本文關(guān)鍵詞：以重組B群腦膜炎奈瑟菌fHBP為載體的結(jié)合疫苗制備及免疫原性研究

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【摘要】：目的:以重組B群腦膜炎奈瑟菌(Nesseria meningitidis,Nm)外膜蛋白fHBP(recombinant factorH binding protein,rfHBP)為載體與C群多糖(group C meningococcal polysaccharide,GCMP)共價(jià)結(jié)合制備結(jié)合疫苗并免疫小鼠,檢測小鼠血清中針對B群和C群Nm的殺菌抗體,評價(jià)該重組蛋白作為結(jié)合疫苗載體的可行性及該結(jié)合疫苗對B群Nm的交叉保護(hù)性。方法:擴(kuò)增fhbp并連接到pET30a(+)表達(dá)載體上,轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21(DE3),異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)表達(dá),鎳親和層析柱純化rfHBP,CNBr活化法將rfH-BP與GCMP共價(jià)結(jié)合,制備結(jié)合疫苗,免疫小鼠,間接ELISA法檢測血清中GCMP抗體和rfHBP抗體滴度,TTC法檢測結(jié)合物誘導(dǎo)的分別針對B群和C群Nm的殺菌抗體水平。結(jié)果:成功擴(kuò)增fhbp并連接至pET30a(+)表達(dá)載體上,大腸桿菌中誘導(dǎo)表達(dá)rfHBP,純化后與GCMP結(jié)合。結(jié)合物免疫小鼠后,檢測到的針對GCMP的IgG抗體滴度與GCMP組比較有明顯加強(qiáng)效應(yīng);三針免疫后,針對C群Nm的殺菌抗體滴度高于GCMP對照組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);針對B群Nm的殺菌抗體滴度與rfHBP對照組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);兩組結(jié)合物誘導(dǎo)的分別針對B群Nm CMCC29361株和ATCC700111株的殺菌抗體滴度間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:結(jié)合疫苗免疫小鼠后檢測到的針對C群Nm的殺菌抗體高于單獨(dú)GCMP組,證明該重組蛋白可作為結(jié)合疫苗的載體蛋白;且在結(jié)合過程中較好地保留了蛋白的免疫原性,對B群Nm有良好的交叉保護(hù)作用。
【作者單位】： 河北北方學(xué)院病原生物學(xué)和免疫學(xué)研究所;北京衛(wèi)信天成生物科技有限公司;
【關(guān)鍵詞】： B群腦膜炎奈瑟菌 結(jié)合疫苗 H因子結(jié)合蛋白
【分類號】：R392
【正文快照】： 腦膜炎奈瑟菌(Nesseria meningitidis,Nm)是專一人致病的革蘭陰性雙球菌,依據(jù)莢膜多糖的化學(xué)和免疫學(xué)性質(zhì),可分成13個(gè)血清型,莢膜多糖形成是其致病的重要條件。95%以上的病例為A,B,C,Y和W135這5個(gè)血清型所致[1-2]。該菌通常定植在人的鼻咽部,通過呼吸道傳染。在世界范圍內(nèi)流行

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 成慧;王東海;譚楚生;楊夢;徐小倩;;江西省2004～2007年流行性腦脊髓膜炎流行病學(xué)特征分析[J];中國疫苗和免疫;2009年03期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 高海濤;周莉薇;張穎;李淑霞;石曉娟;周娟;;寧夏2006—2011年流行性腦脊髓膜炎流行病學(xué)分析[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2013年01期

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 李軍宏,王曉軍,梁曉峰;我國流行性腦脊髓膜炎的流行概況及預(yù)防控制[J];疾病監(jiān)測;2005年04期

2 劉丹青;王斌冰;陳霞;劉紅;陸美娟;張孝東;陸志堅(jiān);沈永剛;戴振威;;安徽省流行性腦脊髓膜炎流行病學(xué)分析及防制對策[J];中國計(jì)劃免疫;2006年01期

3 李藝星;李軍宏;尹遵棟;寧夏;邵祝軍;徐麗;高源;李馬超;梁曉峰;;中國2005/2006年度流行性腦脊髓膜炎流行病學(xué)特征分析[J];中國計(jì)劃免疫;2007年03期

4 李軍宏;李藝星;尹遵棟;楊俊峰;邵祝軍;寧夏;王旭霞;梁曉峰;;中國1997～2006年流行性腦脊髓膜炎流行病學(xué)分析[J];中國計(jì)劃免疫;2007年05期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙志強(qiáng);楊朝暉;計(jì)永莉;杜琳;謝貴林;;甲型副傷寒結(jié)合疫苗的制備及其免疫原性研究[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2006年11期

2 楊朝暉;趙志強(qiáng);計(jì)永莉;馬慶華;杜琳;謝貴林;;鼠傷寒結(jié)合疫苗研制的初步探討[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2006年04期

3 周園;焦海勝;杜琳;謝貴林;;傷寒Vi多糖結(jié)合疫苗免疫小鼠后的抗體類型及動(dòng)態(tài)分析[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2007年03期

4 沈榮;陳曉航;任克明;孔素娟;王劍虹;張勇;;肺炎鏈球菌莢膜多糖-破傷風(fēng)類毒素結(jié)合疫苗兩種免疫途徑對小鼠抗體應(yīng)答的比較[J];中國生物制品學(xué)雜志;2006年04期

5 秦敏;楊國友;涂小萍;楊蒲;林麗;黃鍇;;傷寒結(jié)合疫苗免疫原性和動(dòng)物安全性研究[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2006年03期

6 朱為;葉強(qiáng);李榮成;王樹巧;李亞楠;李艷萍;王琰;畢慧;農(nóng)藝;李鳳祥;;A群腦膜炎球菌多糖結(jié)合疫苗在6月齡～5歲兒童中的安全性與免疫原性研究[J];中國疫苗和免疫;2008年06期

7 林端端;11價(jià)肺炎球菌疫苗在成人中的免疫原性和耐受性[J];國外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊;2001年05期

8 林云;7價(jià)肺炎球菌莢膜多糖-CRM197結(jié)合疫苗中各血清型免疫原性的明顯差異[J];國外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊;2004年05期

9 王平;;4種配方的DTwP/Hib-CRM197結(jié)合疫苗的免疫原性比較[英][J];國際生物制品學(xué)雜志;2006年01期

10 楊美峰;范泉水;戴曉暢;黃鎮(zhèn);劉紅巖;;C群腦膜炎球菌莢膜多糖結(jié)合疫苗的研制[J];中國生化藥物雜志;2006年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 丁壯;金寧一;王興龍;金擴(kuò)世;米志強(qiáng);王宏偉;殷震;;新城疫病毒HN蛋白基因的克隆、序列分析表達(dá)及其重組蛋白免疫原性研究[A];新世紀(jì) 新機(jī)遇 新挑戰(zhàn)——知識創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展（下冊）[C];2001年

2 李永光;李文卉;蓋文燕;王鴻盛;姚菊霞;曲自剛;王艷華;張德林;賈萬忠;RaduBlaga;付寶權(quán);;多頭帶絳蟲硫氧還蛋白過氧化物酶基因的克隆、表達(dá)及抗原性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜寄生蟲學(xué)分會第六次代表大會暨第十次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

3 農(nóng)藝;李艷萍;李亞楠;陳福生;李春松;黃月葵;葉強(qiáng);;b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗免疫原性的比較研究[A];第五次全國免疫診斷暨疫苗學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2011年

4 于小仙;曾肖艽;丁建祖;王越;沈慧英;沈麗英;樊晉江;;日本血吸蟲SVLBP重組蛋白的免疫原性及其對小鼠的免疫保護(hù)性研究[A];中國動(dòng)物學(xué)會全國第九次寄生蟲學(xué)學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];2003年

5 王萍;李繼承;;表達(dá)載體pET-29b-TCS的構(gòu)建、高效表達(dá)及表達(dá)產(chǎn)物的免疫原性和細(xì)胞毒性研究[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會2005年學(xué)術(shù)大會、青年學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2005年

6 劉威龍;周伯平;張明霞;楊倩婷;朱秀云;王敏;鄧群益;陳心春;;結(jié)核分枝桿菌ESAT-6蛋白的高效表達(dá)及在結(jié)核菌特異性細(xì)胞免疫檢測中的應(yīng)用[A];中國防癆協(xié)會臨床委員會、中國防癆協(xié)會基礎(chǔ)委員會學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

7 崔玉東;馬金柱;張晶;朱戰(zhàn)波;樸范澤;;S．a(chǎn)ureus IsdB基因克隆和蛋白表達(dá)及免疫原性研究[A];第二屆全國人畜共患病學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

8 胡長敏;龔瑞;鄭露;郭愛珍;;牛乳腺炎源金黃色葡萄球菌J9株Fnbp配基結(jié)合區(qū)基因的原核表達(dá)及其免疫原性[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會小動(dòng)物醫(yī)學(xué)分會第四次學(xué)術(shù)研討會、中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)外科學(xué)分會第十六次學(xué)術(shù)研討會論文集（1）[C];2009年

9 馬翠卿;魏林;李彩虹;王秀榮;;A族鏈球菌表面新發(fā)現(xiàn)蛋白Fba的原核表達(dá)及其免疫原性分析[A];河北省免疫學(xué)會第5次會員代表暨學(xué)術(shù)大會論文摘要集[C];2006年

10 洪艷;陳勇;楊連華;王怡婷;經(jīng)絡(luò);胡華軍;;戊型肝炎病毒嵌合蛋白的免疫應(yīng)答的初步研究[A];2005年浙江省醫(yī)學(xué)病毒學(xué)、醫(yī)學(xué)微生物與免疫學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 記者 陳云芬;沃森生物自主創(chuàng)新成功研發(fā)新疫苗[N];云南日報(bào);2009年

2 劉成剛　左朝勝;復(fù)能與羅氏攜手人類重組蛋白研發(fā)[N];科技日報(bào);2006年

3 郭姜寧 王曉光;甘肅評出去年十件科技大事[N];科技日報(bào);2005年

4 李健 姜維平 陳宣洪 陳爾佳;重組DNA驅(qū)動(dòng)疫苗第三次革命[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2011年

5 葉國標(biāo);為國家一級產(chǎn)業(yè)化項(xiàng)目找婆家[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2001年

6 記者楊健;腫瘤細(xì)胞遨游太空后發(fā)生變化[N];人民日報(bào);2003年

7 白毅;我國首獲旋毛蟲新基因[N];中國醫(yī)藥報(bào);2005年

8 齊繼成編譯;PowderJect的Fluvirin進(jìn)入Ⅰ期臨床[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

9 賢人;唐教授談流感疫苗[N];保健時(shí)報(bào);2003年

10 段煉煉邋葉頌濤;雙鷺?biāo)帢I(yè)(002038) 進(jìn)入高成長期可謂水到渠成[N];中國證券報(bào);2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 井申榮;微載體制備甲肝滅活疫苗的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2000年

2 馮爽;旋毛蟲不同發(fā)育時(shí)期基因重組蛋白的免疫原性分析及保護(hù)性研究[D];吉林大學(xué);2013年

3 張榮光;幽門螺桿菌omp11和lpp20基因的克隆及表達(dá)產(chǎn)物免疫原性和保護(hù)效果研究[D];鄭州大學(xué);2004年

4 尹雙輝;豬圓環(huán)病毒2型衣殼蛋白病毒樣顆粒的制備及其免疫原性的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

5 喬軍;斯氏艾美耳球蟲MIC-5基因的篩選、表達(dá)及重組蛋白免疫原性研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2007年

6 喻剛;重組四價(jià)A群鏈球菌疫苗的基因克隆、表達(dá)純化和免疫原性的初步研究[D];武漢生物制品研究所;2009年

7 牛東升;立氏立克次體外膜蛋白B基因的應(yīng)用研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2007年

8 毛芝娟;副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus主要外膜蛋白的克隆、表達(dá)和免疫原性研究[D];浙江大學(xué);2007年

9 錢炳俊;乙型肝炎新型植物口服疫苗的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2007年

10 張雪寒;EHEC O157：H7 Stx2B-Tir-Stx1B-Zot重組菌的構(gòu)建及其免疫原性的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 翟雪瓊;MP65和Sap2重組表達(dá)質(zhì)粒對小鼠系統(tǒng)性白色念珠菌感染的免疫保護(hù)作用研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

2 曾政;布魯氏菌新型疫苗的構(gòu)建及其免疫原性研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2004年

3 肖鉀鈣鎂;白喉毒素突變體CRM197的表達(dá)純化及性質(zhì)研究[D];天津商業(yè)大學(xué);2012年

4 余勁術(shù);新孢子蟲NcSRS2和NcSAG1基因及重組蛋白免疫原性的研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

5 杜倩;b型流感嗜血桿菌D蛋白的克隆、表達(dá)、純化及作為結(jié)合疫苗載體的初步研究[D];暨南大學(xué);2011年

6 李健;豬產(chǎn)毒素多殺性巴氏桿菌toxA基因的功能結(jié)構(gòu)域研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

7 閻雪飛;雞毒害艾美耳球蟲抗原NPmz19的免疫保護(hù)性研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

8 欒翔凌;SARS病毒E、M、N基因克隆、表達(dá)及免疫原性初步研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

9 王雅英;百日咳桿菌粘著素和菌毛的克隆、表達(dá)及免疫原性和保護(hù)性研究[D];中國藥品生物制品檢定所;2006年

10 凌珊珊;禽呼腸孤病毒σC基因的克隆表達(dá)及其免疫原性初步研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

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