鮑曼不動(dòng)桿菌外膜蛋白OmpA的原核表達(dá)及保守性分析
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更多相關(guān)文章: 鮑曼不動(dòng)桿菌 原核表達(dá) OmpA 保守性分析 亞單位疫苗
【摘要】:目的:擴(kuò)增鮑曼不動(dòng)桿菌(Acinetobacter baumannii)外膜蛋白OmpA基因,表達(dá)純化該蛋白,為深入研究鮑曼不動(dòng)桿菌亞單位蛋白疫苗奠定理論基礎(chǔ)。方法:從ATCC19606提取OmpA基因,構(gòu)建pET28a(+)-OmpA表達(dá)載體,用BL21誘導(dǎo)表達(dá)并純化蛋白;選取20株臨床菌株,PCR技術(shù)擴(kuò)增OmpA基因,免疫印跡試驗(yàn)(Western blot)驗(yàn)證OmpA蛋白保守性。小鼠腹腔細(xì)菌攻毒后生存率觀察驗(yàn)證疫苗保護(hù)性。結(jié)果:成功構(gòu)建pET28a(+)-OmpA質(zhì)粒,表達(dá)并純化蛋白;20株鮑曼不動(dòng)桿菌均擴(kuò)增出OmpA基因;Western blot實(shí)驗(yàn)表明臨床菌株OmpA蛋白表達(dá)陽性。攻毒后,免疫小鼠較對(duì)照組生存率明顯增加。結(jié)論:OmpA基因和蛋白表達(dá)保守性高,具有免疫原性,是鮑曼不動(dòng)桿菌疫苗良好的抗原靶點(diǎn)。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】: 鮑曼不動(dòng)桿菌 原核表達(dá) OmpA 保守性分析 亞單位疫苗
【基金】:國家自然科學(xué)基金(No.81000711) 國家臨床重點(diǎn)?平ㄔO(shè)項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)財(cái)社[2010]305號(hào)資助
【分類號(hào)】:R378
【正文快照】: 鮑曼不動(dòng)桿菌(Acinetobacter baumannii,AB)為非發(fā)酵革蘭陰性桿菌,廣泛存在于自然界,屬于條件致病菌。該菌是唯一能在人類皮膚表面生存的革蘭陰性桿菌,對(duì)濕熱、紫外線、化學(xué)消毒劑和外界環(huán)境有較強(qiáng)抵抗力。它是院內(nèi)感染的重要病原菌之一,其耐藥率也呈逐年上升趨勢(shì)[1-3],甚至
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,本文編號(hào):821108
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