本文關(guān)鍵詞：大鼠腸系膜淋巴結(jié)和外周淋巴結(jié)固有exosome的制備及其對T細胞增殖的影響

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【摘要】：目的從大鼠腸系膜淋巴結(jié)、外周淋巴結(jié)中分離純化exosome,鑒定其對T細胞增殖的影響。方法取出BN(RT1n)大鼠的外周淋巴結(jié)及腸系膜淋巴結(jié)并研磨、離心以獲得非細胞組織上清,采用超濾密度梯度離心法提取exosome。透射電鏡對收集的exosome進行形態(tài)學(xué)鑒定,BCA法進行蛋白定量,SDS-PAGE電泳分離蛋白,Western blot檢測IL-10的表達,并通過混合淋巴細胞培養(yǎng)檢測其對T細胞增殖的影響。結(jié)果兩種淋巴組織來源的非細胞組織上清均含有exosome,腸系膜淋巴結(jié)源性exosome蛋白濃度[(1.92±0.10)μg/μL]顯著高于外周淋巴結(jié)源性exosome[(1.57±0.06)μg/μL,P0.05],SDS-PAGE顯示兩種組織源性exosome所含蛋白種類和數(shù)量有明顯差異,Western blot顯示腸系膜淋巴結(jié)固有exosome中IL-10的表達顯著高于外周淋巴結(jié)固有exosome,混合淋巴細胞培養(yǎng)結(jié)果顯示腸系膜淋巴結(jié)固有exosome和外周淋巴結(jié)固有exosome對T細胞的增殖均有促進作用(P0.05),外周淋巴結(jié)源性exosome的促增殖作用顯著大于腸系膜淋巴結(jié)源性exosome(P0.05)。結(jié)論腸系膜淋巴結(jié)、外周淋巴結(jié)均含有組織固有exosome,兩種組織來源exosome有蛋白濃度和蛋白種類的差異,且均能促進淋巴細胞增殖,促進程度有顯著差異。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院泌尿外科;第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院全軍燒傷研究所創(chuàng)傷燒傷與復(fù)合傷國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： exosome 淋巴結(jié) 超濾密度梯度離心 混合淋巴細胞培養(yǎng)
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30872580)~~
【分類號】：R363
【正文快照】： 淋巴結(jié)是人體的重要免疫器官,起著過濾淋巴液和進行免疫應(yīng)答的作用;其中,腸系膜淋巴結(jié)還參與了調(diào)節(jié)腸道對食物抗原和共生菌抗原無應(yīng)答的免疫調(diào)節(jié)作用[1]。因此,不同部位的淋巴結(jié)因其獨特的微環(huán)境而表現(xiàn)出不同的免疫功能和特點;與此同時,免疫器官也必須作為一個結(jié)構(gòu)完整的整體

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本文編號：922902