本文關(guān)鍵詞：EB病毒BALF4基因在大腸桿菌中的表達純化與鑒定

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【摘要】：目的采用大腸桿菌表達EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)殼抗原BALF4(S)重組蛋白并探討其在鼻咽癌血清學(xué)診斷中的應(yīng)用。方法以EBV DNA為模版,采用PCR法擴增目的基因片段BALF4(S),與原核表達載體PGEX-5X-1連接,構(gòu)建PGEX-5X-BALF4(S)工程菌株,在大腸桿菌BL21(DE3)中表達GST/BALF4(S)重組融合蛋白。表達產(chǎn)物經(jīng)SDS-PAGE、免疫印跡法鑒定后,純化目的蛋白作為包被抗原,制備ELISA試劑檢測鼻咽癌患者和正常人群BALF4(S)-IgA抗體。結(jié)果在大腸桿菌中成功地表達了GST/BALF4(S)重組融合蛋白,相對分子質(zhì)量為63000,免疫印跡證實目的帶有免疫原性,目的蛋白經(jīng)純化后作為包被抗原檢測鼻咽癌患者和健康對照者的靈敏度和特異度分別為78%和90%。結(jié)論本文采用大腸桿菌系統(tǒng)成功表達了GST/BALF4(S)重組融合蛋白,對重組抗原在鼻咽癌血清篩選中的診斷價值進行了初步評估,獲得了在鼻咽癌篩選中有一定應(yīng)用價值的PGEX-5X-BALF4(S)工程菌株。
【作者單位】： 中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院檢驗科;中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院血液內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 鼻咽癌 BALF 蛋白表達
【分類號】：R378
【正文快照】： EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)為雙鏈DNA病毒,與單純皰疹病毒、巨細胞病毒等同屬人類皰疹病毒組,被列為可能致癌的人類腫瘤病毒之一。大量研究結(jié)果證實,EBV是鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的重要誘發(fā)因子,NPC的顯著特征是病人血清中的EBV抗體(尤其是IgA亞型)水平普

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 祝元雪;李曉江;;EB病毒Rta蛋白在鼻咽癌早期診斷中的研究進展[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2013年12期

2 Massimo De Paschale;Pierangelo Clerici;;Serological diagnosis of Epstein-Barr virus infection: Problems and solutions[J];World Journal of Virology;2012年01期

3 胡波;張新玲;周文營;李林;;EB病毒gp125蛋白的酵母表達及在鼻咽癌檢測中的應(yīng)用[J];中山大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)科學(xué)版);2014年05期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 秦雷;初治鼻咽癌患者檢測血清胸苷激酶-1的臨床意義[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2013年

2 嚴(yán)翠娥;鼻咽癌實驗室診斷指標(biāo)的相關(guān)性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 胡波;陳忠城;王東寧;李林;;EB病毒BALF4基因在大腸桿菌中的表達純化與鑒定[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2013年09期

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本文編號：858698