發(fā)布時(shí)間：2017-09-09 02:05

  本文關(guān)鍵詞：抗豬PD-L1分子的單克隆抗體制備及免疫學(xué)特性分析

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【摘要】：為制備抗豬程序性死亡因子配體1(PD-L1)的單克隆抗體(MAb)并鑒定其免疫學(xué)特性,本研究將豬PD-L1基因的外膜區(qū)利用原核表達(dá)載體pET32a進(jìn)行表達(dá),以純化的表達(dá)蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常規(guī)淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞融合,以表達(dá)PD-L1-Fc蛋白的293T細(xì)胞作為抗原,采用間接免疫熒光試驗(yàn)篩選雜交瘤培養(yǎng)上清,獲得兩株穩(wěn)定分泌抗豬PD-L1 MAb的雜交瘤細(xì)胞系。MAb亞型鑒定均為IgG1型,輕鏈為κ鏈。Western blot試驗(yàn)表明這兩株MAb均可以特異性識(shí)別PD-L1蛋白。流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果顯示這兩株MAb可以識(shí)別表達(dá)于293T細(xì)胞膜表面的PD-L1分子,但不能阻斷PD-L1分子與其受體PD-1的結(jié)合。這兩株MAb的獲得為研究PD-1/PD-L1通路與豬的某些感染性疾病發(fā)展進(jìn)程的關(guān)系提供了必要的檢測(cè)工具。
【作者單位】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/豬傳染病研究室;西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所豬傳染病研究室;
【關(guān)鍵詞】： PPD-L分子 PD-/PD-L通路 單克隆抗體
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31001050、30901080)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 程序性死亡因子配體1(PD-L1)是B7分子家族的一個(gè)新成員,為I型跨膜糖蛋白,由信號(hào)肽、外膜區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)4部分組成,表達(dá)于多種組織和細(xì)胞,其受體為CD28家族的程序性死亡因子1(PD-1分子)[1]。研究表明PD-1與PD-L1結(jié)合可以抑制T細(xì)胞和B細(xì)胞的激活,對(duì)免疫應(yīng)答起負(fù)調(diào)控作用[1]

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 彭金美;李登云;田志軍;安同慶;劉恒貴;周艷君;童光志;;豬PD-1分子及其配體的實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國(guó)獸醫(yī)科學(xué);2010年04期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 代海麗;高鐵磊;朱琳;曹威;欒穎;靳占峰;;柯薩奇病毒B3的TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2012年01期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 韋天超;田志軍;周艷君;安同慶;肖燕;彭金美;姜一峰;童光志;;豬IFN-γ mRNA Taq Man熒光定量RT-PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國(guó)獸醫(yī)科學(xué);2009年02期

2 張賀楠;賴漢漳;齊巖;孔留五;張小桃;曹偉勝;廖明;;雞IFN-α和IFN-β及IFN-γ基因?qū)崟r(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國(guó)獸醫(yī)科學(xué);2009年02期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張春艷,張志方,寧波,李樹(shù)濃,朱兆玲;抗人CD154單克隆抗體的構(gòu)建及免疫學(xué)特性分析[J];中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志;2001年05期

2 賴s，

本文編號(hào)：817651