本文關(guān)鍵詞：原代神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞的混合培養(yǎng)方法

  更多相關(guān)文章： 神經(jīng)元 膠質(zhì)細(xì)胞 共培養(yǎng)

【摘要】：原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元是研究神經(jīng)細(xì)胞中蛋白運輸與亞細(xì)胞空間定位的有效研究工具。本文旨在建立海馬神經(jīng)元與皮層膠質(zhì)細(xì)胞混合培養(yǎng)的方法,以期提供狀態(tài)良好的神經(jīng)元供研究用。新生2～3 d Sprague-Dawley(SD)大鼠斷頭處死,從大腦半球表面片取2～3片皮層組織,切碎后用胰蛋白酶消化成單細(xì)胞懸液,種植于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)。種植后第四天,采用劇烈敲擊培養(yǎng)瓶的方法去除非星形膠質(zhì)細(xì)胞的雜質(zhì)細(xì)胞,繼續(xù)培養(yǎng)貼壁細(xì)胞直至細(xì)胞接近鋪滿瓶底,改用含阿糖胞苷的神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)液。原代培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元種植在這種預(yù)先培養(yǎng)好的皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞層上。鏡下觀察結(jié)果顯示,本方法培養(yǎng)的原代星形膠質(zhì)細(xì)胞純度較高,共培養(yǎng)的神經(jīng)元狀態(tài)較佳,存活時間長,突觸前結(jié)構(gòu)發(fā)育良好,可以耐受轉(zhuǎn)染操作。以上結(jié)果提示,本文所建立的原代神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞的混合培養(yǎng)方法操作簡單,能夠可靠地培養(yǎng)出健康的神經(jīng)元。
【作者單位】： 復(fù)旦大學(xué)腦科學(xué)研究院 醫(yī)學(xué)神經(jīng)生物學(xué)國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 神經(jīng)元 膠質(zhì)細(xì)胞 共培養(yǎng)
【基金】：supported by the Nationa l985 Program from the Ministry of Education of China
【分類號】：R329
【正文快照】： 原代培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞被廣泛地應(yīng)用于神經(jīng)生物學(xué)的研究,例如采用體外培養(yǎng)的神經(jīng)元結(jié)合膜片鉗技術(shù)進行電生理研究。近年來,隨著熒光標(biāo)記技術(shù)及相應(yīng)高端成像儀器的廣泛運用,培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞被廣泛地作為細(xì)胞水平上的研究模型為眾多實驗室運用。目前,實驗室采用較多的神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)

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