本文關(guān)鍵詞：脂肪酸合成酶系多基因表達載體的構(gòu)建

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【摘要】：目的利用獨立表達盒法構(gòu)建脂肪酸去飽和酶基因和延長酶基因的四基因表達載體進一步研究多基因表達載體中各個基因表達的相互影響。方法利用基因工程的方法擴增2個脂肪酸去飽和酶基因和2個延長酶基因,然后連接到pcDNA3.1(-)哺乳動物表達載體上,之后轉(zhuǎn)化、篩選、酶切鑒定。最后脂質(zhì)體法瞬時轉(zhuǎn)染HK293T細胞,提取RNA檢測這四個基因的表達情況。結(jié)果成功構(gòu)建了含脂肪去飽和酶基因和延長酶基因的四基因表達載體pcDNA3.1-EF,并在HK293T細胞中成功表達。結(jié)論四基因表達載體pcDNA3.1-EF在HK293T細胞中成功表達,單個基因在表達載體中的次序?qū)虻谋磉_沒有明顯影響。
【作者單位】： 佳木斯大學;
【關(guān)鍵詞】： 多不飽和脂肪酸 多基因表達載體 脂肪酸去飽和酶 脂肪酸延長酶
【基金】：國家自然科學基金(No.310000984) 黑龍江省研究生創(chuàng)新基金(No.YJSCX2012-367HLJ) 黑龍江省教育廳科學技術(shù)研究項目(No.12511563)
【分類號】：R341
【正文快照】： 在多不飽和脂肪酸(PUFAs)合成過程中最重要的一類酶為脂肪酸去飽和酶,它們以其自身的酶活性特異地在碳鏈上的特定位置引入雙鍵,從而產(chǎn)生去飽和作用。其中,△6去飽和酶以18∶2n-6和18∶3n-3以及少量的16∶1n-7和18∶1n-9為反應(yīng)底物,是參與PUFAs生物合成的第一個限速酶;△5去飽

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