本文關(guān)鍵詞：大蒜多糖抑制EB病毒早期抗原、衣殼抗原表達(dá)及核酸復(fù)制的體外研究

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【摘要】：目的:探討大蒜多糖(Garlic polysaccharide,GPs)對EB病毒早期抗原(Early antigen,EA)和衣殼抗原(Capsid antigen,VCA)表達(dá)以及核酸復(fù)制的體外作用。方法:采用CCK-8法分別檢測GPs作用于Raji細(xì)胞和B95-8細(xì)胞的安全藥物濃度。通過丁酸鈉(Na B,4.0 m M/m L)和巴豆油(CTO,500ng/ml)聯(lián)合誘導(dǎo)Raji細(xì)胞表達(dá)EB病毒EA和B95-8細(xì)胞表達(dá)VCA抗原,采用間接免疫熒光(IIF)法觀察GPs對EA和VCA表達(dá)的影響;熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR(q RT-PCR)檢測GPs對EB病毒裂解期關(guān)鍵誘導(dǎo)因子BZLF1表達(dá)的影響;同時應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測Raji細(xì)胞凋亡情況,以驗證該濃度的GPs對細(xì)胞為安全濃度。Raji細(xì)胞為EB病毒I期潛伏感染,Na B/CTO可誘導(dǎo)EB病毒進(jìn)入裂解期復(fù)制,使用EB病毒核酸定量PCR試劑盒檢測GPs對EB病毒核酸復(fù)制的影響,并用q RT-PCR觀察其對核抗原1(EBNA-1)表達(dá)的影響。結(jié)果:1、CCK-8法檢測結(jié)果顯示:≤2.00mg/ml的GPs為Raji和B95-8細(xì)胞的安全濃度,且24,48和72h的安全濃度是一致的(P0.05)。2、在誘導(dǎo)EA表達(dá)的Raji細(xì)胞中,與陽性對照組相比,加入1mg/ml GPs組的EA抗原表達(dá)的抑制率為12.55%,2mg/ml時為62.70%,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3、在誘導(dǎo)VCA表達(dá)的B95-8細(xì)胞中,與陽性對照組相比,加入1mg/ml GPs組的VCA抗原表達(dá)的抑制率為43.86%,2mg/ml時為66.92%,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4、在誘導(dǎo)EA表達(dá)的Raji細(xì)胞中檢測BZLF1 m RNA發(fā)現(xiàn):1.00和2.00mg/ml的GPs對BZLF1表達(dá)的抑制率分別為4.86%(P0.05)和19.44%(P0.05)。5、流式細(xì)胞術(shù)證實1.00和2.00mg/ml的GPs均不引起Raji細(xì)胞凋亡率增加,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),表明GPs確實對EB病毒EA和VCA的表達(dá)具有顯著的抑制作用。6、EB病毒核酸檢測發(fā)現(xiàn):GPs對潛伏期和裂解期的核酸抑制率分別為60.27%和39.06%,對EBNA-1 m RNA的抑制率分別為38.7%和36.4%均具有顯著差異(P0.05)。表明GPs對EB病毒核酸復(fù)制也有明顯的抑制作用。結(jié)論:1、在Raji和B95-8細(xì)胞中,采用CCK-8法測定GPs的安全藥物濃度均為≤2.00mg/ml。2、GPs對EB病毒早期抗原、衣殼抗原的表達(dá)以及核酸復(fù)制均具有顯著的抑制作用,并表現(xiàn)為一定的劑量依賴性。
【關(guān)鍵詞】：大蒜多糖 EB病毒 早期抗原 衣殼抗原 EB病毒核抗原-1
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R373
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 主要縮略語英文索引10-11
• 第1章 前言11-15
• 第2章 實驗材料15-17
• 2.1 細(xì)胞株與藥物15
• 2.2 主要實驗試劑15-16
• 2.3 主要儀器與器材16-17
• 第3章 實驗方法17-25
• 第4章 實驗結(jié)果25-37
• 第5章 討論37-41
• 第6章 結(jié)論41-43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 文獻(xiàn)綜述 體外抑制 EB 病毒藥物的應(yīng)用研究47-57
• 參考文獻(xiàn)53-57
• 碩士期間發(fā)表的論文57-59
• 致謝59

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本文編號：891648