本文關鍵詞：Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎腸神經(jīng)系統(tǒng)中的表達及意義

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【摘要】：研究背景及研究目的：腸道神經(jīng)系統(tǒng)(Enteric Nervous System, ENS)相關的一系列疾病一直以來都是醫(yī)學界的難題,它們的影響因素眾多,表現(xiàn)形式各樣,病因往往都不是非常明確,而且,近些年ENS疾病發(fā)病率呈現(xiàn)出增長趨勢,即使有些腸道神經(jīng)系統(tǒng)相關疾病可以通過外科手術的方式得到治療,但它們的術后并發(fā)癥或術后恢復情況仍會受到許多不明病因的影響,這些不被詳知的病因一直以來都是我們研究的對象。.Neuroligin1基因廣泛存在于人類和其它哺乳動物的體內(nèi),且在ENS內(nèi)廣泛表達,同時也發(fā)揮著重要的作用,我們此次科研的目的就是研究Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎的ENS中的表達情況,探討Neuroligin1基因的表達與ENS和ENS疾病之間的關系。實驗方法：分別取Wistar大鼠的胚胎第16(E16)、18(E18)、20(E20)天和出生第一天(B1)的胚鼠腸管標本各30只,分別通過免疫熒光兩重標記的染色技術、Western blot的技術、多聚核苷酸鏈式反應(實時熒光定量的)的實驗技術(Real-time Quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)、酶聯(lián)免疫吸附的實驗技術(ELISA)、免疫組織化學的實驗技術(immunohi stochemi stry)等實驗方法,研究Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎ENS各個發(fā)育時期中的表達情況。實驗結果：在Wistar大鼠E16、E18、E20和B1四個ENS發(fā)育時期中：免疫熒光兩重標記的染色技術顯示Neuroligin1基因陽性面積的平均光密度值分別為E16 (0.046±0.031), E18(0.146±0.033), E20(0.233±0.034), Bl (0.345± 0.344),且四組之間的差別經(jīng)統(tǒng)計軟件處理證實有意義(F=441.614,P=-0.000,P0.05),同時在組組相比的過程中,平均蛋白濃度均有差別且經(jīng)統(tǒng)計軟件處理證實有意義(比較結果都符合P=-0.000,P0.05);Western blot顯示Neuroligin1基因的平均蛋白表達量分別為E16(0.053±0.025)、E18(0.146±0.024)、E20(0.249±0.034)、B1(0.533±0.049),且四組之間的差別經(jīng)統(tǒng)計軟件處理證實有意義(F=1070.296,P=0.000,P0.05),同時在組組相比的過程中,平均蛋白濃度均有差別且經(jīng)統(tǒng)計軟件處理證實有意義(比較結果都符合p=0.000,p0.05);qRT-PCR顯示Neuroligin1基因的mRNA目對平均濃度分別為E16(2.543±1.294)、E18(4.637±1.830)、E20(6.814±1.552)、B1(8.345±1.364),且四組之間的差別經(jīng)統(tǒng)計軟件處理證實有意義(F=81.440,P=-0.000,P0.05),同時在組組相比的過程中,平均mRNA濃度均有差別且經(jīng)統(tǒng)計軟件處理證實有意義(比較結果都符合p=0.000,p0.05);ELISA顯示Neuroligin1基因表達的蛋白平均濃度分別為E16(0.069±0.061)、E18(0.153±0.102)、 E20(1.087±0.093)、B1(1.678±0.085),且四組之間的差別經(jīng)統(tǒng)計軟件處理證實有意義(F=2396.068,p=0.000,K0.05),同時在組組相比的過程中,平均蛋白濃度均有差別且經(jīng)統(tǒng)計軟件處理證實有意義(比較結果都符合p=O.000,p0.05)；免疫組織化學技術顯示Neuroligin1基因表達的蛋白分別為E16(±～+)、 E18(+～++)、E20(++～+++)、B1 (+++～++++),表達量的大小順序為：E16E18E20B1；免疫熒光兩重標記的染色技術、Western blot.qRT-PCR.ELISA和免疫組織化學技術中Neuroligin1基因的表達趨勢彼此一致。實驗結論： 在E16到B1這段時期內(nèi),隨著Wistar大鼠ENS的發(fā)育,Neuroligin1在ENS的表達呈遞增趨勢；Neuroligin1在ENS的異常表達發(fā)生越早,相關疾病可能就越嚴重；Neuroligin1基因相關的ENS疾病可能是先天發(fā)育異常。
【關鍵詞】：Neuroligin1 大鼠胚胎 腸神經(jīng)系統(tǒng)疾病 表達
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R321
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 英文縮略詞表10-11
• 第一章 前言11-13
• 第二章 材料與方法13-30
• 第三章 實驗結果30-31
• 第四章 討論31-33
• 第五章 結論33
• 第六章 本實驗研究的不足之處33-34
• 第七章 對繼續(xù)研究的思考34-35
• 附圖及附表35-46
• 參考文獻46-51
• 致謝51-52
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文52-53
• 附件53

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本文編號：737387