大鼠羊膜上皮細(xì)胞的生物學(xué)特性
發(fā)布時間:2017-08-19 01:28
本文關(guān)鍵詞:大鼠羊膜上皮細(xì)胞的生物學(xué)特性
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【摘要】:目的探討建立大鼠羊膜上皮細(xì)胞分離、培養(yǎng)及鑒定方法及觀察其生物學(xué)特性。方法從妊娠14~16 d的SD大鼠胎盤剝離羊膜,用胰蛋白酶消化法分離大鼠羊膜上皮細(xì)胞,采用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)和流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞表型特征;使用含有10%胎牛血清(FBS)和100 U/ml青霉素-鏈霉素(PS)溶液的DMEM/F-12的培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。結(jié)果每次采用胰蛋白酶消化法從1只孕鼠分離的上皮細(xì)胞數(shù)為(1~6)×105/ml,足夠達(dá)到貼壁培養(yǎng)濃度。所分離的羊膜上皮細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)前體細(xì)胞特異性蛋白nestin和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)記蛋白CD29和CD44,但是未成熟神經(jīng)元標(biāo)記蛋白β-Ⅲ-tublin、星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)以及造血干細(xì)胞表面標(biāo)記蛋白CD34表達(dá)陰性。在完全培養(yǎng)基培養(yǎng)條件下,羊膜上皮細(xì)胞生長增殖較快,原代培養(yǎng)1 w后即可傳代。結(jié)論建立了大鼠羊膜上皮細(xì)胞分離、培養(yǎng)及鑒定的方法,大鼠羊膜上皮細(xì)胞具有神經(jīng)前體細(xì)胞的特異標(biāo)志和間充質(zhì)干細(xì)胞的某些表型特征。
【作者單位】: 徐州醫(yī)學(xué)院解剖學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】: 大鼠羊膜上皮細(xì)胞 分離 培養(yǎng) 鑒定
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(No.31271358) 徐州市科技發(fā)展基金(No.XF10C079) 徐州醫(yī)學(xué)院院長專項人才基金(No.2011KJZ25)
【分類號】:R329
【正文快照】: 羊膜上皮細(xì)胞(AECs)起源于胚胎發(fā)育時期的胚泡內(nèi)細(xì)胞團(tuán)〔1,2〕,是將來發(fā)育形成胎兒的部分。人受精8 d內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分化成上胚層和下胚層,AECs源于上胚層〔3〕,也有研究表明胚胎干細(xì)胞源于內(nèi)細(xì)胞團(tuán)〔4〕。研究證實,大鼠AECs有趨向上胚層、中胚層和下胚層細(xì)胞分化的潛能〔5,6〕,因此,
本文編號:697927
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