本文關鍵詞：不同棘球蚴抗原誘導樹突狀細胞表達吲哚胺2,3-雙加氧酶的實驗研究

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【摘要】：目的檢測不同的棘球蚴抗原體外誘導樹突狀細胞(DCs)表達吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)的情況。方法從C57BL/6小鼠股骨中分離出骨髓細胞,用小鼠重組巨噬細胞集落刺激因子(rmGM-CSF)誘導后,獲得小鼠骨髓源樹突狀細胞(BMDCs)。分別用重組抗原B(rAgB,15μg/ml)、小鼠細粒棘球蚴囊液(MHF,5 mg/ml)、γ干擾素(IFN-γ,1 000 U/ml,為陽性對照)和RPMI 1640完全培養(yǎng)液(陰性對照)刺激DCs,于18、24和48 h后收集細胞和細胞上清。采用流式細胞術檢測各組DCs的表面標志物CD40、CD80、CD86和I-A/I-E的陽性表達情況,并利用實時熒光定量PCR(FQ-RT-PCR)檢測各組的IDO mRNA相對轉錄水平。利用高效液相色譜法(HPLC)檢測各組細胞上清中的色氨酸(Try)濃度。結果流式細胞術檢測結果顯示,DCs受rAgB和MHF刺激后,其表面標志物CD40、CD80、CD86和I-A/I-E的陽性表達率均降低。刺激24 h后,rAgB組的CD40、CD86和I-A/I-E陽性表達率分別為(22.60±2.69)%、(35.50±4.38)%和(57.30±4.38)%,與MHF組[(38.00±3.54)%、(53.00±3.39)%和(77.10±1.70)%]和陰性對照[(37.95±3.61)%、(19.55±1.06)%和(85.45±1.63)%]的差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。FQ-RT-PCR結果顯示,刺激18、24和48 h后,rAgB組的IDO mRNA水平[(9.20±0.01)、(29.44±0.02)和(16.48±0.04)]和MHF組的[(9.67±0.02)、(17.52±0.01)和(16.81±0.01)]均高于陰性對照組[(2.46±0.01)、(7.77±0.01)和(10.56±0.01)](P0.01),rAgB組和MHF組IDO mRNA水平的差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。HPLC結果顯示,刺激18、24和48 h后,rAgB組DCs上清中的色氨酸濃度[(23.65±0.64)、(13.95±1.06)和(19.05±0.64)μmol/L]均較其他3組低,刺激24 h后的色氨酸濃度與陰性對照組(22.90±0.14)和MHF組(20.65±0.35)的差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論在體外實驗條件下,rAgB、MHF均可上調DCs表面IDO的表達,作用24 h后,rAgB上調IDO的能力強于MHF。
【作者單位】： 新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院 新疆重大疾病醫(yī)學重點實驗室-省部共建國家重點實驗室培育基地及新疆包蟲病基礎醫(yī)學重點實驗室;新疆醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院人體寄生蟲學教研室;新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院肝膽包蟲病外科;
【關鍵詞】： 細粒棘球蚴 抗原 樹突狀細胞 吲哚胺 -雙加氧酶 免疫逃避
【基金】：新疆維吾爾自治區(qū)自然科學基金(No.200821132) 國家自然科學基金(No.30800967)~~
【分類號】：R392
【正文快照】： 吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)是哺乳動物肝外組織中惟一催化色氨酸(Try)沿犬尿氨酸途經(jīng)分解代謝的限速酶[1],該酶參與腫瘤的免疫逃避、同種異體胎兒的排斥反應和抗病毒感染,因而被認為是免疫反應中的一個調節(jié)閥[2]。目前,在寄生蟲感染的相關研究中發(fā)現(xiàn),IDO與寄生蟲的免疫逃避有關[

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本文編號：801370