本文關(guān)鍵詞：抗豬PD-L1分子的單克隆抗體制備及免疫學(xué)特性分析

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【摘要】：為制備抗豬程序性死亡因子配體1(PD-L1)的單克隆抗體(MAb)并鑒定其免疫學(xué)特性,本研究將豬PD-L1基因的外膜區(qū)利用原核表達載體pET32a進行表達,以純化的表達蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常規(guī)淋巴細胞雜交瘤技術(shù)進行細胞融合,以表達PD-L1-Fc蛋白的293T細胞作為抗原,采用間接免疫熒光試驗篩選雜交瘤培養(yǎng)上清,獲得兩株穩(wěn)定分泌抗豬PD-L1 MAb的雜交瘤細胞系。MAb亞型鑒定均為IgG1型,輕鏈為κ鏈。Western blot試驗表明這兩株MAb均可以特異性識別PD-L1蛋白。流式細胞檢測結(jié)果顯示這兩株MAb可以識別表達于293T細胞膜表面的PD-L1分子,但不能阻斷PD-L1分子與其受體PD-1的結(jié)合。這兩株MAb的獲得為研究PD-1/PD-L1通路與豬的某些感染性疾病發(fā)展進程的關(guān)系提供了必要的檢測工具。
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術(shù)國家重點實驗室/豬傳染病研究室;西北農(nóng)林科技大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所豬傳染病研究室;
【關(guān)鍵詞】： PPD-L分子 PD-/PD-L通路 單克隆抗體
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31001050、30901080)
【分類號】：R392
【正文快照】： 程序性死亡因子配體1(PD-L1)是B7分子家族的一個新成員,為I型跨膜糖蛋白,由信號肽、外膜區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)4部分組成,表達于多種組織和細胞,其受體為CD28家族的程序性死亡因子1(PD-1分子)[1]。研究表明PD-1與PD-L1結(jié)合可以抑制T細胞和B細胞的激活,對免疫應(yīng)答起負調(diào)控作用[1]

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 彭金美;李登云;田志軍;安同慶;劉恒貴;周艷君;童光志;;豬PD-1分子及其配體的實時熒光定量RT-PCR檢測方法的建立[J];中國獸醫(yī)科學(xué);2010年04期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 代海麗;高鐵磊;朱琳;曹威;欒穎;靳占峰;;柯薩奇病毒B3的TaqMan實時熒光定量RT-PCR檢測方法的建立[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2012年01期

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 韋天超;田志軍;周艷君;安同慶;肖燕;彭金美;姜一峰;童光志;;豬IFN-γ mRNA Taq Man熒光定量RT-PCR檢測方法的建立[J];中國獸醫(yī)科學(xué);2009年02期

2 張賀楠;賴漢漳;齊巖;孔留五;張小桃;曹偉勝;廖明;;雞IFN-α和IFN-β及IFN-γ基因?qū)崟r熒光定量RT-PCR檢測方法的建立[J];中國獸醫(yī)科學(xué);2009年02期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張春艷,張志方,寧波,李樹濃,朱兆玲;抗人CD154單克隆抗體的構(gòu)建及免疫學(xué)特性分析[J];中國動脈硬化雜志;2001年05期

2 賴s，

本文編號：817651