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小鼠誘導(dǎo)多能干細(xì)胞體外分化為心肌細(xì)胞的實驗研究

發(fā)布時間:2017-09-22 10:17

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【摘要】:觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和維生素C對小鼠誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)體外分化為心肌細(xì)胞的誘導(dǎo)作用。采用直接懸浮培養(yǎng)法使iPSCs形成擬胚體(embryoid bodies,EBs),分別以VEGF和維生素C作為誘導(dǎo)劑,自然分化作為陰性對照組,加入1%二甲亞砜誘導(dǎo)劑為陽性對照組。倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,記錄跳動的擬胚體出現(xiàn)的時間和數(shù)目,計算心肌細(xì)胞分化率,細(xì)胞免疫熒光檢測心肌特異性蛋白cTnT的表達,RT-PCR檢測心肌特異性基因β-MHC mRNA的表達。在LIF條件下,iPSCs在飼養(yǎng)層上成集落狀生長;未分化的iPSCs中Oct-4及AKP呈陽性表達;與自然分化組相比,二甲亞砜、VEGF和維生素C均能提高iPSCs的心肌細(xì)胞分化效率(P0.05);分化的心肌細(xì)胞可自發(fā)搏動,同時分化細(xì)胞中表達心肌特異性蛋白cTnT以及心肌特異性基因β-MHC。VEGF和維生素C可以促進iPSCs向心肌細(xì)胞分化。
【作者單位】: 南充市中心醫(yī)院心內(nèi)科;川北醫(yī)學(xué)院第二臨床醫(yī)學(xué)院;重慶市神經(jīng)病學(xué)重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子 維生素C 誘導(dǎo)分化 心肌細(xì)胞
【基金】:重慶市衛(wèi)生局醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)研究重點項目(批準(zhǔn)號:2009-1-51)資助的課題~~
【分類號】:R329
【正文快照】: 干細(xì)胞能分化為心肌細(xì)胞,但存在一些難解決的問題。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stemcells,MSCs)容易獲得、容易體外增殖擴增,但目前還沒有直接的證據(jù)顯示MSCs可以分化為具有完整功能的心肌細(xì)胞,僅僅是心肌樣細(xì)胞[1]。胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cells,ESCs)具有全能分化性

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本文編號:900245

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