本文關(guān)鍵詞：人睪丸組織TRIM69蛋白具有催化多聚泛素鏈形成的活性

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【摘要】：目的驗(yàn)證人源TRIM69蛋白是否具有催化多聚泛素鏈形成的活性。方法把人源TRIM69基因構(gòu)建到原核細(xì)胞表達(dá)載體中,經(jīng)過轉(zhuǎn)化、誘導(dǎo)、表達(dá)和純化獲得TRIM69純化蛋白,通過細(xì)胞外泛素化實(shí)驗(yàn)分析其是否具有催化多聚泛素鏈形成的活性;另外構(gòu)建了TRIM69基因的全長、RING結(jié)構(gòu)域的點(diǎn)突變、以及RING結(jié)構(gòu)域截短序列的真核細(xì)胞表達(dá)載體,瞬時轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞或穩(wěn)定表達(dá)泛素的HeLa細(xì)胞株,通過免疫沉淀結(jié)合免疫印跡方法檢測其是否具有催化多聚泛素鏈形成的活性。結(jié)果泛素化分析實(shí)驗(yàn)表明TRIM69具有催化多聚泛素鏈形成的活性并且其活性依賴于它的RING結(jié)構(gòu)域。結(jié)論成功鑒定了人源TRIM69蛋白具有催化多聚泛素鏈形成的活性,為進(jìn)一步證明其是一個新的E3泛素連接酶提供依據(jù)。
【作者單位】： 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 精子發(fā)生 E泛素連接酶 TRIM RING finger
【基金】：國家重大研究計劃項(xiàng)目(2011CB944302)
【分類號】：R339.21
【正文快照】： 精子發(fā)生的每一個發(fā)育階段,都伴有差異基因精確而有序地表達(dá)[1]。因此,深入了解與精子發(fā)生密切相關(guān)的差異表達(dá)基因,將有助于揭示生殖及進(jìn)化的奧秘。研究表明,泛素化修飾在精子發(fā)生過程中發(fā)揮重要的作用,該修飾過程是通過多種酶級聯(lián)反應(yīng)實(shí)現(xiàn)的[2],其中E3泛素連接酶具有特異性

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 顏秋霞;唐愛發(fā);葛頌;余州;李文杰;陳靜;蔡志明;桂耀庭;;精子頂體小泡蛋白-1(ACRV1)在小鼠睪丸組織中的表達(dá)與定位[J];生殖與避孕;2011年09期

2 袁東智;于海禮;丁小玲;張金虎;何亞平;岳利民;;周期素cyclin G1在小鼠睪丸生精上皮中的表達(dá)特點(diǎn)[J];四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2011年04期

3 林釵英;陶曉倩;柳海燕;時姍姍;路榕;姚兵;;Annexin5對雄性SD大鼠生殖相關(guān)指標(biāo)和睪酮分泌的影響[J];中國男科學(xué)雜志;2010年11期

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5 于春梅;張平;王靜;劉明兮;王暉;周作民;沙家豪;;Annexin A7在精原干細(xì)胞中的表達(dá)研究[J];中華男科學(xué)雜志;2011年06期

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9 張Z斍，

本文編號：935999