本文關(guān)鍵詞：艾灸頭部組穴對VD模型大鼠認知功能及神經(jīng)—血管共生影響的研究

  更多相關(guān)文章： 血管性癡呆 頭部組穴 認知功能 神經(jīng)新生 艾灸 實驗研究

【摘要】：目的:通過復(fù)制血管性癡呆動物模型,以艾灸模型大鼠“大椎”、“百會”、“神庭”穴,經(jīng)3個療程后,跳臺實驗測試學(xué)習(xí)記憶成績,結(jié)合神經(jīng)行為學(xué)評分,治療前后對照、組間對照,驗證灸法治療VD的效果,獲取艾灸療效的證據(jù)。通過艾灸治療VD大鼠并進行組間對照,經(jīng)3個療程后,腹腔注射Brd U液,Brd U免疫雙標(biāo)激光共聚焦追蹤NSCs的增殖、遷移、分化等過程的特異蛋白表達,獲取艾灸促進“神經(jīng)新生”證據(jù);同時Brd U/CD34雙表達檢測新生神經(jīng)元周圍血管密度,獲取艾灸促進神經(jīng)新生的同時也促進了“血管新生”。方法:實驗一:選用體重250~300g的清潔級成年雄性Wistar大鼠80只,經(jīng)跳臺實驗對其進行篩選,動物在造模前隨機分出8只作為假模型組(假手術(shù)組),其余經(jīng)篩選合格的大鼠采用四血管阻斷(4-vessle occlusion,4VO)法復(fù)來制血管性癡呆動物模型,并經(jīng)行為學(xué)記憶成績測試,結(jié)合神經(jīng)行為學(xué)評分,驗證造模成功。從造模成功的動物中隨機挑選出24只用作艾灸對VD模型大鼠認知功能影響的研究,然后將24只模型大鼠隨機分成艾灸組8只、西藥組8只、模型組8只,并與假模型組對照。艾灸組在動物造模后4天開始,艾灸VD大鼠的“大椎”、“百會”、“神庭”穴,每天1次,14次為一個療程,一個療程結(jié)束后休息7d,共治療3個療程;西藥組給予大鼠西藥(吡拉西坦溶液)灌胃,每天2次,療程同灸法組;模型組的治療時間也同灸法組,僅將大鼠作鼠板固定,卻不作任何相關(guān)處理;假模型組不作任何相關(guān)治療。各組大鼠經(jīng)3個療程后,跳臺實驗測試學(xué)習(xí)記憶成績,結(jié)合神經(jīng)行為學(xué)評分,組與組之間進行比較來驗證灸法的療效。實驗二:所造VD模型方法同實驗一,即從造模成功的動物中隨機挑選出18只大鼠用于艾灸對VD模型大鼠神經(jīng)-血管共生影響的研究,然后將大鼠按隨機數(shù)字法分為3組,艾灸組、西藥組、模型組,每組6只。治療方法同實驗一,各組大鼠于3個療程結(jié)束后24h處死,處死前12h內(nèi),每4h腹腔注射Brd U(50mg/kg)1次,共3次,進行Brd U標(biāo)記,動物于最后一次注射Brd U后4h,用6%水合氯醛(350mg/kg)腹腔深度麻醉,再用肝素化生理鹽水與多聚甲醛溶液行腦灌注取材(腦組織),制片、染色后激光共聚焦顯微鏡結(jié)合Brd U雙表達檢測NSCs增殖、分化以及神經(jīng)元成熟情況,同時Brd U雙表達檢測新生神經(jīng)元周圍血管密度,研究艾灸促進VD大鼠腦內(nèi)神經(jīng)新生作用,以及“神經(jīng)新生”與“血管新生”的依從關(guān)系。實驗一與實驗二中所有數(shù)據(jù)采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件進行處理,所得計量數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準差表示(sx±),取P0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.01為具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05為無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:(1)學(xué)習(xí)記憶成績及神經(jīng)行為學(xué)評分:模型組與假模型組相比,大鼠學(xué)習(xí)記憶成績的錯誤次數(shù)增加,潛伏期縮短,神經(jīng)行為學(xué)評分提高(P0.01),說明造模成功;各組大鼠經(jīng)1~2個療程治療后,西藥組、艾灸組與模型組比較,大鼠學(xué)習(xí)記憶成績的錯誤次數(shù)、潛伏期與神經(jīng)行為學(xué)評分均有顯著差異(P0.01)。艾灸組與西藥組比較各指標(biāo)差異暫無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);各組大鼠經(jīng)第3個療程治療結(jié)束后,西藥組、艾灸組與模型組相比,大鼠學(xué)習(xí)記憶成績的錯誤次數(shù)、潛伏期與神經(jīng)行為學(xué)評分均有顯著差異(P0.01)。與西藥組相比,艾灸組各指標(biāo)數(shù)值有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。這說明:艾灸、西藥在對VD模型大鼠的認知功能改善上均有顯著的作用,且艾灸的療效要優(yōu)于西藥治療。(2)VD大鼠缺血海馬區(qū)Brd U/Nestin、Brd U/Neu N雙染細胞計數(shù):西藥、艾灸組與模型組比較,Brd U/Nestin及Brd U/Neu N雙染陽性細胞的表達明顯增多(P0.01),在相同的治療時段內(nèi)艾灸組的Brd U/Nestin及Brd U/Neu N雙標(biāo)陽性細胞表達要優(yōu)于西藥組(P0.05)。這說明:經(jīng)3個療程治療結(jié)束后,艾灸、西藥治療VD模型大鼠中對其缺血海馬區(qū)神經(jīng)干細胞的增殖及分化均有很好的促進作用,且艾灸的療效比西藥療效突出。(3)VD大鼠缺血海馬區(qū)Brd U/CD34表達及微血管密度:與VD模型組相比,西藥、艾灸組的Brd U/CD34雙標(biāo)陽性表達及微血管密度MVD均增多(P0.05);與西藥組相比,艾灸組Brd U/CD34雙標(biāo)陽性表達及微血管密度MVD均增多(P0.05)。這說明:經(jīng)3個療程治療后,艾灸與西藥的方法均可以增加VD模型大鼠缺血海馬區(qū)微血管密度,從而促進血管新生,且艾灸療效要優(yōu)于西藥療效。結(jié)論:(1)艾灸可以改善VD大鼠的認知功能,降低神經(jīng)行為學(xué)評分,是治療VD的一種有效手段;(2)艾灸可以提高VD大鼠缺血海馬區(qū)Brd U/Nestin、Brd U/Neu N雙標(biāo)陽性細胞的表達,促進腦缺血后神經(jīng)干細胞的增殖與分化,有助于神經(jīng)功能的修復(fù)。(3)艾灸可以提高VD大鼠缺血海馬區(qū)Brd U/CD34雙標(biāo)陽性細胞的表達,增加微血管密度,促進血管新生。
【關(guān)鍵詞】：血管性癡呆 頭部組穴 認知功能 神經(jīng)新生 艾灸 實驗研究
【學(xué)位授予單位】：安徽中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R245;R-332
【目錄】：

• 中文摘要8-11
• 英文摘要11-15
• 縮略詞中英文對照簡表15-16
• 前言16-18
• 實驗研究18-31
• 實驗一 艾灸頭部組穴對VD模型大鼠認知功能影響的研究18-24
• 1 材料18
• 1.1 實驗動物18
• 1.2 主要試劑及器材18
• 2 實驗方法18-20
• 2.1 動物初篩與復(fù)篩18-19
• 2.2 VD大鼠模型建立與評測19
• 2.3 動物分組19
• 2.4 各組治療方法19-20
• 2.5 行為學(xué)記憶成績測試20
• 2.6 神經(jīng)行為學(xué)評分20
• 2.7 統(tǒng)計學(xué)處理20
• 3 結(jié)果20-24
• 3.1 模型評定的學(xué)習(xí)記憶成績及神經(jīng)行為學(xué)評分檢測20-21
• 3.2 治療1療程后各組大鼠學(xué)習(xí)記憶成績及神經(jīng)行為學(xué)評分檢測21-22
• 3.3 治療2療程后各組大鼠學(xué)習(xí)記憶成績及神經(jīng)行為學(xué)評分檢測22
• 3.4 治療3療程后各組大鼠學(xué)習(xí)記憶成績及神經(jīng)行為學(xué)評分檢測22-24
• 實驗二 艾灸頭部組穴對VD模型大鼠神經(jīng)-血管共生影響的研究24-31
• 1 材料24-25
• 1.1 實驗動物24
• 1.2 主要試劑及器材24-25
• 2 實驗方法25-27
• 2.1 動物造模25
• 2.2 動物分組25
• 2.3 各組治療方法25
• 2.4 Brd U標(biāo)記與腦組織取材25-26
• 2.5 制片26
• 2.6 免疫熒光染色26-27
• 2.7 圖像分析27
• 2.8 統(tǒng)計學(xué)處理27
• 3 結(jié)果27-31
• 3.1 艾灸對VD大鼠海馬區(qū)神經(jīng)干細胞增殖能力的影響27-28
• 3.2 艾灸對VD大鼠海馬區(qū)神經(jīng)干細胞分化能力的影響28-29
• 3.3 艾灸對VD大鼠海馬區(qū)新生神經(jīng)元周圍血管密度（MVD）的影響29-31
• 討論31-50
• 1 祖國醫(yī)學(xué)對血管性癡呆的認識31-35
• 1.1 病名與病位31
• 1.2 病因病機31-32
• 1.3 中醫(yī)治療32-35
• 2 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對血管性癡呆的認識35-37
• 2.1 VD的致病因素與類別35-36
• 2.2 VD的病理機制36
• 2.3 VD的診斷標(biāo)準36-37
• 2.4 VD的防治37
• 3 國內(nèi)外相關(guān)研究與趨勢37-42
• 3.1 VD腦缺血后的神經(jīng)發(fā)生研究37-38
• 3.2 神經(jīng)血管小生境與神經(jīng)新生38-39
• 3.3 針灸對VD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶成績的影響39-40
• 3.4 針灸對腦缺血損傷的促神經(jīng)新生機理研究40-42
• 4 本課題研究的基礎(chǔ)42
• 5 實驗設(shè)計的依據(jù)42-48
• 5.1 VD動物模型復(fù)制方法的選取42-43
• 5.2 穴位的選取43-44
• 5.3 指標(biāo)的選取44-47
• 5.4 實驗結(jié)果分析47-48
• 6 結(jié)論48
• 7 啟示與展望48-50
• 參考文獻50-55
• 附錄55-58
• 綜述58-64
• 參考文獻62-64
• 致謝64-65
• 個人簡介及發(fā)表論文情況65

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本文編號：800665