發(fā)布時(shí)間：2017-09-04 13:40

  本文關(guān)鍵詞：小鼠源性ABIN1蛋白的抗體制備及功能驗(yàn)證

  更多相關(guān)文章： 小鼠源性ABIN 鑰孔血藍(lán)蛋白 耦聯(lián)肽 抗體 純化

【摘要】：目的制備小鼠源性A20結(jié)合核因子κB活化抑制蛋白1(A20 binding inhibitor of NF-κB activation 1,mABIN1)的多克隆抗體并進(jìn)行功能驗(yàn)證,利用該抗血清對大鼠腦區(qū)ABIN1的分布進(jìn)行驗(yàn)證。方法利用mABIN1片段與鑰孔血藍(lán)蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)耦聯(lián)得到的肽段為免疫原,免疫新西蘭大耳白兔3次,共35 d,獲得抗血清,分別用ELISA、蛋白免疫(Western)印跡和免疫組織熒光化學(xué)法對抗體的特異性進(jìn)行驗(yàn)證;使用上述驗(yàn)證所得的特異性抗血清,通過Western印跡檢測ABIN1在大鼠各腦區(qū)的分布;對所得到的特異性抗血清進(jìn)行純化。Western印跡證明,純化后的抗體雜帶較純化前明顯降低,但效價(jià)也有所下降。結(jié)果與結(jié)論成功制備了兔抗小鼠ABIN1抗血清并對抗血清進(jìn)行純化,經(jīng)該抗血清首次驗(yàn)證ABIN1在大鼠嗅球、皮質(zhì)、海馬、紋狀體、伏隔核、丘腦、下丘腦、小腦、腦干及脊髓等中樞神經(jīng)系統(tǒng)不同部位均有廣泛分布,為在動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行ABIN1生物學(xué)功能研究提供了有利工具。
【作者單位】： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所;
【關(guān)鍵詞】： 小鼠源性ABIN 鑰孔血藍(lán)蛋白 耦聯(lián)肽 抗體 純化
【基金】：北京市自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(7092078) 國家自然科學(xué)青年基金資助項(xiàng)目(30901799)
【分類號(hào)】：R392.11
【正文快照】： A20結(jié)合核因子κB活化抑制蛋白1(A20 bind-ing inhibitor of NF-κB activation 1,ABIN1)是近年來研究發(fā)現(xiàn)的一個(gè)新泛素結(jié)合蛋白,因其能與鋅指結(jié)構(gòu)蛋白A20結(jié)合并抑制腫瘤壞死因子(tumor necro-sis factor,TNF)誘導(dǎo)的核因子(NF)-κB的活性而得名[1]。近年研究表明ABIN1不僅在NF

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 范宏光;劉瑩;楊晨輝;張祥建;;鋅指蛋白A20及ABINs對NF-κB的負(fù)反饋調(diào)節(jié)[J];腦與神經(jīng)疾病雜志;2008年04期

2 甘麗晶;劉曉波;胡質(zhì)毅;;抗體分離純化技術(shù)研究進(jìn)展[J];檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床;2013年04期

3 王蕭;周培嵐;李玉蕾;宮澤輝;;A20結(jié)合核因子抑制蛋白的抗體制備及鑒定[J];軍事醫(yī)學(xué);2011年02期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 喻麗;李梅章;李金榮;李曉嵐;;TNIP1真核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)[J];昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2015年01期

2 祝靜;邢艷;;成纖維樣滑膜細(xì)胞microRNA與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎[J];中國免疫學(xué)雜志;2015年02期

3 張帆;朱麗花;王旭;陳少華;楊力建;吳秀麗;李，

本文編號(hào)：791872