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BCG對(duì)小鼠RAW264.7巨噬細(xì)胞miR-203、miR-142-3p、miR-21表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-09-21 01:31

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【摘要】:目的:檢測(cè)卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin,BCG)刺激巨噬細(xì)胞后miR-203、miR-142-3p、miR-21表達(dá)量的變化,為研究microRNA(miRNA)在巨噬細(xì)胞抗結(jié)核分枝桿菌免疫應(yīng)答中的調(diào)控作用提供依據(jù)。方法:利用濃度為1.0×107ml-1的BCG刺激培養(yǎng)的小鼠RAW264.7細(xì)胞,分別在4、8、12、24小時(shí)提取細(xì)胞small RNA,并利用相應(yīng)的莖環(huán)反轉(zhuǎn)錄引物,反轉(zhuǎn)錄成cDNA,同時(shí)構(gòu)建成熟miR-203、miR-142-3p、miR-21的T載體,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,利用Real-Time PCR檢測(cè)miR-203、miR-142-3p、miR-21的表達(dá)量。結(jié)果:BCG作用RAW264.7細(xì)胞4、8、12、24小時(shí)后,miR-21表達(dá)顯著性上調(diào)(10倍以上,P0.05),miR-142-3p表達(dá)顯著性下調(diào)(20倍以上,P0.05),miR-203在4、8、12小時(shí)表達(dá)下調(diào)(3倍以上,P0.05),24小時(shí)后表達(dá)上調(diào)(2倍以上,P0.05)。結(jié)論:BCG刺激RAW264.7巨噬細(xì)胞后,miR-203、miR-142-3p、miR-21的表達(dá)發(fā)生顯著性變化,說(shuō)明這些miRNA可能通過(guò)調(diào)控免疫相關(guān)基因在巨噬細(xì)胞抗結(jié)核分枝桿菌的免疫應(yīng)答中發(fā)揮著重要的作用。
【作者單位】: 寧夏醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)學(xué)院;寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心;
【關(guān)鍵詞】miRNA BCG real-time PCR
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.31160494,30960275) 教育部“新世紀(jì)優(yōu)秀人才支持計(jì)劃”項(xiàng)目(No.NCET 11-11023) 中國(guó)博士后基金項(xiàng)目(No.20110491554) 寧夏醫(yī)科大學(xué)“博士學(xué)位建設(shè)學(xué)科”開(kāi)放課題(No.KF2010-41)
【分類號(hào)】:R392.1
【正文快照】: microRNA是一種約21~25核苷酸長(zhǎng)度的單鏈小分子RNA。它廣泛存在于真核生物中,是一組不編碼蛋白質(zhì)的短序列RNA,成熟的miRNA通過(guò)和其靶基因3'非翻譯區(qū)結(jié)合,形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體(RNA-induced silencing complex,RISC),特異性降解其靶mRNA或阻礙其靶mRNA的翻譯[1,2]。當(dāng)機(jī)體

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 趙婧;徐廣賢;賈偉;董輝;張一琳;趙志軍;魏軍;;pri-miR-21重組腺病毒載體構(gòu)建及其對(duì)TLR4基因調(diào)控的研究[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2012年02期

2 竇立萍;李永輝;徐誠(chéng)望;王莉莉;于力;;miR-142-3p靶向調(diào)控mll-af4融合基因的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2010年06期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 齊杰玉;陶];王燦蔚;李秋紅;鄧一平;;Pre-miR-10a重組腺病毒載體對(duì)K562細(xì)胞增殖的抑制作用[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2012年10期

2 張一琳;湯建中;劉宏鵬;張兆波;徐文錦;魏軍;徐廣賢;;抑制miR-21表達(dá)的腺病毒載體構(gòu)建、病毒包裝及其對(duì)HepG2細(xì)胞的作用[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2012年12期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 涂軼;梅金紅;;乳腺癌相關(guān)microRNA研究進(jìn)展[J];實(shí)用臨床醫(yī)學(xué);2010年11期

2 胡曉娟;聶紅;;MicroRNA在免疫系統(tǒng)中的作用[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2011年08期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄭玉姝;趙樸;趙宏坤;;microRNA及其在癌癥和病毒感染治療中的應(yīng)用潛力[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(藥學(xué)分冊(cè));2006年06期

2 房寶英;何冬梅;張洹;;發(fā)現(xiàn)miRNA及其靶基因的研究方法[J];山東醫(yī)藥;2007年32期

3 楊艷紅;張平;白文濤;尹國(guó)武;王s,

本文編號(hào):891610


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