本文關(guān)鍵詞：細(xì)胞外鈣對HepG2細(xì)胞內(nèi)鈣濃度的影響

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【摘要】：目的研究不同濃度細(xì)胞外鈣對HepG2細(xì)胞內(nèi)鈣的影響并初步闡明細(xì)胞內(nèi)鈣變化的機(jī)制。方法給予不同濃度鈣培養(yǎng)液作用24h后,用Fluo-3/AM染色劑對HepG2細(xì)胞進(jìn)行染色,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測其細(xì)胞內(nèi)鈣濃度的變化;利用阻斷劑對鈣通道進(jìn)行阻斷,尋找細(xì)胞內(nèi)鈣變化的原因;應(yīng)用siRNA干擾對找尋到的鈣通道進(jìn)行沉默,進(jìn)一步確認(rèn)引起鈣變化的鈣通道。結(jié)果細(xì)胞內(nèi)鈣濃度隨細(xì)胞外鈣濃度的升高而升高,當(dāng)細(xì)胞外鈣濃度為2.75mmol/L時(shí),細(xì)胞內(nèi)鈣鈣熒光強(qiáng)度值達(dá)到最大為(123.25±12.95);鈣池操縱的鈣通道(SOC)阻斷劑—La3+可顯著抑制外鈣引起的內(nèi)鈣升高(P㩳0.01);應(yīng)用siRNA沉默TRPC1通道后可顯著抑制外鈣引起的內(nèi)鈣變化。結(jié)論隨細(xì)胞外鈣濃度升高,肝細(xì)胞內(nèi)鈣濃度顯著增高;TRPC1參與的鈣池操縱的鈣通道可能是引起細(xì)胞內(nèi)鈣離子升高的主要通道。
【作者單位】： 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 鈣濃度 HepG細(xì)胞 鈣通道 流式細(xì)胞儀
【基金】：“863”重點(diǎn)項(xiàng)目(2010AA023002) 國家自然科學(xué)基金(81102111)
【分類號】：R363
【正文快照】： 鈣離子是細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要信使,在體內(nèi)代謝中發(fā)揮著非常重要的作用。研究表明,血鈣濃度的波動可引起興奮性細(xì)胞內(nèi)鈣的變化[1],可見細(xì)胞外鈣波動可通過影響細(xì)胞內(nèi)鈣改變而發(fā)揮不同的生物學(xué)作用。然而目前關(guān)于血鈣濃度穩(wěn)態(tài)的改變對細(xì)胞內(nèi)鈣濃度影響的研究較少,其中對肝細(xì)胞的

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