本文關(guān)鍵詞：去泛素化酶USP2a調(diào)控活化STAT1的泛素化及其抗病毒功能的機(jī)制研究

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【摘要】：IFN家族是調(diào)節(jié)先天免疫以及機(jī)體抵抗病毒感染的最重要的細(xì)胞因子。IFN家族包括三大類:I型、II型和III型。它們主要是通過激活一系列信號分子來發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng),其中包括Janus激酶、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活子(STAT)。STAT家族包括七個(gè)成員,其中STAT1參與所有三類IFN信號的調(diào)控。STAT1活化后形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合物,進(jìn)入核內(nèi),結(jié)合到干擾素刺激基因(ISG)的啟動子元件ISRE上,從而誘導(dǎo)一系列ISGs的表達(dá)。STAT1活化主要是依賴其蛋白上701位酪氨酸位點(diǎn)磷酸化(pY701-STAT1)。維持細(xì)胞核內(nèi)有效的pY701-STAT1水平能夠維持IFN信號和抗病毒功能。目前關(guān)于STAT1蛋白的研究主要集中在總STAT1上�？係TAT1不同的轉(zhuǎn)錄后修飾,比如:甲基化、乙�；�、SUMO化和泛素化,都參與STAT1信號的調(diào)控。但是,詳細(xì)的機(jī)制研究仍然很貧乏。而關(guān)于泛素修飾方面,細(xì)胞因子如何誘導(dǎo)STAT1泛素化,以及STAT1泛素化在調(diào)控細(xì)胞信號中發(fā)揮怎樣的作用尚未知。細(xì)胞因子比如IFN,短時(shí)間刺激細(xì)胞數(shù)小時(shí),總STAT1蛋白仍相對比較穩(wěn)定。由此可見,在IFN活化信號的早期,總STAT1的泛素化和蛋白水平的變化對于IFN的早期信號影響并不大。如前所述,pY701-STAT1傳遞了IFN信號入核,是IFN信號的核心和關(guān)鍵。因此,闡明活化的pY701-STAT1蛋白水平在細(xì)胞核內(nèi)是如何被調(diào)節(jié)顯得尤為重要。我們通過研究發(fā)現(xiàn)pY701-STAT1是IFN誘導(dǎo)的STAT1泛素化的主要形式,pY701-STAT1能夠通過泛素蛋白酶體系統(tǒng)被降解;并且,我們發(fā)現(xiàn)泛素化的pY701-STAT1主要集中在細(xì)胞核內(nèi),抑制pY701-STAT1的入核能有效的阻止pY701-STAT1的泛素化和蛋白降解。進(jìn)一步,我們發(fā)現(xiàn)去泛素化酶USP2a在IFNα刺激下能夠入核,并結(jié)合到pY701-STAT1上。我們發(fā)現(xiàn)USP2a能抑制pY701-STAT1的K48位泛素化修飾和蛋白降解。更重要的是,USP2a穩(wěn)定了IFN誘導(dǎo)的pY701-STAT1水平,增強(qiáng)了三類IFN介導(dǎo)的信號和抗病毒功能。本研究首次鑒定了能夠靶向活化的STAT1(pY701-STAT1)的一個(gè)去泛素化酶。這一發(fā)現(xiàn)揭示了IFN抗病毒信號和功能的一個(gè)新的調(diào)控機(jī)制,并有望為提高IFN抗病毒治療提供潛在的靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：IFN pY701-STAT1 抗病毒 USP2a 泛素化
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R392
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 前言10-15
• 材料與方法15-23
• 一、實(shí)驗(yàn)材料15-17
• 二、實(shí)驗(yàn)方法17-23
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-72
• 第一部分 IFN誘導(dǎo)pY701-STAT1泛素化和降解23-34
• 1.1 IFN誘導(dǎo)的pY701-STAT1泛素化是STAT1泛素化的主要形式23-25
• 1.2 IFN誘導(dǎo)的pY701-STAT1發(fā)生K48-linked和K63-linked泛素化修飾25-26
• 1.3 蛋白酶體抑制劑抑制了pY701-STAT1的降解26-28
• 1.4 抑制去磷酸化作用不能顯著阻止pY701-STAT1的下調(diào)28-31
• 1.5 抑制蛋白酶體通路顯著阻止了pY701-STAT1的下調(diào)31-33
• 總結(jié)33-34
• 第二部分 泛素蛋白酶體系統(tǒng)在細(xì)胞核內(nèi)調(diào)控pY701-STAT134-40
• 2.1 pY701-STAT1的泛素化主要存在細(xì)胞核中34-35
• 2.2 阻止pY701-STAT1入核能夠抑制其泛素化35
• 2.3 泛素蛋白酶體系統(tǒng)在核內(nèi)調(diào)控pY701-STAT1蛋白水平35-39
• 總結(jié)39-40
• 第三部分 USP2a調(diào)控活化STAT1的泛素化，，穩(wěn)定pY701-STAT1蛋白水平40-57
• 3.1 鑒定調(diào)控pY701-STAT1的去泛素化酶USP2a40-45
• 3.2 IFN誘導(dǎo)USP2a入核，促進(jìn)USP2a結(jié)合到pY701-STAT145-49
• 3.3 USP2a抑制IFN誘導(dǎo)的總STAT1泛素化49-50
• 3.4 USP2a抑制IFN誘導(dǎo)pY701-STAT1的泛素化50
• 3.5 USP2a抑制IFN誘導(dǎo)pY701-STAT1的K48泛素化50-52
• 3.6 USP2a穩(wěn)定了細(xì)胞內(nèi)pY701-STAT1的水平52-56
• 總結(jié)56-57
• 第四部分 USP2a增強(qiáng)I型IFN的抗病毒功能57-63
• 4.1 USP2a增強(qiáng)IFNα 誘導(dǎo)的ISRE-Luciferase活性57-58
• 4.2 USP2a增加IFNα 誘導(dǎo)的ISG-mRNA水平58-59
• 4.3 USP2a增加IFNα 誘導(dǎo)的ISG蛋白水平59-60
• 4.4 USP2a增強(qiáng)IFNα 的抗病毒功能60-62
• 總結(jié)62-63
• 第五部分 USP2a增強(qiáng)II型和III型IFN信號和抗病毒功能63-72
• 5.1 USP2a上調(diào)IFNγ 和IFNλ 誘導(dǎo)的pY701-STAT1蛋白水平63-64
• 5.2 USP2a增強(qiáng)IFNγ 誘導(dǎo)的GAS-Luciferase和IFNλ 誘導(dǎo)的ISRE-Luciferase活性64-65
• 5.3 USP2a增加IFNγ 誘導(dǎo)的ISG-mRNA水平65
• 5.4 USP2a增加IFNλ 誘導(dǎo)的ISG-mRNA水平65-66
• 5.5 USP2a增強(qiáng)IFNγ 和IFNλ 的抗病毒功能66-68
• 5.6 USP2a增強(qiáng)VSV病毒誘導(dǎo)的pY701-STAT1蛋白水平68-69
• 5.7 USP2a增強(qiáng)多種細(xì)胞的抗病毒功能69-70
• 總結(jié)70-72
• 討論72-74
• 參考文獻(xiàn)74-79
• 綜述 去泛素化酶家族在抗病毒天然免疫中的作用79-94
• 參考文獻(xiàn)86-94
• 碩士期間完成的論文94-95
• 致謝95-96

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2 王素霞;劉媛;吳慧娟;張志剛;;去泛素化酶的研究及其進(jìn)展[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2008年06期

3 吳怡;劉新;;蛋白質(zhì)泛素化、去泛素化與腫瘤發(fā)生的關(guān)系[J];沈陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2008年01期

4 茅幸;張志剛;吳慧娟;;泛素特異性加工酶2的研究進(jìn)展[J];國際病理科學(xué)與臨床雜志;2012年05期

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本文編號：883408