本文關(guān)鍵詞：細(xì)胞因子誘導(dǎo)外周血單個(gè)核細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)研究

  更多相關(guān)文章： CIK細(xì)胞 誘導(dǎo)培養(yǎng) 蛋白質(zhì)譜 qPCR

【摘要】：采用干擾素-γ、抗CD3單克隆抗體和IL-2體外誘導(dǎo)擴(kuò)增外周血單個(gè)核細(xì)胞成為CIK細(xì)胞,并于誘導(dǎo)培養(yǎng)前及培養(yǎng)第15 d時(shí)分別收集細(xì)胞樣本。在對(duì)培養(yǎng)前后細(xì)胞的增殖、形態(tài)及表面標(biāo)志變化檢測的同時(shí),提取總蛋白進(jìn)行定量、雙向電泳和銀染。利用ImageMasterTM軟件對(duì)培養(yǎng)前后表達(dá)相同和不同的蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行分析,并選擇其中24個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜鑒定。對(duì)于部分培養(yǎng)前后具有代表性的蛋白,進(jìn)一步采用qPCR技術(shù)分析其的轉(zhuǎn)錄情況。結(jié)果表明,培養(yǎng)前后細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)特征是完全不同的,相同表達(dá)蛋白點(diǎn)主要與基因的轉(zhuǎn)錄因子和細(xì)胞骨架相關(guān),誘導(dǎo)后特異表達(dá)蛋白主要與細(xì)胞生長、增殖相關(guān)。雖然在轉(zhuǎn)錄與蛋白水平上呈現(xiàn)出部分負(fù)相關(guān)現(xiàn)象,由于蛋白質(zhì)組才是基因表達(dá)的最終形式,結(jié)合蛋白差異研究結(jié)果提示,經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)后,CIK細(xì)胞的大量擴(kuò)增與細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)改變相關(guān)。
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學(xué)附屬延安醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： CIK細(xì)胞 誘導(dǎo)培養(yǎng) 蛋白質(zhì)譜 qPCR
【基金】：云南省科技廳 昆明醫(yī)學(xué)院聯(lián)合基金項(xiàng)目(批準(zhǔn)號(hào):2010CD211)資助的課題~~
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： 細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷性細(xì)胞(cytokine-inducedkiller cells,CIK)是一種新型的廣譜抗腫瘤免疫活性細(xì)胞,最早于1986年被人們從外周血單個(gè)核細(xì)胞在體外用IFN-γ、抗人的CD3+抗體、IL-2等多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)出來所獲得的一群異質(zhì)細(xì)胞,其主要細(xì)胞成分為CD3+CD56+細(xì)胞和CD3+CD8+細(xì)胞,由于

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4 鄒志鵬;野生型MEF細(xì)胞與缺失PLC-γ1基因的MEF細(xì)胞總蛋白質(zhì)表達(dá)譜差異的研究[D];中國人民解放軍第一軍醫(yī)大學(xué);2003年

5 樂堯金;結(jié)直腸癌細(xì)胞馴化巨噬細(xì)胞的蛋白組學(xué)研究[D];暨南大學(xué);2012年

6 孫娜;水分脅迫對(duì)不同基因型水稻生理及根系蛋白組的影響[D];浙江師范大學(xué);2009年

7 林水賓;小鼠早期胚胎發(fā)育機(jī)理的蛋白組學(xué)研究[D];廈門大學(xué);2007年

8 位淑梅;PeroxiredoxinⅢ蛋白在卵巢漿液性囊腺癌中的表達(dá)及臨床意義[D];中國醫(yī)科大學(xué);2009年

9 王麗;CD73在腫瘤血管新生中的作用[D];復(fù)旦大學(xué);2008年

10 張巍;SELDI蛋白質(zhì)芯片技術(shù)在結(jié)直腸癌臨床診斷中的應(yīng)用研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2009年

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