不同分化階段樹(shù)突狀細(xì)胞骨架結(jié)合蛋白表達(dá)變化的研究
本文關(guān)鍵詞:不同分化階段樹(shù)突狀細(xì)胞骨架結(jié)合蛋白表達(dá)變化的研究
更多相關(guān)文章: 樹(shù)突狀細(xì)胞 細(xì)胞骨架結(jié)合蛋白 Real-time PCR mRNA
【摘要】:目的:樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)被認(rèn)為是目前功能最為強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞,在啟動(dòng)和放大固有免疫和適應(yīng)性免疫應(yīng)答方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。不同分化階段DCs運(yùn)動(dòng)能力不同,可導(dǎo)致免疫應(yīng)答結(jié)果的不同。因此,研究不同分化階段樹(shù)突狀細(xì)胞重要細(xì)胞骨架結(jié)合蛋白的表達(dá)變化,為深入研究DCs運(yùn)動(dòng)能力和提高基于過(guò)繼回輸DCs的抗腫瘤免疫治療療效提供理論依據(jù)。方法:外周血單個(gè)核細(xì)胞來(lái)源的單核細(xì)胞,在體外經(jīng)重組人白介素-4(recombinant human interleukin-4,rh IL-4)和重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,rh GM-CSF)誘導(dǎo)培養(yǎng)5天獲得未成熟DCs(immature dendritic cells,im DCs),繼續(xù)經(jīng)腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子和重組人白細(xì)胞介素-4誘導(dǎo)培養(yǎng)3天后分化為成熟樹(shù)突狀細(xì)胞(mature dendritic cells,m DCs)。分別提取不同分化階段DCs的總蛋白和總RNA,實(shí)時(shí)定量PCR(Real-time q PCR)和蛋白質(zhì)芯片檢測(cè)細(xì)胞骨架結(jié)合蛋白的基因和蛋白水平的表達(dá)變化。結(jié)果:單核細(xì)胞經(jīng)im DCs向m DCs分化的過(guò)程中,一些肌動(dòng)蛋白微絲的單體隔離蛋白、加帽蛋白、橫連蛋白、解聚蛋白、成核蛋白和膜結(jié)合蛋白以及微管結(jié)合蛋白和馬達(dá)蛋白在基因和蛋白水平發(fā)生了不同程度的上調(diào)或下調(diào)。部分結(jié)果與蛋白芯片分析結(jié)果一致。結(jié)論:總之,本研究發(fā)現(xiàn)一些DCs的骨架結(jié)合蛋白在其不同的分化階段表現(xiàn)出不同的表達(dá)水平,分別涉及細(xì)胞的骨架重塑、遷移、粘附、吞噬和變形等功能,說(shuō)明DCs的結(jié)構(gòu)和功能受到這些蛋白的協(xié)同作用和精密調(diào)控,但是具體機(jī)制還需要深入研究,這對(duì)深入理解DCs的免疫學(xué)功能具有重要意義。
【關(guān)鍵詞】:樹(shù)突狀細(xì)胞 細(xì)胞骨架結(jié)合蛋白 Real-time PCR mRNA
【學(xué)位授予單位】:貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R392
【目錄】:
- 中文摘要4-5
- 英文摘要5-8
- 英文縮略詞表8-9
- 0 引言9-13
- 1 材料與方法13-25
- 2 結(jié)果25-42
- 3 討論42-49
- 4 結(jié)論49-50
- 參考文獻(xiàn)50-55
- 綜述55-61
- 參考文獻(xiàn)59-61
- 作者簡(jiǎn)歷61-62
- 致謝62-63
- 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集63
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本文編號(hào):734794
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