本文關(guān)鍵詞：家蠅Ⅲ齡幼蟲消化系統(tǒng)內(nèi)源性β-葡萄糖苷酶的組織定位和表達(dá)差異研究

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【摘要】：目的以家蠅Ⅲ齡幼蟲為研究對象,探討家蠅(Musca domestica)消化系統(tǒng)內(nèi)源性β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase,BG)的組織分布、表達(dá)差異和器官功能定位。方法用原位雜交鑒定家蠅β-葡萄糖苷酶mRNA的組織定位。免疫組織化學(xué)法鑒定纖維素酶的組織定位。分離家蠅Ⅲ齡幼蟲消化系統(tǒng)組織,用3,5-二硝基水楊酸(DNS)法測定β-葡萄糖苷酶的活性,實時熒光定量PCR法檢測家蠅β-葡萄糖苷酶mRNA在消化系統(tǒng)各器官中的表達(dá)差異。結(jié)果原位雜交顯示,中腸、前腸和唾液腺上皮細(xì)胞是家蠅β-葡萄糖苷酶mRNA表達(dá)的部位。免疫組織化學(xué)染色顯示,唾液腺、前腸和中腸上皮細(xì)胞是家蠅幼蟲產(chǎn)生和分泌纖維素酶的主要部位。DNS法測定結(jié)果顯示,家蠅幼蟲唾液腺、前腸、中腸和后腸的β-葡萄糖苷酶活性分別為(0.80±0.06)、(0.38±0.02)、(1.20±0.05)和(0.26±0.02)IU/mg,各部位間酶活性差異有統(tǒng)計意義(P0.05);中腸的酶活性較高,占總酶活性的(45.45±1.27)%,后腸的酶活性最低,為(9.85±0.88)%。實時熒光定量PCR顯示,家蠅β-葡萄糖苷酶mRNA只在前腸、中腸和唾液腺中表達(dá),中腸的表達(dá)量約為前腸的5倍,唾液腺的表達(dá)量約為前腸的3倍,3者表達(dá)量差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),而后腸未見該基因的表達(dá)。結(jié)論家蠅Ⅲ齡幼蟲前腸、中腸和唾液腺均能分泌內(nèi)源性β-葡萄糖苷酶,唾液腺和中腸為主要分泌器官。
【作者單位】： 貴陽醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： β-葡萄糖苷酶 消化系統(tǒng) 家蠅
【基金】：國家科技支撐計劃項目(No.2011BAC06B12) 國家自然科學(xué)基金(No.30960343) 國家教育部博士點(diǎn)專項基金(No.2008-220) 教育部高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項科研基金新教師類課題(No.20105215120001) 貴州省教育廳培育項目(No.2009-0137)~~
【分類號】：R384
【正文快照】： 植物纖維素是動物重要的非淀粉多糖營養(yǎng)成分,動物主要靠內(nèi)源性和外源性纖維素酶消化利用。其中β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase,BG,EC 3.2.1.21)是纖維素酶復(fù)合酶系的主要成分之一,能將纖維二糖、纖維寡糖等水解為葡萄糖,在昆蟲消化纖維素的過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用[1,2]。為了深

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本文編號：888704