本文關(guān)鍵詞：抗Zhangfei蛋白單克隆抗體的制備

  更多相關(guān)文章： Zhangfei蛋白 抗體效價(jià) 細(xì)胞融合 單克隆抗體 特異性

【摘要】：【目的】制備抗Zhangfei蛋白的單克隆抗體,并鑒定其特性�！痉椒ā坑肸hangfei融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾細(xì)胞與SP2/0融合,篩選出陽(yáng)性克隆,應(yīng)用有限稀釋法篩選抗Zhangfei蛋白的單克隆雜交瘤株;采用腹水誘生法制備單抗腹水,用飽和硫酸銨法純化腹水抗體;采用間接ELISA、單克隆抗體亞型檢測(cè)試劑盒、免疫印記技術(shù)、曲線擬合方案等分別鑒定單抗效價(jià)、亞型、特異性和親和力等特性。【結(jié)果】免疫小鼠的血清抗體效價(jià)達(dá)1∶5 000以上,細(xì)胞融合克隆率為98.96%,陽(yáng)性克隆率為30.18%,篩選出2株抗Zhangfei蛋白的單克隆雜交瘤細(xì)胞,其培養(yǎng)上清效價(jià)均達(dá)到1∶800,腹水單抗效價(jià)分別為1∶105和1∶2×105,親和常數(shù)分別為2.5×106和2.3×106。制備的抗Zhangfei蛋白單克隆抗體的亞型均為IgG1類(lèi)型�！窘Y(jié)論】制備的抗Zhangfei蛋白單克隆抗體具有較高的效價(jià)和較強(qiáng)的親和力,可用于進(jìn)一步研究Zhangfei蛋白在機(jī)體中的生理作用。
【作者單位】： 寶雞市陳倉(cāng)區(qū)慕儀鎮(zhèn)政府;太白縣畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣站;寶雞市獸醫(yī)局;西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院農(nóng)業(yè)部動(dòng)物生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： Zhangfei蛋白 抗體效價(jià) 細(xì)胞融合 單克隆抗體 特異性
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(39970544) 西北農(nóng)林科技大學(xué)青年骨干教師支持計(jì)劃項(xiàng)目(01140305)
【分類(lèi)號(hào)】：R392
【正文快照】： Zhangfei蛋白是堿性亮氨酸拉鏈蛋白家族的成員之一[1],其分子質(zhì)量為28.9ku,是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)[2]和非折疊蛋白反應(yīng)(Unfolded protein response,UPR)過(guò)程中參與調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄因子之一[3]。研究表明,UPR在胚胎發(fā)育、人類(lèi)疾病等生理和病理過(guò)程中具有

【參考文獻(xiàn)】

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8 大洋;白細(xì)胞制成抗體有望防治禽流感[N];中國(guó)消費(fèi)者報(bào);2008年

9 江蘇省人民醫(yī)院 變態(tài)反應(yīng)研究所所長(zhǎng) 何韶衡邋周寧人 整理;讓蟑螂的致敏瀑布斷流[N];健康報(bào);2008年

10 馬里;我國(guó)首例人治療性抗體轉(zhuǎn)基因奶牛誕生[N];大眾科技報(bào);2008年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張輝;單增李斯特菌ActA的表達(dá)、免疫原性及膠體金試紙研制[D];吉林大學(xué);2008年

2 付建芳;溶藻弧菌抗獨(dú)特型抗體基因工程疫苗的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

3 侯桂華;巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子在同種移植排斥中作用及其機(jī)理的研究[D];山東大學(xué);2004年

4 徐海燕;人BAFF基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞及其單克隆抗體的生物學(xué)特性[D];蘇州大學(xué);2005年

5 郭莉;一個(gè)新的白細(xì)胞膜抗原ZCH-2B8a編碼基因及其生物學(xué)特性的研究[D];浙江大學(xué);2006年

6 秦迎松;人促血液血管細(xì)胞生成素（Haemangiopoietin, HAPO）單克隆抗體的制備、鑒定及應(yīng)用[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

7 萬(wàn)忠海;抗PEA單抗和單鏈抗體制備及在綠膿感染中的應(yīng)用[D];吉林大學(xué);2008年

8 曹s

本文編號(hào)：737563