漢坦病毒G2糖蛋白多表位抗原的表達及應用
本文關鍵詞:漢坦病毒G2糖蛋白多表位抗原的表達及應用
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【摘要】:目的對漢坦病毒G2糖蛋白多表位抗原(multi-epitope antigen,MEA)進行原核表達和純化,建立MEAELISA方法并用于腎綜合征出血熱(HFRS)患者血清特異性抗體的檢測。方法利用pET原核表達系統(tǒng)表達MEA,并進行鎳親和純化;利用Western blot方法對MEA進行免疫反應性鑒定,并建立MEA-ELISA方法,用于檢測HFRS患者血清特異性抗體。結果原核表達系統(tǒng)E.coli BL21/pET32a-mea能表達分子質量單位為36.9ku的MEA蛋白,純化后的蛋白濃度為0.15mg/ml,純度95%,Western blot顯示目的蛋白能被HFRS患者血清識別。用建立的MEA-ELISA方法檢測120例HFRS患者血清的陽性率為90.83%,檢測60例健康人血清全部為陰性。結論重組表達蛋白MEA具有良好的免疫反應性,建立的MEA-ELISA方法可用于HFRS患者血清特異性抗體的檢測。
【作者單位】: 天津市疾病預防控制中心;天津醫(yī)科大學;
【關鍵詞】: 漢坦病毒 腎綜合征出血熱 多表位抗原 原核表達
【基金】:天津市科技支撐計劃重大項目(No.07SYSYSF05100)
【分類號】:R392
【正文快照】: 腎綜合征出血熱(hemorrhagic fever with renalsyndrome,HFRS)是由漢坦病毒(hantavirus,HV)引起的嚴重病毒性疾病,我國每年報告病例達2萬~5萬例,是我國重點防治的傳染病之一。HV主要由RNA聚合酶,G1、G2包膜糖蛋白和核衣殼蛋白組成完整病毒顆粒。HV有保護作用的中和抗原位點主
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