本文關(guān)鍵詞：肺表面活性蛋白A適配體的篩選與鑒定

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【摘要】：利用指數(shù)式富集的配基系統(tǒng)進(jìn)化(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技術(shù)篩選肺表面活性蛋白A(Pulmonary Surfactant Protein A,SP-A)的寡核苷酸適配體。通過(guò)對(duì)循環(huán)次數(shù)、退火溫度及引物比例的優(yōu)化,建立了適合的篩選體系;篩選產(chǎn)物經(jīng)克隆測(cè)序后,用DNAMAN軟件初步分析其結(jié)構(gòu)。最終確定以12個(gè)循環(huán),55℃為退火溫度及80∶1為引物比的反應(yīng)條件;經(jīng)過(guò)9輪循環(huán)篩選,隨機(jī)ssDNA庫(kù)與SP-A的結(jié)合率從1.3%上升到33%;AP-3和AP-2適配體的隨機(jī)區(qū)含有保守序列TAC-GT,AP-3和AP-1適配體的隨機(jī)區(qū)含有保守序列ACAG,且各適配體的二級(jí)結(jié)構(gòu)均以莖-環(huán)結(jié)構(gòu)為主。
【作者單位】： 天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院 教育部工業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 天津市工業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 肺表面活性蛋白A 指數(shù)式富集的配基系統(tǒng)進(jìn)化 寡核苷酸適配子
【基金】：天津市科委項(xiàng)目(No.12ZXCXSY07500) 天津市濱海新區(qū)科委項(xiàng)目(No.2012-XJR21047) 科技部項(xiàng)目(No.12C26211600515)資助
【分類號(hào)】：R341
【正文快照】： 1引言SP-A是一種多功能糖蛋白,在調(diào)節(jié)肺表面活性物質(zhì)(PS)代謝、基因表達(dá)、肺內(nèi)免疫及炎癥反應(yīng)方面具有重要作用[1~5]。SP-A主要在肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞中合成,在肺外表達(dá)量很少,在肺內(nèi)則為高濃度表達(dá),表現(xiàn)為肺特異性[6]。SP-A分子量為28~36kDa,等電點(diǎn)為4.65.5。在肺泡中,SP-A一般

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 肖燕,崔社懷;肺表面活性蛋白A在免疫炎癥反應(yīng)中的作用[J];免疫學(xué)雜志;2000年S1期

2 孟穎,趙舉,阮應(yīng)茆;外源性肺表面活性物質(zhì)對(duì)離體鼠肺缺血再灌注損傷的作用[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);2004年03期

3 詹林盛,孫紅琰,彭劍淳,邵寧生,王全立;丙型肝炎病毒核心蛋白寡核苷酸適配子的篩選與鑒定[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2002年05期

4 張城,盧曦;蛋白質(zhì)和抗體微陣列技術(shù)進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊(cè);2005年05期

5 蔡栩栩,杜悅,高紅,李書(shū)琴,李巖,孟菲;孕期被動(dòng)吸煙對(duì)新生大鼠肺SP-A和SP-B mRNAs表達(dá)影響的研究(英文)[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2004年11期

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本文編號(hào)：836489