山東大學學報(醫(yī)學版);2010年11期

8 吳東,沈鋒,婁永華,朱玉萍,焦炳華,吳孟超;人THANK基因的克隆和表達[J];第二軍醫(yī)大學學報;2001年07期

9 段勁;陳偉;劉筱娣;郭麗宏;;構建變形鏈球菌psm基因同源重組質粒的實驗[J];中國組織工程研究與臨床康復;2008年20期

10 邱小萍,伍欣星,譚云,鄭義,趙e，

本文編號：936730