本文關(guān)鍵詞：Wnt3a對(duì)小鼠破骨細(xì)胞分化調(diào)控的影響

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【摘要】：目的探討Wnt3a對(duì)小鼠破骨細(xì)胞分化調(diào)控的影響。方法將細(xì)胞分為4組:陰性對(duì)照組(即空白組)、實(shí)驗(yàn)對(duì)照組(感染Ad-GFP組)、陽性對(duì)照組(50 ng/ml RANKL誘導(dǎo)組)、實(shí)驗(yàn)組(感染Ad-Wnt3a組)。分別給予處理因素后常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)6 d,通過酒石酸抗酸性磷酸酶(TRAP)染色觀察破骨細(xì)胞的分化成熟情況;Western blot檢測(cè)TRAP、Cathep-sin K蛋白的表達(dá);分別于處理因素后3、6、9 d提取細(xì)胞總RNA,熒光定量Real time(RT-PCR)檢測(cè)核因子κB受體(RANK)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、組織蛋白酶K(Cathepsin K)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)基因的表達(dá)。結(jié)果TRAP染色顯示50 ng/mL RANKL誘導(dǎo)組能成功誘導(dǎo)RAW 264.7成多核(核≥10),空白組和Ad-GFP組有少量多核細(xì)胞(3≤核≤5),Ad-Wnt3a組為單核有個(gè)別雙核;Western blot檢測(cè)顯示Ad-Wnt3a組TRAP、Cathepsin K蛋白表達(dá)降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);RT-PCR檢測(cè)Ad-Wnt3a組能下調(diào)RANK、TRAP、Cathepsin K、MMP-9基因的表達(dá)。結(jié)論Wnt3a能抑制RAW264.7分化成成熟的破骨細(xì)胞。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)分子醫(yī)學(xué)與腫瘤研究中心;重慶醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;重慶醫(yī)科大學(xué)病理生理學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： Wnta RAW. RANKL TRAP
【基金】：重慶市自然科學(xué)基金(CSTC2010BB5100)~~
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 骨的發(fā)育處于不斷的成骨和破骨的動(dòng)態(tài)平衡之中。破骨細(xì)胞分化的激活和功能亢進(jìn)是導(dǎo)致吸收性骨病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[1]。研究破骨細(xì)胞分化的調(diào)節(jié),阻斷破骨前體細(xì)胞分化為破骨細(xì)胞的信號(hào)通路可能是一種有效防止骨吸收的治療策略。Wnt信號(hào)途徑在骨的代謝中具有非常重要的作用。在人類和

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