本文關(guān)鍵詞：小鼠胚胎干細(xì)胞衍生的肝組織微粒體Ⅱ相代謝酶表征

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【摘要】：目的:觀察小鼠胚胎干細(xì)胞定向分化肝組織過(guò)程中,肝組織微粒體Ⅱ相代謝酶尿苷-5'-二磷酸葡醛酰轉(zhuǎn)移酶(UGT)1a1、1a6和微粒體谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶1(mGST1)的表達(dá)及其催化活性。方法:利用擬胚體固有的三胚層結(jié)構(gòu),直接由中胚層心肌細(xì)胞產(chǎn)生成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子,自發(fā)誘導(dǎo)內(nèi)胚層細(xì)胞發(fā)育,并由同步分化的內(nèi)皮細(xì)胞支持肝細(xì)胞發(fā)育形成肝樣組織。在不同分化階段,基于mRNA表達(dá)情況,以Western blot法檢測(cè)UGT1a1、UGT1a6和mGST1表達(dá)特征。至分化終點(diǎn)(第18天)以心肌細(xì)胞搏動(dòng)區(qū)域附近表達(dá)肝特異性標(biāo)記物白蛋白確定為肝細(xì)胞。超聲法碎裂細(xì)胞,超速離心制備肝細(xì)胞微粒體,以HPLC檢測(cè)UGTs代謝活性,以色譜法測(cè)定并計(jì)算mGST1酶催化活性。結(jié)果:至分化終點(diǎn),小鼠胚胎干細(xì)胞衍生的肝組織表達(dá)UGT1a1、UGT1a6和mGST1,并具有UGT1a1、UGT1a6和mGST1的催化功能。其中分化第18天肝組織GST1催化活性為7.65 nmol·min-1·mg-1。結(jié)論:小鼠胚胎干細(xì)胞分化的肝組織具UGT1a1、UGT1a6和mGST1代謝功能,可望成為肝臟病理生理和藥物Ⅱ相代謝研究的體外模型。
【作者單位】： 浙江大學(xué)藥學(xué)院藥理毒理與生化藥學(xué)研究所;浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院藥劑科;
【關(guān)鍵詞】： 胚胎干細(xì)胞 肝/解剖學(xué)和組織學(xué) 谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶 微粒體 肝 葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金重大研究計(jì)劃資助項(xiàng)目(91229124) 浙江省自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(LZ12H31001) 浙江省重點(diǎn)科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)基金(2010R50047)
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 胚胎干細(xì)胞可在體外定向分化為外、中、內(nèi)胚層的任何類型細(xì)胞。利用擬胚體(embryoidbodies)固有的三胚層結(jié)構(gòu),直接由中胚層心肌細(xì)胞產(chǎn)生成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子,自發(fā)誘導(dǎo)內(nèi)胚層細(xì)胞發(fā)育,并由同步分化的內(nèi)皮細(xì)胞支持肝細(xì)胞發(fā)育形成肝樣組織[1]。三胚層結(jié)構(gòu)可通過(guò)細(xì)胞因子和信號(hào)網(wǎng)絡(luò)

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 沈干,吳春芳,叢笑倩,劉曉音,劉偉,曹誼林;胚胎干細(xì)胞在轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1誘導(dǎo)下表達(dá)vWF、CD34的研究[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2003年01期

2 劉鴻禧;胚胎干細(xì)胞的研究及其在臨床上的應(yīng)用[J];汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2003年01期

3 丁國(guó)治;;可轉(zhuǎn)變成多神細(xì)胞和組織的成人干細(xì)胞[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)情報(bào);2003年06期

4 王波,黃荷鳳;胚胎干細(xì)胞向胰島細(xì)胞誘導(dǎo)分化的研究[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).生物醫(yī)學(xué)工程分冊(cè);2004年02期

5 傅玉如,陳s，

本文編號(hào)：697295