本文關(guān)鍵詞：Ⅲ型登革病毒D9964株在人胚肺二倍體細(xì)胞KMB17上適應(yīng)株選育純化及其增殖動(dòng)力學(xué)研究

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【摘要】：選育出Ⅲ型登革病毒中國(guó)株在人胚肺二倍體細(xì)胞KMB17上的適應(yīng)株并對(duì)其生物學(xué)特性和增殖動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究,為研究登革病毒減毒活疫苗奠定基礎(chǔ)。Ⅲ型登革病毒中國(guó)株D9964經(jīng)RT-PCR鑒定型別正確后,進(jìn)行毒種擴(kuò)增和滴度測(cè)定;以4.0MOI接種KMB17細(xì)胞,反復(fù)傳代直至病毒能在細(xì)胞中適應(yīng)和增殖;連續(xù)傳10代,選育出KMB17細(xì)胞適應(yīng)株,經(jīng)三輪噬斑純化篩選適應(yīng)株,微量滴定法檢測(cè)10代病毒培養(yǎng)液的感染性滴度;免疫熒光法檢測(cè)純化病毒株的抗原性;將病毒純化株接種KMB17細(xì)胞,取第3～7d細(xì)胞提取RNA,以Real-time PCR檢測(cè)病毒適應(yīng)株在細(xì)胞中的增殖動(dòng)態(tài)。結(jié)果顯示,經(jīng)適應(yīng)性培養(yǎng)后Ⅲ型登革病毒中國(guó)株D9964能在KMB17細(xì)胞中穩(wěn)定增殖,經(jīng)噬斑純化獲得了高純度的細(xì)胞適應(yīng)株,病毒保持了原始毒株良好的抗原性;增殖動(dòng)力學(xué)研究顯示第5～6d為病毒在細(xì)胞內(nèi)的增殖高峰期。
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院/北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【關(guān)鍵詞】： 登革病毒 人胚肺二倍體細(xì)胞 適應(yīng)性 增殖動(dòng)力學(xué)
【基金】：云南省科技廳社會(huì)發(fā)展科技計(jì)劃項(xiàng)目(2011CA016) 云南省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2012FB188,2009ZC187M) 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院病原生物學(xué)研究所中央級(jí)公益性科研院所科研業(yè)務(wù)費(fèi)項(xiàng)目(2009IPB102) 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所引進(jìn)人才項(xiàng)目(IMB2009RC01)
【分類號(hào)】：R373.9
【正文快照】： 登革病毒(Dngue virus,DEN)屬于黃病毒科黃病毒屬中的一個(gè)血清型亞群,主要通過(guò)埃及伊蚊和白紋伊蚊等媒介昆蟲傳播,引起登革熱(Dengue fe-ver,DF)以及發(fā)病率和死亡率很高的登革出血熱(Dengue hemorrhagic fever,DHF)和登革休克綜合征(Dengue shock syndrome,DSS)[1]。病毒在蚊

【相似文獻(xiàn)】

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