本文關(guān)鍵詞：細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)3種重組抗原的雙向電泳定位分析

  更多相關(guān)文章： 細(xì)粒棘球蚴 原頭節(jié) 重組抗原 雙向電泳

【摘要】：目的利用已有的細(xì)粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)原頭節(jié)3種重組抗原rEgZW-5、rEg14-3-3和rEgP-29獲得特異性抗體,以識(shí)別雙向電泳圖譜中相應(yīng)的蛋白位點(diǎn)。方法十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)初步分離細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)蛋白,預(yù)判斷蛋白分布情況。應(yīng)用雙向電泳技術(shù)分離原頭節(jié)蛋白,PDquest軟件分析原頭節(jié)的蛋白質(zhì)數(shù)量、相對(duì)分子質(zhì)量(Mr)和等電點(diǎn)(IP)。用原頭節(jié)的3種重組蛋白rEgZW-5、rEg14-3-3和rEgP-29分別免疫新西蘭家兔,制備血清,純化抗體。蛋白質(zhì)印跡(Western blotting)鑒定特異性抗體對(duì)原頭節(jié)雙向電泳圖譜中相應(yīng)蛋白的識(shí)別。結(jié)果SDS-PAGE結(jié)果顯示,細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)蛋白主要分布于Mr18 000～90 000區(qū)域。雙向電泳分離出240個(gè)蛋白位點(diǎn),為Mr15 790～117 050,IP為4.0～9.5,其中85.8%(206/240)蛋白等電點(diǎn)為5～9。Western blotting結(jié)果顯示,rEg14-3-3特異性抗體可識(shí)別細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)雙向電泳圖譜中約為Mr33 000、IP為4.86的14-3-3蛋白位點(diǎn),rEgZW-5特異性抗體可識(shí)別約為Mr23 000、IP為4.98的ZW-5蛋白位點(diǎn),rEgP-29特異性抗體可識(shí)別約為Mr29 000、IP為5.65的P-29蛋白位點(diǎn)。結(jié)論細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)的3種重組抗原rEgZW-5、rEg14-3-3和rEgP-29的抗體可識(shí)別雙向電泳圖譜中相應(yīng)的蛋白位點(diǎn)。
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)研究中心;寧夏醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所;寧夏醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心;
【關(guān)鍵詞】： 細(xì)粒棘球蚴 原頭節(jié) 重組抗原 雙向電泳
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(No.30960360)~~
【分類號(hào)】：R383.33
【正文快照】： 細(xì)粒棘球蚴病又稱囊性包蟲病,是棘球絳蟲的幼蟲寄生于中間宿主體內(nèi)引起的一種人獸共患病。該病廣泛流行于世界各地畜牧業(yè)發(fā)達(dá)地區(qū),嚴(yán)重危害人畜健康。全球約有400萬人感染棘球蚴病,4 000萬人受到該病威脅[1,2]。在棘球蚴病的防治研究中,無論是篩選早期診斷抗原、新的疫苗候選

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：784814