本文關(guān)鍵詞：諾如病毒病毒樣顆粒的表達(dá)及其與Caco-2細(xì)胞的結(jié)合活性研究

  更多相關(guān)文章： 諾如病毒 桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng) 病毒樣顆粒 Caco-細(xì)胞

【摘要】：目的在桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)轉(zhuǎn)染的昆蟲SF-9細(xì)胞中表達(dá)諾如病毒(Noroviruses,NoV)的衣殼蛋白VP1,并驗(yàn)證其與Caco-2細(xì)胞的結(jié)合活性。方法利用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)轉(zhuǎn)染的昆蟲SF-9細(xì)胞進(jìn)行諾如病毒VP1蛋白表達(dá),用蔗糖密度梯度超速離心方法純化,采用Western blot鑒定表達(dá)產(chǎn)物,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測NoV病毒樣顆粒(Virus-like particles,VLPs)與Caco-2細(xì)胞的結(jié)合活性。結(jié)果重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)蔗糖密度梯度超速離心后進(jìn)行SDS-PAGE,在分子質(zhì)量單位55~70ku之間有3條蛋白帶,與預(yù)期重組蛋白NoV-VLPs大小相符;Western blot分析各蛋白組分均能被兔抗NoV多抗血清識別;流式細(xì)胞儀分析顯示,加入重組蛋白NoV-VLPs后熒光信號較陰性對照組顯著增強(qiáng),表明表達(dá)的重組蛋白NoV-VLPs能夠與Caco-2結(jié)合,且3個(gè)組分的結(jié)合能力不同(P0.05),以組分5與Caco-2細(xì)胞結(jié)合的能力最強(qiáng)(P0.05)。結(jié)論 NoV-VLPs表達(dá)成功,并證明NoV-VLPs具有與Caco-2細(xì)胞結(jié)合活性,為NoV疫苗的開發(fā)和防治藥物的研制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 諾如病毒 桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng) 病毒樣顆粒 Caco-細(xì)胞
【基金】：教育部留學(xué)回國人員科研啟動(dòng)基金資助項(xiàng)目 天津市衛(wèi)生局科技基金資助項(xiàng)目(No.2012KZ076)
【分類號】：R392
【正文快照】： 20世紀(jì)70年代以來超過20種微生物被認(rèn)為是急性胃腸炎病原體,人類諾如病毒(Noroviruses,NoV)是其中主要病原體之一[1~3]。NoV是全球范圍內(nèi)95%以上成人病毒性胃腸炎和嬰幼兒散發(fā)性胃腸炎常見病原體[4],發(fā)展中國家兒童因NoV感染年死亡數(shù)為20萬人[5]。NoV亦是天津市秋冬季嬰幼兒

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 歐陽雅博;馬慧;金敏;陳照立;王新為;王景峰;諶志強(qiáng);邱志剛;彭林;李君文;;天津市嬰幼兒病毒性腹瀉諾如病毒檢測[J];中國公共衛(wèi)生;2010年06期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 沈震;王剛;宰淑蓓;胡蕓文;袁正宏;張軍;;諾如病毒新型GII.4流行株Sydney_2012在上海地區(qū)的檢出和鑒定[J];病毒學(xué)報(bào);2013年06期

2 王詒魏;;嬰幼兒諾如病毒性腹瀉36例臨床觀察[J];海南醫(yī)學(xué);2011年17期

3 夏體嬌;金敏;陳照立;王景峰;諶志強(qiáng);邱志剛;李君文;;熒光定量RT-PCR檢測諾如病毒基因Ⅱ型方法的建立和評估[J];解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2013年03期

4 冀新鳳;羅燦;胡婷婷;羅敏紅;李美青;劉穎;陳清;俞守義;;廣州流動(dòng)兒童病毒性腹瀉監(jiān)測[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2012年04期

5 李學(xué)軍;陳茜;任建莎;宋迎都;顧清;;病毒性腹瀉的流行病學(xué)研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2013年12期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 戴迎春;基于P顆粒的諾如病毒GII.4型流行株進(jìn)化機(jī)制及免疫保護(hù)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 夏體嬌;諾如病毒熒光定量檢測方法的建立及氯滅活諾如病毒消毒規(guī)律研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2012年

2 冀新鳳;2010-2011年廣州市白云區(qū)某社區(qū)流動(dòng)人口病毒性腹瀉的監(jiān)測[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

3 王云蕓;抗諾如病毒雞卵黃抗體的制備及其初步應(yīng)用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 方肇寅;謝華萍;呂紅霞;劉娜;章青;段招軍;Duncan Steele;Baoming Jiang;Xi Jiang;;1999~2005年我國嬰幼兒人杯狀病毒腹瀉研究[J];病毒學(xué)報(bào);2007年01期

2 滕崢;張曦;翁康生;邵俊杰;趙百慧;;2006年上海監(jiān)測點(diǎn)嬰幼兒腹瀉標(biāo)本中諾如病毒基因分析[J];上海預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2007年10期

3 戴迎春;劉翼;詹惠春;聶軍;李建棟;陳清;俞守義;;廣州市兒童秋冬季諾如病毒感染檢測分析[J];中國公共衛(wèi)生;2009年01期

4 高建民,王滔,陳軍林,陳駿揚(yáng),林瑜,蔡忠欽;福州市嬰幼兒腹瀉三種病毒感染狀況調(diào)查[J];中華流行病學(xué)雜志;2004年05期

5 司紅麗;王健偉;王建華;屈建國;洪濤;;濟(jì)南地區(qū)嬰幼兒腹瀉病杯狀病毒的流行特征[J];中國病原生物學(xué)雜志;2006年02期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄒小輝;董流昕;宋敬東;屈建國;于修平;魯茁壯;洪濤;;人細(xì)小病毒B19病毒樣顆粒的制備[J];生物工程學(xué)報(bào);2009年04期

2 高嘯;潘玉竹;陳中偉;邢麗;劉坤;王文娟;楊鵬輝;王希良;;甲型H1N1流感病毒樣顆粒疫苗的初步研究[J];免疫學(xué)雜志;2011年06期

3 郭麗;王健偉;洪濤;;諾如病毒分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J];傳染病信息;2009年03期

4 張艷;劉春燕;宋淑霞;;病毒樣顆粒疫苗的研究進(jìn)展[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2008年11期

5 張緒富;戴迎春;夏仁飛;周迎春;呂志平;;GⅡ-4型諾如病毒體外結(jié)合唾液HBGAs受體的檢測與分析[J];中國人獸共患病學(xué)報(bào);2009年06期

6 張錦生;通過對黑猩猩重復(fù)接種和交叉攻擊的研究證實(shí)兩種不同類型的非甲非乙型肝炎[J];國際流行病學(xué)傳染病學(xué)雜志;1982年02期

7 王淼,陳蓮鳳,韓曄華,鄒宇宏,霍淑敏,司靜懿,宋國興;重組人乳頭瘤病毒6型病毒樣顆粒的免疫原性分析[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2003年02期

8 楊靖佳;井申榮;曾韋錕;;病毒樣顆粒在疫苗研究中的進(jìn)展[J];云南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2009年S1期

9 郭麗;周紅莉;江濤;王敏;計(jì)融;王健偉;洪濤;;諾如病毒衣殼蛋白單克隆抗體的制備及鑒定[J];中國人獸共患病學(xué)報(bào);2006年05期

10 田甜;董英;薛強(qiáng);鄒明強(qiáng);王偉;;諾如病毒RT-PCR-反向斑點(diǎn)雜交檢測方法的建立[J];生物技術(shù)通報(bào);2010年03期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳霄;周子華;廖玉華;王敏;;乙肝核心病毒樣顆粒的克隆、改建、表達(dá)和純化[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第11次心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

2 戚宇華;崔侖標(biāo);史智揚(yáng);葛以躍;李顯;單軍;陸祖宏;;H5N1禽流感病毒樣顆粒的制備與應(yīng)用[A];第十一次中國生物物理學(xué)術(shù)大會(huì)暨第九屆全國會(huì)員代表大會(huì)摘要集[C];2009年

3 魏葆s，

本文編號：888615